常用抗体的,应用范围及选用.doc

常用抗体的应用范围及选用 在临床活检工作中，对于各种肿瘤的正确判断，历来是外科病理学的核心问题。因它关系到患者的治疗和预后的问题。在免疫组化技术没开展以前，主要靠HE，特殊染色和组织化学来进行鉴别和诊断各种肿瘤，这些在当时虽然解决了不少的问题，但是对于较为复杂，较为多型性的肿瘤，就不能对其起源及所含的成分作出正确的判断。随着免疫组化工作的开展，给许多以往有待于解释原因的病理诊断上带来了福音。许多以往无法解释原因的病例，经现今免疫组化染色技术的处理后，能够对其起源，相关的抗原或抗体成份给予显示出来，为肿瘤的诊断提断了形态学的依据。虽然如此，对于一些较为复杂的抗原，就要根据具体情况作具体分析。在生物界里面某些细胞仅具有一个抗原的决定簇，这是极少见的，而常见的是具有数百个乃至数千个的抗原决定簇。数量之多但又不是千篇一律，并非都在细胞的表面表达出来，加上细胞的排列有高有矮，有长有短，切片时有的被切到细胞膜，有的被拦腰斩断，因此在一张切片上看到的同一种抗原的表达也不一致，有的在细胞核，有的在细胞膜，也有的在细胞浆，这种现象是由于切片的原因所致。但是，抗原的表达，在原来的表达上就有核、浆、膜之分。有的抗原可在一个部位表达，有的抗原 则可在两个 部位表达 ，例如PCNA，它可以在细胞核表达，也可在细胞浆表达 。有的抗原，可表现为双向表达，如上皮(样)肿瘤间皮肿瘤和滑膜内瘤等，用角蛋白标记时，可有阳性表达，用波形蛋白标记时，也可有阳性表达。对于上述的许多现象，在观察检测时，就要特别地小心，不断地积累经验，以便于更好地鉴别各种抗原的所在部位。某些抗原不是在任何时候能表达出来的它们 需要一定的时间和条件。有人根据肿瘤细胞增生的能力将其分为三个阶段：1.进入细胞周期的增殖细胞，这包括G1、G2及M期的细胞。2.暂时未进入细胞周期，但在某特定的时期和条件下，使其开始增殖的细胞(GO期)。3.静止的永不再进入增殖周期的细胞，这些细胞己分化成熟，根据新陈代谢的规律，它们逐渐地进行消之阶段。上述三个阶段中，与肿瘤的发生发展关系最为密切的是增殖细胞。因此，临床检测各种肿瘤抗原的表达，应根据上述 三个阶段来加以区别，仔细加以分析，在作出诊断前，应根据免疫组化的表达，细胞的分化成度来加以区别，不要以为用了某种抗体抗原不表达就确定是不属该抗体来源的肿瘤。有人在检测淋巴瘤活性的研究中，发现PCNA在细胞周期的S期数量增高，G2期下降，核分裂期最低，在 G1期又开始增高。我们在检测各种肿瘤的抗原时发现，在同一病例中，增生的肿瘤细胞抗原表达强，成熟的细胞表达与增生的细胞差不多，幼雅的细胞表达较弱，未分化的细胞呈阴性。基于上述的情况，我们应充分认识到，诊断各种肿瘤，免疫组化起到了重要的作用中，它可以为诊断提供可靠的准确的形态学依据，它为肿瘤的来源的定性，提供了理论及实物。但是，我们也应该认识到，任何事情都 不能有百分之百的准确，免疫组化的检测也一样，有时也会受到未分化细胞的制约，因此，在作出诊断前，应多做多方面的检查，结合各方面的情况，作出正确的判断。为了更好地应用各种抗体来检测相应的抗原，下面我们将介绍常用抗体检测范围。 (一)、常用上皮组织及肿瘤标记物1.角蛋白(Keratin)角蛋白分为表皮角蛋白和细胞角蛋白两种，这是根据其分部的部位而分的。表皮角蛋白包括皮肤表皮，消化道粘膜上皮、腺上皮甲状腺滤泡上皮、气管、支气管上皮、肺泡上皮，角膜上皮、前列腺上皮等。细胞角蛋白包括颌下腺，胰腺，胸腺，细胞，肝细胞，肾小管细胞等。目前，应用上述细胞中间丝角蛋白作为抗原所制备的抗体有单克隆抗体和多克隆抗体。角蛋白可有19个亚型 ，分为碱性和酸性，从1-8为碱性，9-19为酸性，分子量40-68不等，复层鳞上皮多为高分子量，单层上皮则多为低分子量，了解这些在临床的鉴别诊断及抗体的应用中都 有极大的帮助。目前，检测这类特质的抗体很多，根据不同的克隆生产出不周类型的抗体。常用的抗体有：单克隆小鼠抗人细胞角蛋白(Monoclonal mouse anti human cytokeratin)克隆为MNF116。该抗体应用范围，各类的冰冻切片，涂片，细胞培养片和经甲醛固定石蜡包埋的组织切片 。用本抗体检测的阳性组织有：鳞状上皮，甲状腺滤泡上皮消化道上皮，胰腺胆管上皮，肝胆管上皮，角膜上皮等以及发生于上述来源的肿瘤。应该注意的是有一些肿瘤在检测时，可出现两种阳性物，即用两种抗体来检测如采用CK和Vimentin，可出现双向表达阳性的肿瘤有：癌内瘤，子宫内膜腺癌肺腺癌，上皮样内瘤，滑膜内瘤，唾液腺肌上皮瘤，间皮瘤等等。这是由于在这些肿瘤中存在着两种不同的中间丝的缘故。应用该抗体检测呈阴性的肿瘤有：各种淋巴瘤，各类肌源性的肿瘤，恶性黑色素瘤，骨肿瘤，纤维组织肿瘤，脂肪肿瘤，神经组