流式细胞仪培训手册(完成版)..doc

流式细胞仪培训手册 序 论 学习仪器的最好方法是操作仪器，然而在理解原理的基础上进行仪器操作无疑会起到事半功倍的作用。 本书介绍了流式细胞仪的基本知识，并从不同角度详尽阐述了各种台式机（FACScanTM，FACSortTM，FACSCaliburTM，和BD LSR）与大型机（FACS VantageTM，FACSVantageTM SE， 和FACStarPLUSTM）之间的不同。阅读本书有助于增强读者操作仪器的动手能力和经验。 目 录 第1章 综述…………………………………………………………………… 4 第2章 液流系统……………………………………………………………… 第3章 散射光信号及荧光信号……………………………………………… 3.1 散射光信号……………………………………………………… 3.2 荧光信号………………………………………………………… 3.3 荧光补偿 第4章 光电系统……………………………………………………………… 4.1 光平台…………………………………………………………… 4.2 光学滤片……………………………………………………… 4.3 信号探测器…………………………………………………… 4.4 阈值……………………………………………………………… 第5章 数据分析……………………………………………………………… 5.1 数据采集及显示………………………………………………… 5.2 设门……………………………………………………………… 5.3 细胞亚群的数据分析………………………………………… 5.4 流式细胞仪其它应用的数据分析……………………………… 5.5 CellQuest软件使用…………………………………………… 5.6 MutiSet软件使用……………………………………………… 5.7 Simultest软件使用…………………………………………… 5.8 B27软件使用………………………………………………… 5.9 WinMDI软件使用………………………………………… 5.10 FACSPress软件使用………………………………………… 5.11 System II软件使用………………………………………… 5.12 MultiCycle软件使用………………………………………… 5.13 Modfit使件使用…………………………………………… 第6章 流式基本检测项目 6.1 淋巴细胞亚群检测 （双色、三色、四色，三种软件分析） 6.2 B27的检测……………………………………………………… 6.3 血小板抗体检测……………………………………………… 6.4 网织血小板及红细胞分析…………………………………… 6.5 干细胞检测…………………………………………………… 6.6 DNA倍体分析…………………………………………………… 6.7 凋亡检测………………………………………………………… 第7章 分选 6.1 分选……………………………………………………………… 第8章 激光器及光路校正…………………………………………………… 7.1 激光器的工作原理……………………………………………… 7.2 光路校正………………………………………………………… 第9章 答案……………………………………………………………… 第一章 综 述 流式细胞术是一项快速检测分析单个粒子多物理特性的高技术，通常指细胞通过激光束时在液流中的特性，即粒子的大小，密度或是内部结构，以及相对的荧光强度。通过光电系统记录细胞的散射光信号和荧光信号可得知细胞特性。 流式细胞仪主要由三部分组成：流动室和液流系统；光路系统以及电系统。其作用如下： ·液流系统：依次传送待测样本中的细胞到激光照射区。 ·光路系统：细胞由激光激发，通过光学滤片产生光信号，并传送到相应的探测器。 ·电系统：把光信号转换为电信号。对于有分选装置的仪器，电系统可初始化分选条件。 在流式细胞仪中，细胞被传送到液流中的激光照射区。任何存在于悬液中的直径为0.2-150微米的粒子或细胞都适用于流式分析。在实际工作中，用实体组织进行流式细胞分析往往是不可能的，分析之前必须对其进行分解。被液滴包绕的粒子称为细胞液柱，当粒子经过激光照射区时，通过激光激发产生散射光。含有荧光的粒子就会表现出其荧光特性。散射光和荧光由光路系统（相应的透镜，滤片和探测器）收集。分光器和滤光片引导散射光和荧光至相应的探测器，把光信号转换为电信号。 单个粒子通过其表