显微摄影技术[精选].ppt

图像输入： 支持视窗平台，支持模拟CCD、数字CCD、数字冷CCD、数码相机、扫描仪等图像摄入设备；支持多种图像采集卡；支持JPEG、TIFF、BMP、GIF、PCX、DIB、EPS、WMF、TGA、WPG和部分非标准图像格式；支持24/48位真彩色图像采集；符合GB15445、美国ASTM112及ISO9276标准。 特征范围选取： 具有多种图像特征的选取工具（矩形框、圆形框和自画任意框等），不限制多层彩色分割，图像数学运算。 专业图像处理与分析功能： 包括色度调整，图像变形，数字形态学处理，图像增强，图像匹配，纹理分析，特征识别等。 具有颗粒自动识别、粘连颗粒自动切分功能，以利复杂图像的准确分析。 图像参数测量 图像定量分析提供点、线、面积和角度测量四大类；提供多种的测量参数，如面积、周长、长轴、短轴、形态因子、异型指数、圆形度、平均灰度、平均光密度、积分光密度、绝对光密度、光密方差度、核浆比等。 分析数据的可视化处理使分析结果与图像之间构成直接映射关系，便于观察分析。 数值统计： 自动对目标图像进行分割、计算、统计、归类等操作，并可自动编号，逐个显示被跟踪目标的全部参数；用户可自行设置测量参数或编辑用户所需测量参数，并可进行分类。 白平衡： 软件支持将不同时间、不同亮度、不同拍摄曝光设置下图片进行背景修正，以更科学的计算光密度相关的参数。? 免疫组化分析： 支持对免疫组化图片进行面积含量、数目含量以及和光密度有关的各类参数。? 图像定标和校正： 可定标图像到任何测量单位，并以实际尺寸参数对目标进行分析计算或打印相应定倍图片。 图像输出： 照片质量输出图像，输出图像的大小和位置可任意调整，并能按严格的标尺输出图像。 荧光图片合成与滤色： 将不同波段下的荧光图片合成一张图片或将合成图片滤色成不同波段的多张图片。 景深扩展： 对同一视野下不同焦距下拍摄的多张图片进行景深扩展，处理成一张各区域都清晰的图片。 大图拼接： 对多视野下拍摄的图片进行拼接，从而将一个视野下不能完全显示的目标处理成一张能够包含目标各个部分的完整的图片。 结果输出和打印： 所有分析测量数据均可动态连接到WORD、EXCEL以及SPSS等软件作进一步处理；可直接把分析图表导入到WORD或剪贴板中进行处理。 软件安装 先安装常用软件程序，并运行检测整个电脑系统至系统正常稳定 安装图像采集卡、数据线连接电脑、显微镜和CCD 按软件安装指导程序一步一步进行软件的安装（必要时启动显微镜） 用标准标尺对显微镜各物镜图像进行标定 内 容 光学显微镜的种类及结构特征 光学显微镜主要光学部件及性能 与显微摄影有关的基本光学概念 显微摄影系统的基本构成 显微摄影基本操作程序 影响显微成像质量的因素 显微摄影基本操作程序 选定条件、清理光路相关部件 调整光轴中心－灯丝、聚光镜对中 调整聚光镜位置、电压、光阑、滤光片达到最佳照度和色温 调整载物台、焦距，选择摄影区域 拉动分光棱镜推杆，切换显微镜光路 对照电脑屏幕图像，调节显微镜微调旋钮，使显示图像达到清晰为止 利用软件功能键（白平衡、对比度、曝光时间、增益等）进一步提高图像质量 摄影 加注标尺 存盘（最好按所用软件定义格式储存） 在没有中间放大倍率（放大镜）的前提下,照像目镜与其至照像装置的投射长度（厂家给定系数，一般为1?） 照像M＝物镜倍数?照像目镜倍数 软件给定标尺（最佳） 显微图像放大倍数的表述 内 容 光学显微镜的种类及结构特征 光学显微镜主要光学部件及性能 与显微摄影有关的基本光学概念 显微摄影系统的基本构成 显微摄影基本操作程序 影响显微成像质量的因素 组化图像－背景偏黄 解决方法：用淡青色滤光片滤除黄光；若效果仍不满意或无淡青色滤光片，则适当调高电压(约高于9V)，以图像分辨率不受影响、画面对比度适宜为度。电压过高则背景偏青。 光柱不正 视场光阑过小 * 由于客观条件，任何光学系统都不能生成理论上理想的像，各种像差的存在影响了成像质量。下面分别简要介绍各种相差。 * 照像目镜的选择：在物镜的有效放大倍率内，尽量优选低倍照像目镜。 * 目镜和物镜的组合 当所选目镜的放大倍数低于有效放大倍数时，会造成物镜本来可以辨认的细节因总的放大倍数太小而挤在一起，难以分辩。 当所选目镜的放大倍数高于有效放大倍数时，所得放大倍数叫“空的放大”，影像细节的分辩能力没有提高。 在有效放大率前提下，要提高对物像细节的分辩能力和清晰度，必须使用高数值孔径的物镜和低倍目镜的组合。 目镜和物镜的组合 例如数