微生物标本采集与处理__培训课件.ppt

微生物学检验标本采集与处理 血液培养 标本采集和运送 1、血液采集时间： ⑴发热（≥38℃）或低温（≤36 ℃）寒战。 ⑵WBC增多。 ⑶皮肤粘膜出血。 ⑷血压降低。 ⑸昏迷。 ⑹特殊患者出现粒细胞减少,血小板减少等 。 应在以上一种或几种体征出现，而临床可疑菌血症时采集血培养，并且尽量在使用抗生素之前进行。为提高阳性率，在24小时内采集2~3份血培养。 2、采血部位及抽血量： 一般抽取肘静脉血，成人采血量是5~10ml，儿童为3~5ml（尽量多抽提高阳性率），原则为血液与肉汤之比为1:5~1:10。 3、采集血标本和接种时要严格无菌操作，避免杂菌污染。如果双相培养基则从冰箱取出，应将其平衡到室温，方才采集血标本接种。 4、无菌操作采血后应立即送检,如不能立即送检,需室温保存或置35 ℃~37 ℃培养箱中,切勿冷藏！ 实验室处理 标本验收、登记： 1、如发现血培养瓶标识与化验单申请单不符，如瓶破裂或明显污染。应立即与临床医师联系，报告拒收的具体理由. 2、如发现标本采集放置12小时以上, 用不适当类型的培养瓶收集标本、用过期的培养瓶收集标本、采血量不足等。应立即与临床医师联系，报告标本不合格的具体理由，建议补做血培养。 3、对延迟送检的血培养瓶注意肉眼观察瓶内是否有絮状物、混浊、溶血、凝块、薄膜等。如发现应立即直接涂片镜检和划线转种。 4、如验收合格，给标本和申请单进行标识编号，并在血培养专用澄记本上澄记病人的姓名、性别、年龄、科室、住院号、标本编号，然后置于35℃～37℃培养箱中培养。 下呼吸道感染标本培养 标本采集 1、自然咳痰法:以晨痰为佳,采集前应用清水清洁口腔牙齿,用力咳出呼吸道深部的痰,直接吐入痰培养无菌杯中,标本量应≥1ml.咳痰困难患者可雾化吸入取痰,采集完标本后应尽快送检,不能及时送检的标本,室温保存≤2h. 2、支气管镜采集法:由临床医师按相应操作规程采集,应注意咽喉部正常菌群污染. 3、小儿取痰法：用弯压舌板向后压舌，将拭子伸入咽部，小儿经压舌刺激咳嗽时，可喷出肺部或气管分泌物粘在拭子上送检。幼儿还可用手指轻叩胸骨柄上方，以诱发咳痰。 痰标本验收 1、呼吸道定植有大量的正常菌群,咽试子、痰厌氧培养无临床意义。 2、 肉眼观察痰标本呈水样或唾液样，或者标本涂片细胞学检查，WBC10/低倍镜和鳞状上皮细胞25/低倍镜，提示该标本已污染正常菌群，建议重送标本。 3、标本容器溢漏、无盖或送检时间超过2h拒收。 4、同时同部位或同一天两份相同检测的标本，应及时与申请医师协商处理。 5、遇有不合格标本,应及时与临床联系,报告不合格标本拒收的具体理由 。 痰标本培养 显微镜检查：涂片革兰氏染色镜检（或直接涂片低倍镜镜检）并记录。 1.如WBC25/低倍镜和鳞状上皮细胞10/低倍镜,提示该标本合格可用于细菌培养; 2. WBC25/低倍镜和鳞状上皮细胞10—25/低倍镜,提示该标本尚合格可用于细菌培养; 3.WBC10/低倍镜和鳞状上皮细胞25/低倍镜,提示该标本不合格,重送标本. 细菌涂片染色检查:挑取标本脓性或带血部份涂片革兰氏染色镜检,报告所见细菌的量和吞噬细胞内是否有细菌等. 痰标本培养 分离培养 挑取脓痰分别接种于羊血琼脂平板、麦康凯平板、巧克力琼脂平板上,置于35℃培养箱培养24-48小时。巧克力平板放入5%~10%CO2环境中培养24-48小时。 初级报告 即标本涂片染色细胞学和细菌学显微镜镜检的描述报告，如发现有诊断价值时及时口头报告，但应按要求详细记录。 1.细胞学镜检的描述报告：包括WBC数/低倍镜和细胞内是否含有细菌且胞内细菌的染色形态特性。 2.细菌学镜检的描述报告：如见到排列成葡萄状的革兰氏阳性球菌，可报告“找到革兰氏阳性球菌，形似葡萄球菌”；如找到不识别的细菌时则报告“找到革兰×性×形细菌”。 尿液细菌培养 尿培养检查的临床指征: 1 有典型的尿路感染症状; 2 肉眼脓尿或血尿 3 尿常规白细胞和/或亚硝酸盐阳性 4 不明原因的发热,无其他局部症状 5 泌尿系统疾病手术前和膀胱排空功能 受损等. 6 留置导尿管的病人出现发热。 尿标本的采集 1.清洁中段尿: 晚睡前少饮水,女性病人用手分开大阴唇,男性病人翻上包皮,用肥皂将阴部清洗干净后,用清水冲洗尿道口周围。将前段尿排去，将中段尿约10ml直接排入专用的无菌管中。 2.耻骨上膀胱穿刺法：严格按无菌操作，用注射器直接从耻骨上皮穿入膀胱，吸取尿液置于专用的无菌管中。 3.直接导尿法：按常规方法局部消毒后，用导尿管直接经尿道插入膀胱，获取膀胱尿。 4.留置导尿：先消毒导尿管外部，按无菌操作用注射器通过导尿管吸取尿液置于专用的无菌管中。 6.其他方法：收集特定部位的尿标