药物质量控制中现代方法的进展汇总.ppt

二、液相色谱-质谱联用(LC-MS) 关键是LC 和MS 之间的接口装置。 目前广泛使用的是大气压电离(Atmosphere pressure Ionization，API)源包括: A. 电喷雾电离(Electrospray Ionization，ESI)源 B.大气压化学电离(Atmospheric Pressure Chemical Ionization，APCI) 电喷雾电离源（ESI) 电喷雾离子化分为三个过程: 形成带电液滴 溶剂蒸发和液滴碎裂 形成气相离子 毛细管2-4kV 离子从液滴表面 蒸发出来 - - + + + - + + + + + - 含各种离子的液滴 - - + + + + - - - - - + + + - - + + + + - - - - - + + + - 随着液滴的挥发,电荷密度增 大, 离子集中到液滴表面 + + - + - + + + - + + - + - + + + - 大气压化学电离源(APCI) APCI和ESI的不同点 离子产生的方式 APCI利用电晕放电离子化，气相离子化。 ESI利用离子蒸发，液相离子化。 能被分析的化合物类型不同 APCI 弱极性，小分子化合物，且具有一定的挥发性 ESI 极性化合物和生物大分子。 流速 ESI 0.001到0.25 ml/min。 APCI 0.2到2 ml/min。 多电荷 APCI不能生成一系列多电荷离子，所以不适合分析大分子。 ESI 能生成一系列多电荷离子，特别适用于蛋白，多肽类等生物分子。 三、定性与定量的方法 1、总离子流色谱图（TIC)： total ion current 仪器在一定m/z范围和时间内不断进行扫描，将每次扫描所得质谱中的各个离子的信号加和得到总离子强度，对扫描时间做图，即得到TIC。 在其它色谱条件都相同的条件下，总离子流色谱图与普通色谱仪所得到的色谱图大体相同，各个峰的保留时间、峰高、峰面积可作为各峰的定性定量参数 2、选择性离子监控（SIM）：selected?ions?monitoring 在确定被分析物的质谱后，选择其中强度大、特征性强的离子，让质谱只检测这些离子。用保留时间为横坐标，记录一个或若干个特征离子碎片的强度所构成的质量碎片图谱。 在SIM中不是采集完整的质谱，而是不断记录选定的一个或几个离子的信号。 * * Slide 13 - Sensitivity is typically improved by 2 to3X over HPLC. This is a result of the more efficient separation and fluidics management that keeps the peaks narrow and concentrated. This will allow scientists to see more of their samples. We synthesized two ACQUITY UPLC column chemistry at two different sizes. From our experience we typically see 3X sensitivity. This chromatogram visual shows the impact. 第二十一章 药物质量控制中现代分析方法的进展 第一节 毛细管电泳分析法 一、简介 1、定义： 在电解质溶液中，位于电场中的带电离子在电场力的作用下，以不同的速度向其所带电荷相反的电极方向迁移的现象，称之为电泳。 1981年，Jorgenson和Luckas，用75μm内径石英毛细管进行电泳分析，柱效高达40万/m，促进电泳技术发生了根本变革，迅速发展成为可与GC、HPLC相媲美的崭新的分离分析技术——高效毛细管电泳。 2、 HPCE的优点： (1) 毛细管中心与外界的距离很短，电泳产生的焦耳热很快被散去，有效防止电泳条带的扩散。 (2) 分析速度快、分离效率高 (3) 电极液用量少，不破坏生物样品，检测灵敏度高，用激光诱导荧光检测器灵敏度可达10-19g (4) 结构简单，操作方便，自动化程度高。 二、毛细管电泳仪 三、主要分离模式 1、毛细管区带电泳 主要用于离子状态存在的样品 （1）分离原理 几个基本概念： 偶电层 (Electric Double Layer，简称EDL) 电渗流：在高电压下，由于液固界面的双电层的存在，组成扩散层的阳离子向负极移动，导致毛细管中的溶液整体向负极移动。这种现象称为电渗流，用EOF