蚕豆根尖染色体核型汇总.ppt

实验二 蚕豆根尖有丝分裂观察及染色体的核型分析 课前预习题 1、 细胞周期包括哪几个时期？每个时期的特点有哪些？ 课前预习题 1、 细胞周期包括哪几个时期？每个时期的特点有哪些？ 2、染色体制片中，固定的作用是什么？ 3、染色体制片中，解离的作用是什么？ 4、有丝分裂观察时取根尖，具体需要哪个位置？为什么？ 1. 掌握植物染色体常规压片技术； 2. 熟悉植物细胞周期染色体的动态变化过程及特点； 3. 学习和掌握核型分析的方法； 4. 进一步了解染色体形态特征、核型分析的原理以及各项参数的意义。 一、 实验目的 正在分裂的分生组织细胞经固定、解离、染色、压片制成的染色体玻片标本，在显微镜下可观察到细胞分裂过程及染色体变化情况。 染色体的核型分析就是分析细胞染色体数目、形态和结构特点，并用图和公式等将这些特点展现出来，从而有助于基因定位及其它遗传分析。 二 、实验原理 三、 实验材料 蚕豆种子 蚕豆根尖有丝分裂中期照片 四、实验药品、器具 恒温培养箱、显微镜、尺，小剪刀，小镊子，胶水、铅笔等。 卡诺固定液、改良苯酚品红染液、解离液（浓HCl和无水乙醇1:1混合液） 一）有丝分裂的观察 1、材料培养 浸种24h，撒在垫有滤纸的磁盘中，25度培养，长出1-2cm幼根即可。 2、固定8-24h，转入70%乙醇，4度保存。 3、解离：用蒸馏水漂洗根尖2-3次，放入解离液解离10min，水洗2-3次； 4、染色：切下根尖生长点1-2mm，撕碎，染10-15min；注意 五、实验步骤 5、压片：吸水纸吸出染液，加少量蒸馏水，盖上盖玻片（注意），大拇指垂直下压，使分生组织细胞铺成薄薄一层，滤纸吸取多余液体； 6、镜检：如果细胞没有散开，可用镊子柄轻敲盖玻片，如果染色体没有散开，可用铅笔橡皮头敲打； 7、观察、绘图和拍照（要求一致）。 二）染色体的核型分析 编号——测量——计算——确定染色体类型——填表——配对——剪贴排列——确定核型公式 基本知识点： 染色体总长度：细胞单倍体全部染色体长度之和。 相对长度：每一条染色体的长度与总染色体长度的百分比。 臂比（臂率）：长臂长度与短臂长度之比。 臂比值 着丝点位置 表示符号 1.00 正中部着丝点 M 1.01～1.70 中部着丝点区 m 1.71～3.0 亚中部着丝点区 sm 3.01～7.00 亚端部着丝点区 st 7.01～∞ 端部着丝点区 t ∞ 端部着丝点 T 染色体类型划分标准 染色体臂比值、着丝点位置与染色体类型 表1 核型测量分析计算表 序 号 （条） 实测长度（mm） 相对长度（％） 臂比 染色体 类 型 长臂 短臂 全长 长臂 短臂 全长 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 总 和 排列核型图 按上述标准及计算结果，将照片上的染色体剪贴配对，重新编号。 要求：染色体从大到小排列，着丝粒排在同一水平线上，短臂在上，长臂在下。 确定核型公式： 例如： 黑麦 2n=14=8m+6sm 如有随体的染色体应在相应染色体后加（SAT）或* 芍药2n=10=6m+2Sm+2St(SAT) 六、结果 一）绘有丝分裂各时期图和粘贴打印照片 二）染色体表1、排列粘贴好的染色体以及核型公式图 七、讨论分析 对实验过程出现的问题或实验的优缺点进行讨论分析。