单克隆抗体的制备及应用__培训课件.ppt

作为生物治疗的导向武器 作为免疫抑制剂 作为研究工作中的探针 增强抗原的免疫原性 检验医学诊断试剂 农兽药的快速检测 作为亲和层系的配体 应用 单克隆抗体的应用 作为亲和层系的配体 单克隆抗体能与其相应的抗原特异性结合，因而能能够从复杂系统中识别出单个成分。只要得到针对某一成分的单克隆抗体，固定在层析柱上，通过亲和层析，即可从复杂的混合物中分离、纯化这一特定成分。 　　　　 优点：与其他提取方法相比，具有简便、快速、经济、产品活性高等优点。 蛋白质提纯 先用待提纯蛋白质制成单抗，再将单抗固定在惰性固相 基质上，制成层析柱。而后倒入混合液，当混合液流经单抗时，相应的蛋白质与单抗特异性结合，杂质则随洗脱剂流走。再用特殊的洗脱剂将蛋白质洗脱下来，则可将蛋白质提纯。 在亲和层析中单克隆抗体是主要的配体 作为生物治疗的导向武器 以抗肿瘤为例：将针对某一肿瘤抗原的单克隆抗体与化疗药物或放疗物质连接，利用单克隆抗体的导向作用，将药物或放疗物质携带至靶器官，直接杀伤靶细胞，称为肿瘤导向治疗。另外，将放射性标记物与单克隆抗体连接，注入患者体内可进行放射免疫显像，协助肿瘤的诊断。 常见抗肿瘤细胞毒剂：化疗药物、细菌毒素、植物毒素或放射性同位素等。 这不仅提高了抗体的疗效，也可降低细胞毒剂对正常细胞的毒性反应。 作为免疫抑制剂 抗人T淋巴细胞单抗（McAb）作为一种新型免疫抑制剂，已广泛应用于临床治疗自身免疫疾病和抗器官移植的排斥反应，其作用机理有赖于McAb的种类及其免疫学特性。 例子：对于同种骨髓移植的供体骨髓，在体外经抗T细胞单抗加补体处理，能够减轻移植物抗宿主病的发生。 作为研究工作中的探针 利用单克隆抗体的特性可把它作为研究工作中的探针。此时，可以从分子、细胞和器官的不同水平上，研究抗原物质的结构与功能关系，进而可以从理论上阐明其机理。 例子：用荧光物质标记单抗作为探针，能快速地确定与其结合的相应生物大分子在细胞中的位置和分布。 3 佐剂能刺激吞噬细胞对抗原的处理 5 可刺激致敏淋巴细胞的分裂和浆细胞产生抗体 2 增加抗原的表面积，使抗原易于被巨噬细胞吞噬 7 改变抗体的产生类型以及产生迟发型变态反应，并使其增强 4 可促进淋巴细胞之间的接触，增强辅助T细胞的作用 6 可提高机体初次和再次免疫应答 增强抗原的免疫原性 1 改变抗原的物理性状，可 使抗原物质缓慢地释放，延长了抗原的作用时间 将单抗制成佐剂加在疫苗里，则可减少疫苗接种时药物的用量和避免多次接种并不能引起机体更好地产生免疫应答，从而减少疫苗接种的风险。佐剂的作用机理： 细胞因子的测定 激素测定 肿瘤抗原的检测 免疫细胞及其亚群的的检测 病原微生物抗原、抗体的检测 作为检验医学实验室的诊断试剂，单克隆抗体以其特异性强、纯度高、均一性好等优点，广泛应用于酶联免疫吸附试验、放射免疫分析、免疫组化和流式细胞仪等技术。并且单克隆抗体的应用，很大程度上促进了商品化试剂盒的发展。 检验医学诊断试剂 农兽药快速检测 农兽药属于小分子物质，半抗原，无免疫原性，不 能刺激动物产生抗体，必须先将其制备成人工抗原， 以人工抗原免疫动物，使动物的免疫系统发生应答反 应，从而制备出对该农药具特异性的多或单克隆抗体 国外已制备多种农兽药单克隆抗体并应用于农药和兽 药残留的免疫分析。 展望 5 第五部分 展望 单克隆抗体的这些特性使得它成为治疗学上的热点 最突出的问题是如何降低单抗的免疫原性，单抗的异源性所引起的抗体反应，不但降低了单抗的效价，而且会给患者带来严重的后果。 对异源性单抗进行改造及人源性单抗的研制成为单抗的重要研究方向 感谢大家 请对不足之处提宝贵意见！ 模板来自于 * 模板来自于 * 模板来自于 * * XXXXXXXXXXXXXXXXX * XXXXXXXXXXXXXXXXXX 单克隆抗体的制备及应用 西南大学 目 录 1 单克隆抗体的简介 2 单克隆抗体技术发展经历 3 单克隆抗体的制备 4 单克隆抗体的应用 5 展望 单克隆抗体的简介 1 第一部分 单克隆抗体的简介 1975年分子生物学家G.J.F.克勒和C.米尔斯坦在自然杂交技术的基础上，创建立杂交瘤技术。他们把可在体外培养和无限增殖的骨髓瘤细胞与经抗原免疫后的纯系小鼠脾细胞融合，形成B细胞杂交瘤。这种杂交瘤细胞既具有瘤细胞易于在体外无限增殖的特性，又具有脾淋巴细胞那样合成和分泌特异性抗体的特点。 这种杂交瘤，通过克隆化可得到来自单个杂交瘤细胞的单克隆系，即杂交瘤细胞系，它所产生的抗体是针对同一抗原决定簇的高度同质的抗体，即所谓单克隆抗体（ mAbs ），简称单抗。 单克隆抗体技术的发展经历 2 第二部分 鼠源性单克隆抗体 嵌合性单克隆抗体