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(山东肥城曹庄矿医院卓越360SOP
SOP标准操作程序
ALT/GPT 丙氨酸氨基转移酶试剂盒
临床意义:
本试剂盒适用于体外临床检验,用于测定人血清中丙氨酸氨基转移酶的活力。
临床上,有许多疾病会导致血清中丙氨酸氨基转移酶活力增高。如肝胆类疾病:包括传染性肝炎、肝癌、肝硬变活动期、中毒性肝炎、脂肪肝、胆管炎;心血管疾病:包括心肌梗塞、心肌炎、脑出血等。一些药物和毒物也可以引起ALT活性升高:如氯丙嗪、异烟肼、奎宁、酒精、铅、汞、有机磷等。
因此,血清丙氨酸氨基转移酶活力的测定可用于这些致病的诊断和监测,特别是用于肝胆类疾病的诊断和肝功能检测
方法原理:
上海科华生物工程股份有限公司的丙氨酸氨基转移酶试剂盒以IFCC1(国际临床化学委员会)推荐法为基础设计,采用两步法测定:
丙氨酸氨基转移酶
L-丙氨酸 + α-酮戊二酸 -----------------------→ 丙酮酸 + L-谷氨酸
乳酸脱氢酶
丙酮酸 + β-NADH + H+ ---------------→L-乳酸 + H2O + NAD+
底物L-丙氨酸和α-酮戊二酸在丙氨酸氨基转移酶催化下,生成丙酮酸和L-谷氨酸.其中丙酮酸在乳酸脱氢酶的催化下,生成了L-乳酸,并同时引起了β-NADH的氧化,使波长340nm处的吸光度下降.
在一定底物浓度范围内,β-NADH的氧化所引起的340nm处吸光度的下降速率与血清中丙氨酸氨基转移酶活力成正比。
样本:
病人准备: 应空腹取血。
样本类型: 新鲜无溶血现象的血清或EDTA抗凝血浆。
最少样品量:0.2ml。
样本稳定性:血清中的ALT在2~8℃可稳定7天,不推荐使用冰冻保存的样本2。
仪器与试剂:
仪 器:卓越360生化分析仪
试 剂:上海科华生物工程股份有限公司的丙氨酸氨基转移酶试剂盒
试剂准备:丙氨酸氨基转移酶试剂盒为即开即用的液体双剂型,无需特殊准备。试验用试管的直径在12~16mm。
试剂组份:
参见试剂盒内说明书。
注意事项:
1.此试剂为体外诊断用。
2.试剂有毒,不要入口,吞下有害,如误服(包括内部接触)应立即寻求医疗保护。避免试剂和眼睛,皮肤及粘膜接触,如不慎接触(外部接触)应用大量的水冲洗受损害的部位, 如仍有不适,应前往医院诊治。
3.试剂中含有叠氮钠,可与下水管中的铜反应形成爆炸性化合物,如果排向下水道请用大量的水冲洗。
性能参数:
1.精密度(重复性):
批内变异系数≤5%;
批间相对极差 ≤6%。
2.准确度:
相对偏差≤15%。
3.病人结果可报告范围(线性范围):
0~1000U/L(37℃)。
4.分析特异性(抗干扰能力):
本液体试剂以IFCC推荐法为基础设计,采用二步法,可防止胆红素的干扰。
5.稳定性:
试剂在2~℃避光保存,有效期为1年;
试剂开启后在2~℃避光保存,可稳定30天。
变质指示:
如试剂混浊,或以蒸馏水为空白,试剂工作液在340nm处吸光度小于1.0,请勿使用。
校准:
使用生理盐水(蒸馏水)和理论K因素进行校准,或者使用生理盐水(蒸馏水)和其它质量可靠的校准血清进行二点校准。
质控:
至少2个浓度水平的质控品。
操作程序:
卓越360开机
装载试剂
输入参数
实施校准
加载样本
和仪器有关的操作程序请参照卓越360用户手册。
计算:
无需手工计算,在37℃每个样本的结果自动以U/L打印。
报告结果:
参考范围:
血清和血浆:8~40U/L(37℃)
报告格式:
自动地打印37℃U/L的报告,如果以SI单位(uKat/L)报告结果,要乘以0.017。
操作过程注意事项:
操作过程的限制性:
丙氨酸氨基转移酶试剂盒的线性范围是0~1000U/L。样品浓度超过线性上限应稀释重做。如在卓越360中应用自动重做功能,标本稀释重做后会自动乘以稀释倍数。超范围的标本也可以用生理盐水稀释后重新测定,结果乘以稀释倍数,卓越360可以应用自动重做功能自动重作超范围的标本。
参考文献:
1. Expert Panel on Enzyme . Scientific Committee.International Federation of Clinical Chemistry:IFCC Methods for alanine aminotransferase(stage 2,Draft 1979-11-19). Clin . Chem .Acta. 147F-172F(1980).
2. 叶应妩,王毓三;全国临床检验操作规程(第三版)
Young,D.S.,Effects of Drugs on Clincial Laboratory Tests,4th Edition,AACC Press,1995.
SOP标准操作程序
AST/GO
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