实验二淀粉质原料中粗淀粉的测定..doc

实验二 淀粉质原料中粗淀粉的测定 一、实验目的 1、掌握廉-爱农（Lane-Eynon）法测定还原糖的原理和方法； 2、熟悉容量滴定过程。 二、实验原理 葡萄糖(或还原糖)能还原铜盐类(以酒石酸钾钠铜为最显著) 为Cu2O红色沉淀。 主要反应如下： (C6H10O5)n+ nH2O 酸或酶 nC6H12O6 2、费林(Fehling)试剂是一种氧化剂，由甲液和乙液组成，甲液为硫酸铜(CuSO4) 溶液，乙液为氢氧化钠(NaOH)和NaKC4H4O6)溶液，平时甲液、乙液分别贮存，使用时等体积混合。混合后，CuSO4和NaOH反应，生成蓝色的氢氧化铜(Cu(OH)2)沉淀。 CuSO4+2NaOH Cu(OH)2 (蓝色)+Na2SO4 生成的Cu(OH)2沉淀与酒石酸钾钠反应，生成天蓝色的酒石酸钾钠铜配合物，使Cu(OH)2溶解。 NaKC4H4O6+ Cu(OH)2 NaKCuC4H2O6(天蓝色)+2H2O 3、NaKCuC4H2O6配合物中的Cu2+具有氧化性，当与还原糖共热时，能使还原糖中的羰基氧化，而Cu2+被还原生成一价的Cu2O(红色)沉淀。 2NaKCuC4H2O6+ C6H12O6+2H2O 2NaKC4H4O6+ C6H12O7+ Cu2O (红色) 4、反应终点用次甲基蓝(蓝色)指示剂显示。因次甲基蓝氧化能力较Cu2+弱，故待Cu2+全部还原后，过量一滴还原糖立即使次甲基蓝还原成次甲基蓝隐色体(无色)，溶液蓝色消失以示终点。 C6H12O6+次甲基蓝（蓝色）+ H2O C6H12O7+次甲基蓝隐色体（无色）+HCl 三、实验材料与试剂 1、样品 玉米粉 2、器材 电子天平；电热恒温水浴锅；回流装置；酸碱滴定装置；调温电热套；pH试纸；三角瓶。 3、试剂 CuSO4·5H2O，酒石酸钾钠，NaOH，HCl溶液；次甲基蓝；葡萄糖。 费林试剂甲液：称取69.3 CuSO4·5H2O，用水溶解并稀释至1000mL，如有不溶物可用滤纸过滤。 费林试剂乙液：称取346g酒石酸钾钠，100g NaOH，用水溶解后定容至1000 mL（注：配制该溶液时，先溶解NaOH，酒石酸钾钠需分次加入）。 2%HCl溶液：量取4.5 mL浓HCl，用水定容至100mL。 20%NaOH溶液：称取200gNaOH，用水溶解并定容至1000mL。 1%次甲基蓝溶液：称取1g次甲基蓝，加100mL水，加热溶解，冷却后贮存于棕色瓶中。 0.2%标准葡萄糖溶液：准确称取2.000g无水葡萄糖（预先在100-105℃干燥2h），用水溶解，加5mL浓HCl，用水定容至1000mL。 四、实验步骤 1、样品的水解 准确称取样品1.5-2g置于250mL磨口三角瓶中，加入100mL 2%HCl溶液使样品充分润湿。瓶口安上冷凝器，于沸水浴中回流水解3h。取出迅速冷却，立即用20%NaOH中和至中性或微酸性（用pH试纸试验）。过滤，用水充分洗涤残渣，定容至500mL作为供试水解糖液。 2、费林试剂的校正 吸取费林试剂甲液、乙液各5mL，置入250ml三角瓶中，加20mL水，并从滴定管中加入约24mL 0.2%标准葡萄糖溶液（其预加量应控制在后滴定时消耗0.2%标准葡萄糖溶液在1ml以内，如有超过或不足，则应增加或减少最初加入标准葡萄糖溶液的体积，重新滴定），摇匀，加热至沸腾，并保持微沸2min。加2滴1%次甲基蓝溶液，继续用0.2%标准葡萄糖溶液滴定至蓝色消失，此滴定操作需在1min内完成。记录消耗标准葡萄糖溶液的总体积VmL。 3、样品的预测 吸取费林试剂甲液、乙液各5mL，置入250ml三角瓶中，加20mL水，加热至沸腾，并保持微沸2min。加2滴1%次甲基蓝溶液，用水解糖液滴定至蓝色消失，记录消耗水解糖液的体积V1mL。 4、样品的测定 吸取费林试剂甲液、乙液各5mL，置入250ml三角瓶中，并从滴管中预先加入(V1-1)mL水解糖液（其量应控制在后滴定时消耗水解糖液在1mL以内），加(44-V1+1)mL水，摇匀，加热至沸腾，并保持微沸2min。加2滴1%次甲基蓝溶液，继续用水解糖液滴定至蓝色消失，此滴定操作需在1min内完成。记录消耗水解糖液的体积V2mL。 5、记录： 样品质量W（g） V葡萄糖液 V1水解糖液 V2水解糖液 6、计算： 1) 费林试剂校正值 先求得10ml费林试剂相当的葡萄糖质量F（g）: F=cV 式中：c----标准葡萄糖浓度，g/ml； V----消耗标准葡萄糖溶液的总体积，ml； 再从附表1中查得Vml时相当的葡萄糖质量F0(g