【2017年整理】PBS缓冲液的配制方法.doc

PBS缓冲液配方不管是免疫组化，还是细胞培养中，常用到PBS缓冲液，下面是我们实验室的配方，供大家参考。我们实验室的配方：A液：0.1mol/L磷酸二氢钾：磷酸二氢钾（KH2PO4，MW136.09）1.361g，加双蒸水至100ml。B液：0.1mol/L磷酸氢二钠：酸酸氢二钠（Na2HPO4.2H2O，MW177.99）1.78g，加双蒸水至100ml。或者酸酸氢二钠（Na2HPO4.12H2O，MW358.14）3.58g，加双蒸水至100ml。pH －－ A液 （ml） －－ B液（ml） 5.60 －－ 9.50 －－ 0.255.91 －－ 9.00 －－ 1.006.24 －－ 8.00 －－ 2.006.47 －－ 7.00 －－ 3.006.64 －－ 6.00 －－ 4.006.81 －－ 5.00 －－ 5.006.98 －－ 4.00 －－ 6.007.17 －－ 3.00 －－ 7.007.38 －－ 2.00 －－ 8.007.73 －－ 1.00 －－ 9.008.04 －－ 0.50 －－ 9.50一般免疫组化用PBS都只包含Na2HPO4?12H2O（磷酸氢二钠） NaH2PO4?2H2O（磷酸二氢钠）Nacl 用于细胞培养的PBS需含有氯化钾称取8g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4和0.24g KH2PO4,溶于800ml蒸馏水中，用HCl调节溶液的pH值至7.4，最后加蒸馏水定容至1L即可0.01MPBS缓冲液 称取NaCl?8g，KCl?0.2g，Na2HPO4?12H2O?3.63g,?KH2PO4?0.24g，溶于900ml双蒸水中，用盐酸调pH值至7.4，加水定容至1L，常温保存备用。PBS是最普遍不过的实验室缓冲液，但其配方各异。以下是我的总结：?母液的配制：?0.2M?Na2HPO4：称取?71.6g?Na2HPO4-12H2O，溶于?1000ml?水0.2M?NaH2PO4：称取?31.2g?NaH2PO4-2H2O，溶于1000ml?水各种浓度PB(pH=7.4)的配制：先配?0.2M?PB?(pH=7.4，100ml)：取19ml?0.2mol/L的?NaH2PO4，?81ml?0.2mol/L?的?Na2HPO4,?即可。然后?只需将0.2M?PB?(pH=7.4)按相应比例适当稀释?即可，如：0.1M?PB（PH=7.4）?：取?500ml?0.2M?PB，加水稀释至?1000ml?即可。0.01M?PB?（PH=7.4）：取50ml?0.2M?PB，加水稀释至?1000ml?即可。0.02M?PB?（PH=7.4）：取100ml?0.2?M?PB，加水稀释至?1000ml?即可。?若需要?NaCL?的话，加入?NaCL?至0.9%（g/100ml）即可。?另：其它各种另?PH值的?0.2M?PB（100ml)配方?：pH???????0.2M?NaH2PO4（ml）???0.2M?Na2HPO4（ml）5.7?????????????93.5??????????????????????????6.55.8?????????????92?????????????????????????????8????????????5.9?????????????90?????????????????????????????106.0?????????????87.7??????????????????????????12.36.1?????????????85?????????????????????????????156.2?????????????81.5??????????????????????????18.56.3?????????????77.5??????????????????????????22.56.4?????????????73.5??????????????????????????26.56.5?????????????68.5??????????????????????????31.56.6?????????????62.5??????????????????????????37.56.7?????????????56.5??????????????????????????43.56.8?????????????51????????????????????????????496.9??????????????45???????????????????????????557.0??????????????38???????????????????????????62