临床本科11病原体检测__培训课件.ppt

初筛检测阳性标本 两种初筛试剂 阴性报告 阴性报告 阴性反应 一阴一阳 阳性反应 免疫印迹法WB-1/2混合型 复　核 报告HIV-2血清学 阳性反应,必要时测核酸 阴性反应 可疑反应 HIV-2 阳性反应 免疫印迹法WB-2 阴性报告 出现gp36 阴性反应 可疑反应 HIV-1 阳性报告 HIV-1 阳性反应 每三个月随访一次，共两次，仍属可疑，判为阴性 HIV抗体确认实验流程图 2、梅毒 病原体为螺旋体，传播途径也是性接触、血液、母婴。 血清学检查 有RPR、USR、TRUST、TPPA等。 阳性为梅毒感染，须用TPPA或暗视野螺旋体检查进行确定 3、淋病 病原体为G-双球菌，传播途径为性接触和胎传。 直接涂片或厌氧分离培养找到G- 双球菌可确诊为淋病 PCR快速特异 第十章 其它检测 包括基因诊断、流式细胞术、染色体检查 基因诊断定义 以DNA、RNA为原料，检查目标基因的存在、缺陷或表达异常，对人体状态和疾病作出诊断 常用技术有： 核酸分子杂交、PCR、限制性片段长度多肽性分析、DNA测序等 应用范围 感染性疾病：乙肝、丙肝、结核菌、淋菌 基因突变 ： 如血友病、血红蛋白分子 肿瘤相关基因： ras癌基因 、 抑癌基因p53 法医鉴定 如亲子关系、DNA测序 流式细胞术与标记免疫学结合应用于肿瘤及血液病诊治 染色体检查多应用于XYY综合征、白细胞诊治。 重点提示 标本采集运送原则 药敏试验定义、选择 甲乙丙肝炎病毒检测意义 STD病原体检查意义 The end! 第九章 常见病原体检测 第一节 标本采集运送 原则： 无菌操作、防止污染。 不接触消毒剂和抗菌药、立即送检。 1、血液标本 在病人发热初期、高峰期间采集，且在应用抗菌药前。 SPS无菌瓶 怀疑败血症、毒血症、脓毒血症，在发热期间24小时内多部位多量采血 双部位采血培养 两瓶阴性 两瓶均阳性 单瓶阳性 阴性报告 细菌鉴定/药敏实验 阳性报告 重新双部位采血培养 两瓶阴性 单瓶阳性 两瓶均阳性 两次培养为不同细菌 污染 两次培养为相同细菌 细菌鉴定/药敏实验 重新双部位采血培养 阳性报告 2、尿液标本 杂菌多，要求晨起中段尿或导尿管无菌操作。 3、呼吸道标本 痰液和鼻咽拭子均要求晨起清水漱口后采集 4、粪便标本 取粘液脓血部位送检，怀疑2号病用碱性蛋白胨保养送检。 5、脑脊液应及时送检或床边接种，同时做血培养。 体腔积液，采量多，做血培养。 6、泌尿生殖系标本 在无菌操作下采样 7、创伤、组织、脓肿标本 注意防止皮肤表面污染菌混入，脓肿可穿刺采样。 二、常用检查方法 1、直接显微镜检查 标本直接或离心浓缩沉淀后涂片染色用显微镜观察形态 2、抗原抗体检测 见免疫学检查 3、核酸检查（PCR、基因芯片） 4、细菌分离培养 依据可疑细菌培养特性，选择合适的培养基进行培养或分离培养；根据菌落形态、生化反应、染色作出鉴定，有时进一步做药物敏感试验 第二节 病原体耐药性检测 耐药机制（略） 药敏试验 药敏试验是测定抗生素在体外抑制细菌生长能力的试验，目的是选择最佳抗生素便于治疗 将含有定量药物的纸片贴在接种测试菌的琼脂平板上孵育24h，根据抑菌圈大小判定是否敏感或耐药。 1、K—B纸片琼脂扩散法 药敏结果为临床提供参考意见 “敏感”或“中度敏感” 、“耐药” 选择？ 药敏试验须先进行细菌培养、分离纯化，时间长。医生可先试用一些药， 注意事项 耐甲氧西林金葡菌MRSA、耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌MRSCoN是目前院内感染的重要病原菌。 早期进行细菌培养。 PCR检测耐药基因 二、耐药菌监测试验 第三节 感染性病原体检测 （自学） 第四节 病毒性肝炎血清学标志检测 病毒性肝炎有7型：HAV HBV HCV HDV HEV HGV TTV 甲、丙、丁、戊四型肝炎均会产生特异抗体，IgM型抗体阳性示急性感染或病毒在复制；IgG型抗体阳性示继往感染，传染性降低。 抗HAV—IgG属保护性抗体，可终生阳性。 抗—HCV：输血后肝炎 抗HDV检测须依赖乙肝病毒存在 戊肝抗体检查 肝炎病毒和病毒性肝炎的特征 病毒特征 肝炎特征 类型 直径(nm) 核酸 所致肝脏病 感染途径 潜伏期 急肝死亡率 甲型肝炎 27--32 RNA 急性肝炎 经口 30