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直接抗人球蛋白试验（DAT） 1)取患儿不抗凝血离心后，用0.9%的生理盐水配成0.8%的红细胞悬液。 2)微柱凝胶检测卡上标明患儿的姓名或编号，撕开卡上的铝箔，加入配好的患儿红细胞悬液50μl。 3)将卡放入血型血清学专用离心机离心5分钟后判读结果。 4)结果观察： 5)阳性：红细胞凝集，在凝胶柱中或表面形成红线。 6)阴性：在微管底部形成密集的细胞扣。 与国际同步 与国际同步 与国际同步 与国际同步 与国际同步 与国际同步 与国际同步 与国际同步 与国际同步 血库操作规程 朱士伟 2015-3-26 目录 ABO血型鉴定（玻片法、试管法）标准操作规程 5 RhD血型鉴定（玻片法、试管法）标准操作规程 9 ABO血型正反定型及RhD血型（微柱凝胶卡式法）标准操作规程 11 交叉配血试验（盐水法）标准操作规程 15 凝聚胺交叉配血试验标准操作规程 17 交叉配血试验（微柱凝胶卡式法）标准操作规程 19 新生儿溶血病（HDN）血型血清学检查标准操作规程 22 不规则抗体筛选标准操作规程 26 孕妇血清中红细胞血型抗体效价测定标准操作规程 29 医用低速离心机（X5型）标准操作规程 31 低速离心机（160C型）标准操作规程 33 HHW型电热恒温水浴箱标准操作规程 35 HYC-360型医用冷藏箱标准操作规程 36 200型血液冷藏箱标准操作规程 38 低温保存箱标准操作规程 40 FYQ型免疫微柱孵育器标准操作规程 42 TD-3A血型血清学用离心机标准操作规程 43 WGH-I数码恒温解冻箱标准操作规程 44 HXC-608型医用血液冷藏箱标准操作规程 45 PH-A恒温摆动保存箱标准操作规程 47 LX-18X血小板运输箱标准操作规程 48 GZR-II型高频热合器标准操作规程 50 XS生物显微镜标准操作规程 51 室内质控标准操作规程 52 血库室间质评标准操作规程 60 血库配制自备试剂的标准操作规程 63 血标本接收及处理标准操作程序 65 血液入库操作规程 66 血液储存操作规程 67 血液出库操作规程 69 病毒灭活冰冻血浆、冷沉淀凝血因子复溶操作规程 70 血液报废操作规程 71 实验室医疗废弃物处理操作规程 72 ABO血型鉴定（玻片法、试管法）标准操作规程 3、原理：根据红细胞上有或无A抗原或/和B抗原，将血型分为A型、B型、AB型及O型4种。可利用红细胞凝集试验，通过正、反定型准确鉴定ABO血型。所谓正定型，是用已知抗-A和抗-B分型血清来测定红细胞上有无相应的A抗原或/和B抗原；所谓反定型，是用已知A细胞和B细胞来测定血清中有无相应的抗-A或/和抗-B。 4、试剂 4.1血清抗A、抗B； 4.2 5%A、B及0型试剂红细胞盐水悬液； 4.3受检者血清或血浆； 4.4受检者5%红细胞盐水悬液; 5、样本采集及处理 用一次性EDTA-K2真空采血管抽取静脉血1ml，将标示有患者姓名、性别、年龄、住院号、病室/门急诊、床号等信息的标签贴在标本管上，由医护人员或专门人员将患者标本送交血库。 6、操作步骤 6. 1玻片法 （正定型） 6.1.1分型血清 l 滴于鉴定卡内，再各加受检者 5％红细胞悬液 1 滴，混和。 6.1.2 将鉴定卡不断轻轻转动，使血清与细胞充分混匀，连续约 15 min，以肉眼观察有无凝集(或溶血)反应。 6.2 试管法 （正定型） 6.2.1取洁净小试管2支，分别标明抗A，抗B，用滴管分别加抗A、抗B分型血清各1滴于试管底部，再以滴管分别加入受检者5%红细胞盐水悬液1滴，混合。 6.2.2反定型：另取洁净小试管3支，分别标明A，B和O细胞。用滴管分别加入受检者血清1滴于试管底部，再分别以滴管加入A，B和O型5%试剂红细胞悬液1滴，混合。立即以1000r/min离心1min。 6.2.3将试管轻轻摇动，使沉于管底的红细胞浮起，先以肉眼观察有无凝集（或溶血）现象。如肉眼不见凝集，应将反应物倒于玻片上，再以低倍镜检查。 7、结果判断：凝集为阳性（+），不凝集为阴性（-） 8、干扰： 8.1分型血清质量性能符合要求，用毕后应放冰箱保存，以免细菌污染。 8.2试剂红细胞以3个健康者同型新鲜红细胞混和，用生理盐水洗涤1次，以除去存在于红细胞中的抗体及可溶性抗原。 8.3试管、滴管和玻片必须清洁干燥，防止溶血。 8.4操作方法应按规定，一般应先加血清，然后再加红细胞悬液，以便容易核实是否漏加血清。 8.5按理IgM抗-A和抗-B与相应红细胞的反应温度以4℃为最强，但为了防止冷凝集现象的干扰，一般仍在室温（20～24℃）内进行试验，37℃可使反应减弱。 8.6离心时间不宜过长或过短，速度不宜过快或过慢，以防