复习生物制药46篇.pptVIP

第四章 复习 抗体分子的结构—CDR区 在V区中，某些特定位置的氨基酸残基显示更大的变异性，构建了抗体分子和抗原分子发生特异性结合的关键部位，称为互补决定区（CDR）。而C区则决定了Ig分子的异种抗原性。 改造鼠源性单克隆抗体的目的： 一是降低免疫原性； 二是降低相对分子量，增加组织通透性。 而具有完整抗原结合位点的Fab、Fv及ScFv是目前小分子抗体研究的重点。 4.3.4双功能抗体 双功能抗体就是双特异性抗体（biospecific antibody, BsAb）。 双功能抗体，是指一类具有双特异性的抗体杂合子，它们在功能上是单价的，化学结构是双价的。 双功能抗体具有双重特异性，这种新型抗体的两个Fab段能同时与不同的两个抗原结合。即抗体的一臂与肿瘤标记结合，另一臂则与药物、毒素或细胞毒性细胞结合，双功能抗体应用于辅助癌症的治疗，这些作用能直接导向瘤细胞. 噬菌体抗体库技术 噬菌体抗体是在膜表面表达抗体分子Fab或ScFv，这种膜表达是通过Fab段或ScFv与单链噬菌体外壳蛋白形成融合蛋白而完成， 其特点是它既可以识别相应抗原与其相结合，又能够感染宿主菌进行再扩增。 将B细胞全套可变区基因克隆出来，组装成噬菌体抗体的群体，则成为噬菌体抗体呈现技术。 诊断血清诊断方法 凝集反应：是指颗粒型抗原（如细菌或吸附在乳胶、离子交换树脂等不溶性的颗粒上的抗原），以及细胞型抗原（如红细胞或吸附在红细胞上的抗原）与相应抗体结合，在有适当电解质存在下，经过一定时间，可形成肉眼可见的凝集团块。 直接凝集反应(direct agglutination)是将细菌或红细胞等颗粒性抗原与其相应抗体结合产生的细菌凝集或红细胞凝集现象。（1）玻片法（同种红细胞凝集反应）如检查血型的血细胞凝集现象（2）试管法 如诊断伤寒病的肥达氏反应（Widal reaction） 2、乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）的反向被动血凝诊断试剂 将抗体吸附于载体上（常用红细胞），用以检测抗原的间接凝集反应，其与传统的间接凝集反应（抗原吸附于载体上）相反，称为反向间接凝集反应。该方法用红细胞作为载体时，称为反向被动血凝试验。 试剂制备的原理：血细胞经甲醛处理后，在酸性条件下能吸附蛋白质，当纯化的抗HBsAg血清吸附其上时便具有抗体活性，若待测样品中存在有HBsAg时，则发生特异性结合而使血细胞发生凝集。 反向被动血凝试验 3、妊娠诊断试剂 人体绒毛膜促性腺激素 （Human Chorionic Gonadotropin，HCG） 成熟女性因受精的卵子移动到子宫腔内着床后，形成胚胎，在发育成长为胎儿过程中，胎盘合体滋养层细胞产生大量的HCG，可通过孕妇血液循环而排泄到尿中。当妊娠1～2.5周时，血清和尿中的HCG水平即可迅速升高，第8孕周达到高峰，至孕期第4个月始降至中等水平，并一直维持到妊娠末期。 间接凝集反应(indirect agglutination) ????是用可溶性抗原包被在一种与免疫无关的，具一定大小的不溶性颗粒（即载体颗粒，如：乳胶颗粒或红细胞）的表面，然后与相应抗体作用，在有适宜电解质存在的条件下，结合产生的凝集现象。 间接凝集抑制试验：将可溶性抗原与相应抗体预先混合，充分作用后，再加入相应致敏颗粒，此时因抗体已被可溶性抗原结合，不再能与致敏颗粒表面相应抗原结合，故不能出现致敏颗粒被动凝集的现象。 4、抗ABO血型系统血清 按人红细胞表面带有的A或B种凝集原，可将血型分为A、B、AB和O型4种。 ABO血型抗血清的制备 血型鉴定的方法：玻片直接凝集方法 毒素的来源 植物毒蛋白及其A链类似物（也称核糖体失活蛋白，RIP），以及细菌毒蛋白。 常用的毒素有： 细菌毒素：白喉毒素（DT）、绿脓杆菌外毒素（PE） 植物毒素：蓖麻毒素、相思子毒蛋白。 这些毒素的特点：在进入胞浆后，能使蛋白质生物合成停止，从而使细胞死亡。 它们都是高效的细胞毒剂，理论上只要1、2个毒蛋白A链分子进入胞浆，即可杀死一个细胞，因此它们是“生物导弹”相当理想的 “弹头”。 植物毒素A 链能催化真核细胞核糖体60S 亚基的失活，使核糖体失去与肽链延伸因子2 （EF-2）结合的能力，从而使蛋白质生物合成停止。 植物毒素B链能与细胞表面多糖的半乳糖残基结合，并插入细胞膜，形成孔道，帮助A 链进入胞浆。 毒素 A、B链之间由二硫键相连。 当毒素与细胞表面结合后，细胞膜内凹，形成吞噬泡，然后经高尔基体，转到溶酶体 中。在这过程 中，一部份毒素A链可能在B链帮助下，穿过膜进入胞浆，使蛋白质合成停止，其他毒素分子可能为溶酶体内的水解酶降解。 第五章 复习 5.2.1动物细胞的形态 离体培养细胞类型：贴壁细胞、悬浮细胞、兼性贴壁细胞 5.5.1动物