(红曲中试及标准化.pptVIP

以洛伐他汀盐为主要活性成分的云南红曲的中试及标准化 项目的背景 心脑血管疾病是当今严重危害人类生命健康的疾病之一。该类疾病是因血脂异常、动脉粥样硬化所致，血脂的调节是防治心脑疾病的重要因素。 目前临床上应用药物：他汀类、贝特类、胆汁酸螯合剂和烟酸类。其中他汀类药物因其效果好、耐受性好、安全可靠、副作用低、能长期服用等特点，应用最为广泛。 “云南红曲”的有效成份“红曲他汀（洛伐他汀盐）”，活性高于上市药物“洛伐他汀”。 （本公司专利） 我方独立开发的生产菌种与发酵和后处理工艺生产出的“云南红曲”，药理试验表明不但具有调节血脂功能，还有保护心脑血管、稳定动脉粥样斑块等作用。 红曲法定标准较为滞后，以我方专利为基础的红曲标准化研究，将促进法定标准的完善，也有利于公司产品的竞争。 红曲的国内研究应用进展 红曲霉的应用在中国己有一千多年的历史，过去主要作为食品添加剂。 医用记载：《本草纲目》“红曲气温味甘，无毒。主治消食活血、健脾燥胃，治赤白痢，下水谷。” 以红曲为主要成分的药物已上市，如北大维信“血脂康胶囊”；成都地奥和云南永安制药的“脂必妥片”。年销售近6亿人民币。以红曲为原料的保健品有多家，年销售约2亿人民币。 红曲的国外研究应用进展 1979年，日本学者远藤章从红曲霉中分离出胆固醇生物合成过程中HMG-CoA还原酶的抑制剂洛伐他汀。 1987年美国FDA批准洛伐他汀上市，因疗效好而获得广泛应用。之后，又有8种上市，形成400亿美元市场。 据2007年美国春季医药、保健品原料会的统计，美国年需求红曲量大于1000吨。 “血脂康胶囊”已在美国进行Ⅱ期临床试验，有可能成为我国第一个为国际认可的中药。 项目研究内容 强化次生代谢途径，利用对关键酶活性的控制、培养基优化、细胞调节因子的选择等技术，使发酵生产水平得到提高。 运用过程工程“三传一反”原理，对发酵过程进行放大研究，达到年产20吨“云南红曲”。 采用不同含量（总洛伐他汀量）及不同比例（两种洛伐他汀比例）的红曲，按照新药研究的指导原则进行动物试验,以初步确定红曲中两种分子构型洛伐他汀的比例与其疗效、安全性之间的关系。 进行红曲标准化研究，完成红曲标准的研究修订，标准草案经省药检所复核后，向国家申报。 项目主要创新点 根据代谢工程原理，初步确定了红曲中有效成分他汀类化合物合成过程中的关键酶，通过培养基优化，细胞调节因子的选择，使红曲发酵水平大于35mg他汀/g红曲（为文献报道的最高值）,在技术上具有原创性。 对创新技术进行产业化开发，运用过程工程“三传一反”原理，对“云南红曲”发酵过程进行放大研究，初步确定了中试放大生产的工艺。 通过后处理工艺可制备高含量他汀盐的红曲，进行标准化研究。促进红曲的中药现代化研究。 项目关键技术 本项目采用筛选出的特有红曲霉菌种。 通过试验与代谢工程分析理论相结合，初步确定了红曲中有效成分他汀类化合物合成过程中的关键酶，并实现对关键酶的人工调控。 运用过程工程“三传一反”原理，对小试工艺进行放大。 通过改变后处理工艺条件获得酸式洛伐他汀盐含量比例不同的红曲；并进行进行药效学和急性毒性试验，确定红曲中两种分子构型洛伐他汀的比例与其疗效、安全性之间的关系。 修订红曲中他汀类物质含量测定方法。 技术路线 云南红曲是采用菌种培养技术、固态发酵工艺及后处理工艺而制成的。生产工艺过程包括： 菌种制备：菌种冻干管---菌种活化---斜面培养---液体菌种 发酵培养：培养基配制---灭菌---接种---发酵培养 下游加工：真空微波干燥---两级粉碎---混合---真空包装 项目实施达到的技术与性能指标 发酵水平：小试试验以他汀类物质含量计算，发酵产物（干品）他汀类物质35mg/g以上，酸式洛伐他汀盐含量比例大于总他汀85%； 中试生产：20吨/年规模稳定生产，他汀类物质22mg/g以上，酸式洛伐他汀盐含量比例大于总他汀85%； 产品质量：云南省中药材标准（2005年版）：红曲（云YCBZ0020-2005）。 标准化研究：完成红曲标准修订草案，标准草案经省药检验所复核合格，向国家有关部门提出申请。 色素红曲与功能红曲发酵工艺比较 传统色素红曲发酵工艺具有高温、高酸度、培养基成分简单、周期短的特点，使得发酵过程中其他杂菌难以大量繁殖，故色素红曲的发酵过程较易控制，产品质量相对稳定。 功能红曲的发酵难度较大：物料接近中性，有效成分他汀类物质的累积发酵温度应较低（小于28℃），培养基成分复杂，营养成分丰富、发酵周期长，这些特点决定了功能红曲的生产必须严格执行无菌操作规程；在发酵过程中要严格控制温度及湿度的均匀度。 前期工作基础 合格的菌种 特有发酵工艺及后处理工艺 红曲的标准化（基于专利） 市场定位 红曲菌种 权威机构