维生素C的定量测定教材分析.ppt

  材料的选取 标准液：取一定量抗坏血酸粉末，加入适量1%草酸溶液溶解配成0.1mg/实验ml的维C标准液。 样品： 每445ml水溶C100中含维C100mg 大量资料表明，100g鲜枣果肉中维C含量可高达200~500mg,且鲜枣汁液颜色浅淡，对实验滴定过程中滴定终点的判断影响较小。 维C提取液： 由于Vc的还原性很强，较容易被溶液和空气中的氧氧化，在碱性介质中这种氧化作用更强，因此滴定宜在酸性介质中进行，以减少副反应的发生。考虑到维C在强酸性中也易被氧化，故一般选在pH为3~4的弱酸性溶液中进行滴定。因此，本试验采用2％草酸作为提取液。 预计结果及其分析 测得的Vc的含量较文献值偏低，分析如下： 1，在准备组织液时有洒出，使得测时的减少 2，研磨不够充分 3，滴定时已有部分Vc被氧化 用2％草酸制备样品提取液，可有效地抑制抗坏血酸氧化酶，而防止维C被氧化影响测定结果。 如果样品中有较多亚铁离子（Fe2＋）时，亦会使染料还原而影响测定，这时应改为8％乙酸制备样品提取液。 * * 实验五 维生素C的定量测定 第七组 组员：杨曼 杨芳 朱晨 1）学习和掌握用2,6-二氯酚靛酚滴定法测定植物材料中抗坏血酸含量的原理与方法。 2）学习和掌握滴定法的基本操作过程； 3）了解并掌握鲜枣中维生素C的含量测定。 实验目的 实验原理 维C（抗坏血酸）: 是一种含有6个碳原子的酸性多羟 基化合物, 属水溶性维生素，具有很强的还原性。 预防治疗坏血病，参与神经介质及激素的合成，参与体内的氧化还原反应。 广泛存在于新鲜水果.蔬菜中。 　实验试剂 2,6-二氯酚靛酚是一种染料，在碱性溶液中呈蓝色，在酸性溶液中呈红色。抗坏血酸具有强还原性，能使2,6-二氯酚靛酚还原为无色。 ? ? 还原型 氧化型 实验材料、主要仪器和试剂 实验材料：鲜枣 仪器：天平、榨汁机、容量瓶、吸管、 　　　锥形瓶、微量滴定管、纱布 试剂：2％草酸、1％草酸 　　　标准抗坏血酸溶液（0.1mg/mL）： 用1％草酸溶液溶解。临用现配。 0.１％的2,6-二氯酚靛酚溶液：２5mg 2,6-二氯酚靛酚溶于１５0mL含５.２mg碳酸氢钠的热水中，冷却后再用蒸馏水稀释至２５０mL，滤去不溶物，贮棕色瓶内，4℃保存一周有效。 （2,6-二氯酚靛酚对眼睛，皮肤，呼吸系统有刺激性） 一、提取 称取鲜枣100g，加入2％草酸溶液100ml，研磨成匀浆（在破碎的同时加人提取剂，以减少VC损失），用纱布过滤。滤渣用2％草酸洗几次，合并滤液，记录滤液总体积。 操作步骤 二、标准液滴定 准确吸取1mL抗坏血酸标准液（含0.1mg抗坏血酸）于100mL锥形瓶中，加９mL 1％草酸溶液，用2,6-二氯酚靛酚滴定至淡红色（15S内不褪色即为终点）。记录所用染料溶液的体积V标（mL），计算出1mL染料相当于多少mg抗坏血酸的量（mg）（记作T）。取１０ml 1％草酸作空白对照，按以上方法滴定（ＶＢ）。 三、样品滴定 准确吸取样品提取液（上清液或滤液）两份，每份１0.0mL，分别放入２个100mL锥形瓶中，按上面的操作进行滴定并记录所用染料溶液体积（mL）。记作ＶＡ 四、结果计算 取两份样品滴定所用染料体积平均值，代入下式计算100g样品中还原型抗坏血酸的含量： ＶＣ含量（mg/100 g样品） W×Ｄ （VＡ－ＶＢ）×T×Ｃ ×100 ＝ 式中： VＡ— 滴定样品提取液消耗染料平均值（mL） ＶＢ—滴定空白对照所耗用的染料的平均ml数 T —１mL染料所能氧化抗坏血酸mg数 Ｃ —样品提取液的总ml数 Ｄ —滴定时所取的样品提取液ml数 W —样品重量（g） 1，样品提取液定容时若泡沫过多，可加几滴辛醇或丁醇消泡。 ２，样品的提取液制备和滴定过程，要避免阳光照射和与铜、铁器具接触，以免抗坏血酸被破坏。 3，滴定过程宜迅速，一般不超过2min。样品滴定消耗染料1～4mL为宜，如果超出此范围，应增加或减少样品提取液用量。 附 注 ４，２％草酸有抑制抗坏血酸氧化酶的作用，而１％草酸无此作用。 ５，提取的浆状物如不易过滤，也可离心，留取上清液进行滴定。 实验优缺点 优点：简便易行，可以一次测定大量的样品。 缺点：1，只能测定还原型抗坏血酸，不能测出具有同样生理功能的氧化型抗坏血酸和结合型抗坏血酸。 2，样品中的色素经常干扰对终点的判断 为什么用2%草酸提取样品？为什么用1%草酸溶解抗坏血酸标准液？ 思考题： *