高级生物化学复习资料[精选].docx

一.生物大分子的结构与功能1.中心法则2.DNA碱基的组成特点（Chargaff规则）1. 同一生物的不同组织的DNA碱基组成相同；2. 同一种生物DNA碱基组成不随生物体的年龄、营养状态或者环境变化而改变；3. 几乎所有的DNA，无论种属来源如何，其腺嘌呤摩尔含量与胸腺嘧啶摩尔含量相同［A］ =［T］，鸟嘌呤摩尔含量与胞嘧啶摩尔含量相同［G］ =［C］，总的嘌呤摩尔含量与总的嘧啶摩尔含量相同［A］＋［G］=［C］＋［T］。4. 不同生物来源的DNA碱基组成不同，表现在A＋T/G＋C比值的不同。这些结果后来为DNA的双螺旋结构模型提供了一个有力的佐证。3.DNA双螺旋结构要点：（1） DNA分子由两条反向平行的多核苷酸链构成双螺旋结构。两条链围绕同一个“中心轴”形成右手螺旋，螺旋表面有一条大沟和一条小沟。（2）嘌呤碱和嘧啶碱层叠于螺旋内侧，碱基平面与纵轴垂直，碱基之间的堆积距离为0.34nm 。磷酸与脱氧核糖在外侧，彼此之间通过磷酸二酯键连接，形成DNA的骨架。糖环平面与中轴平行。（3）双螺旋的直径为2nm，顺轴方向每隔0.34nm有一个核苷酸,两个核苷酸之间的夹角为36o，因此，沿中心轴每旋转一周有10个核苷酸。（4）一条多核苷酸链上的嘌呤碱基与另一条链上的嘧啶碱基以氢键相连，匹配成对，配对的原则是A= T之间形成二个氢键，G C之间形成三个氢键。因此， DNA的一条链为另一条链的互补链。4.mRNA的一级结构特点：（1）大多数真核mRNA的5′末端均在转录后加上一个7-甲基鸟苷，同时第一个核苷酸的C′2也是甲基化，形成帽子结构：m7GpppNm-。（2）大多数真核mRNA的3′末端有一个多聚腺苷酸(polyA)结构，称为多聚A尾。5.tRNA的二级结构：单链、三叶草形、四臂四环6.核酸的溶解特性：RNA和DNA都是极性的化合物，两者都微溶于水，不溶于乙醇、乙醚、氯仿等有机溶剂。它们的钠盐易溶于水。7.核酸的紫外吸收特性：吸收峰是260nm;变性增色，复性减色。8.Tm值：通常把热变性过程中光吸收达到最大吸收一半时的温度称为该DNA的熔点或熔解温度，用Tm表示。DNA的Tm值与以下因素有关：（1）、 DNA的均一性:均一性愈高的样品，熔解过程的温度范围愈小。（2）、 G-C的含量：（ G-C）%=（tm-69.3）x2.44（3）、介质离子强度：介质离子强度较低，DNA的tm也低。9.OD260的应用：（1） DNA或RNA的定量；（2）判断核酸样品的纯度：DNA纯品: OD260/OD280 = 1.8；RNA纯品: OD260/OD280 = 2.010.变性：（1）、DNA变性的概念：指DNA分子中的双螺旋结构解链为无规则线性结构的现象。（2）、DNA变性的本质：维持双螺旋稳定性的氢键断裂，碱基间的堆积力遭到破坏，但不涉及到其一级结构的改变。（3）、导致DNA变性的因素：凡能破坏双螺旋稳定性的因素，如加热、极端的pH、有机试剂甲醇、乙醇、尿素及甲醛等，均可引起核酸分子变性。11.复性：DNA复性(renaturation)：变性DNA在适当条件下，又可使两条彼此分开的链重新缔合成为双螺旋结构，这一现象称为复性。热变性的DNA经缓慢冷却后即可复性，这一过程称为退火(annealing) 。12.分子杂交：当两条不同来源的DNA链或DNA链与RNA链之间存在互补顺序时，在复性时可发生碱基互补配对形成局部双螺旋区，称分子杂交。应用：核酸杂交技术是目前研究核酸结构、功能常用手段之一。用来检验核酸的缺失、插入；制备特定的探针（probe）通过杂交技术可进行基因的检测和定位研究。13.PCR：PCR即聚合酶链反应，是模拟体内DNA复制条件，应用DNA聚合酶特异性扩增某一DNA片段的技术。体外程序化的DNA合成技术。二、蛋白质的结构与功能1.氨基酸的分类：非极性氨基酸、酸性氨基酸、碱性氨基酸、非解离的极性氨基酸2.构象：蛋白质的多肽链并非线性伸展，而是以一定的方式折叠成特定的空间结构，并在此基础上产生特有的功能。（构象不涉及共价键的形成或破坏。指一个分子结构中的一切原子绕共价单键旋转时产生的不同空间排列方式。一种构象变成另一种。）3.超二级结构：在蛋白质中，某些相邻的二级结构单位（α—螺旋、β—折叠、β—转角、无规卷曲）组合在一起，相互作用，从而形成有规则的二级结构集合体，充当更高层次结构的构件，称为超二级结构。4.结构域：对于较大的球蛋白分子，一条长的多肽链，在超二级结构的基础上，往往组装成几个相对独立的球状区域，彼此分开，以松散的单条肽链相连。这种相对独立的球状区域，称为结构域。5.氨基酸的等电点：在某一PH的溶液中，氨基酸解离成阳离子和阴离子的趋势及程度相等，成为兼性离子，呈电中性，此时的溶液ph称该氨基酸的等电点。6.蛋