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高效液相色谱串联质谱联用技术同时检测粮谷中9种氨基甲酸酯类农药残留? 　　摘? 要? 本研究采用了高效液相色谱串联质谱联用（HPLCMS/MS）技术，建立了高灵敏度的同时检测粮谷中9种氨基甲酸酯类农药残留量的方法。样品经乙腈提取，中性氧化铝填充柱净化，然后采用HPLCESI(+)MS/MS测定。对液质分离条件和样品前处理条件进行了优化。9种氨基甲酸酯类农药在0.1～100 μg/L范围内线性良好，相关系数为0.9986~0.9998。在0.001～0.05 mg/kg浓度范围内，平均加标回收率在73.40%～102.01%之间；相对标准偏差为1.25%～9.94%。该方法简便、快速、灵敏、净化效果好。可同时满足进、出口粮谷中多种氨基甲酸酯类农药残留量的检验工作需要。 　　关键词? 多残留分析，氨基甲酸酯类，粮谷，高效液相色谱串联质谱 　　1? 引? 言 　　氨基甲酸酯类农药是一类广谱杀虫剂，是以甲酸酯为前体化合物发展而来的，具有分解快、残留期短、高效、选择性强等特点。20世纪70年代以来，由于有机氯农药相继被不同国家禁用或者限制使用，以及抗有机磷农药的昆虫品种的日益增多，氨基甲酸酯类农药的使用量逐年增加。随着甲酸酯类杀虫剂使用量及范围的扩大，其在作物中的残留以及对人类健康和环境造成的毒害也越来越为人们所关注。鉴于此，国际上先后制定了谷物中多种氨基甲酸酯类农药的最高残留限量[１]（MRL）。日本政府规定进口大米中的MRL为：恶虫威、异丙威分别为0.5 mg/kg，抗蚜威、甲硫威分别为0.05 mg/kg，仲丁威为0.3 mg/kg。这些规定使我国粮谷出口面临越来越多的技术壁垒。因此，建立一种分析粮谷中氨基甲酸酯类农药残留量的简便、快速、高灵敏度的检测方法十分紧迫。目前，对氨基甲酸酯类杀虫剂残留分析的报道有水体、水果和蔬菜中气相色谱质谱（GCMS）、高效液相色谱（HPLC）、高效液相色谱质谱（HPLCMS）分析等[２～７]。由于该类化合物极性强，热稳定性较差，有些物质在气相色谱分析的温度下发生分解，用GC或GCMS并不理想；尽管HPLC紫外、HPLC荧光检测已经被广泛用于检测氨基甲酸酯类农药，但灵敏度尚无法满足实际样品分析的需要。液相色谱串联质谱法的检出限低、选择性强。目前运用LCMS/MS法检测氨基甲酸酯，国外报道有蔬菜和水果、果汁和酒以及柑桔中的多种氨基甲酸酯的检测[８，9]，本实验研究了粮谷中甲硫威、硫双灭多威、抗蚜威等9种氨基甲酸酯类农药残留分析的样品前处理方法和液质联用分离检测条件。结果表明，本方法简便、灵敏高、净化效果好，可满足进出口粮谷中多种氨基甲酸酯类农药残留量的检验工作需要。 　　2? 实验部分 　　2.1? 仪器与试剂API 4000四极杆串联质谱仪（美国ABI公司）；1100系列高效液相色谱仪（美国Agilent公司）。农药标准品（Dr.Ehrenstorfer Co.，Germany）。乙腈、甲醇、丙酮、乙醚均为色谱纯（TEDIA，USA）；标准溶液：甲醇配制标准储备液（200 mg/L），根据检测要求用流动相稀释成相应的标准工作溶液。水为超纯水。 　　2.2? 样品的提取和净化称取2.00 g磨碎的小麦粉置于80 mL烧杯中，加6 mL水润湿样品，20 min后加入20 mL乙腈，均质1 min（16000 r/min）后，过滤到50 mL离心管中，离心管底部放有约5 g NaCl（盐的加入有利于乙腈与水的分离），收集滤液后盖上塞子，涡旋1 min，静置片刻，离心2 min（4000 r/min），使乙腈层与水层分离，转移上层乙腈层溶液到100 mL烧瓶中。再加10 mL乙腈到离心管中，重复提取一次，合并乙腈层，40℃水浴浓缩近干。残渣用3 mL丙酮乙醚（20∶80，Ｖ／Ｖ）溶解，待净化。将上述溶液转移到中性氧化铝层析柱(先在柱底填少许脱脂棉，然后装入约2 cm高无水硫酸钠，再将10 g 5％水脱活过的中性氧化铝倒入装有20 mL乙醚的烧杯中，搅拌使其分散均匀，然后湿法装入柱中，最后在上面再填约2 cm高的无水硫酸钠)，用10 mL丙酮乙醚（20∶80，Ｖ／Ｖ）分３次洗涤残渣，上柱，最后用80 mL丙酮乙醚（20∶80，Ｖ／Ｖ）洗脱。洗脱液在旋转蒸发仪上30℃、以60 r/min减压浓缩至干，用流动相定容到2 mL，待测定。 　　2.3? 色谱条件色谱柱：ZORBAX Eclipse XDBC8(150 mm×4.6 mm i.d.，美国Agilent 公司)；流动相：甲醇醋酸铵溶液（5 mmol/L），梯度洗脱程序表见表1；流速：0.3 mL/min ；柱温：20℃；进样量：20 μL。 　　2.4? 质谱条件电喷雾离子源，正离子扫描方式，多反应监测，电喷雾电压5250 V，离子源温度400℃；雾化