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酵母细胞固定化[精选]
酵母细胞固定化 你知道酶在生活中有哪些应用吗? 一、实验目的 1、了解固定化酶技术和固定化细胞技术 2、掌握包埋法的原理及过程 3、掌握酵母细胞固定化的方法 二、实验原理 包埋法:将酶或细胞包埋在不溶于水的多孔性载体中 凝胶包埋法:应用最广泛的细胞固定方法,适用于各种微生物、动物和植物细胞的固定化。 所用载体:琼脂糖、海藻酸钠、醋酸纤维素、 聚丙烯酰胺、 明胶 三、实验药品及器材 药品:干酵母、海藻酸钠、无水氯化钙 器材:50mL小烧杯、 500mL烧杯、 10mL量筒、 200mL量筒、玻璃棒、 恒温水浴箱、电子天平、注射器 四、实验步骤 1、酵母的活化(1g干酵母+10mL蒸馏水+50mL烧杯中,搅拌均匀,活化1h左右) 2、配置固化液( 0.83gCaCl2 +150mL蒸馏水 +500mL烧杯,充分溶解) 3、配置载体(0.7g海藻酸钠+10mL蒸馏水+50mL烧杯搅拌水浴溶解,定容至10mL,冷却) 4、混合(酵母活化液与载体混合,搅拌均匀) 5、固定化酵母细胞(注射器恒速、缓慢推注,固定30min) 固定30分钟 实验的检测 一是用镊子夹起一个凝胶珠放在实验桌上用手挤压,如果凝胶珠不容易破裂,没有液体流出,就表明凝胶珠的制作成功。 二是在实验桌上用力摔打凝胶珠,如果凝胶珠很容易弹起,也能表明制备的凝胶珠是成功的。 * * 酶 固定酶与细胞的常用方法 包埋法 化学结合法 吸附法
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