201生产用水.doc

xxxxxx有限公司 No.LM201 实验室实验操作说明 第一页 生产用水微生物检测 1．参考标准 GB/T 5750.12 -2006 GB 4789.2—2010 GB 4789.3—2010 2．应用范围 此方法描述了生产用水中菌落总数和总大肠菌群的测定。 3．原理 菌落总数：水样在营养琼脂上有氧条件下37℃培养48小时后，所得1mL水样所含菌落的总数。 总大肠菌群：总大肠菌群指一群在37℃培养24小时能发酵乳糖、产酸产气、需养和兼性厌氧的革兰氏阴性无芽孢杆菌。 4．试剂 3.1) 营养琼脂：按供应商说明配制并灭菌，保存在45－47℃水浴中。 3.2) 乳糖蛋白胨培养液：按供应商说明配制，二倍浓缩乳糖蛋白胨培养液除蒸馏水外，其他成分量加倍分装10mL于5支具有倒管的试管中。灭菌，待用。 3.3) 灭菌生理盐水 3.4) 0.4g/L硫代硫酸钠溶液：称取0.04g硫代硫酸钠溶解定容于100mL的容量瓶中，混匀。 3.5) 75%乙醇（V/V） 5．步骤 创建日期： 化验室主管 质量经理 xxxxxx有限公司 No.LM201 实验室实验操作说明 第二页 生产用水微生物检测 备注： 1）水样采取的过程中，打开水龙头时要注意流出的水不能飞溅到水龙头上以免染菌使结果偏差。 2）大肠菌群疑似菌落的特点是：深紫黑色，具有金属光泽的菌落； 紫黑色，不带或略带金属光泽的菌落； 淡红黑色，中心色较深的菌落。 3）进行复发酵证实试验中应挑取平板上1～2个典型的菌落，若平板上菌落不典型则应该多挑取几个菌落以避免假阴性的发生。 5）生产用水为已经过处理的出厂自来水，并且经常检验，因此直接接种5份10mL乳糖蛋白胨双料培养液，每份接种10mL水样。 6）菌落总数的稀释度选择100、10-1、10-2，观察一段时间后可根据实际情况修订。 7）生产用水监控计划： 采样点编号 生产用水采样点名称 检测项目及结果判定 总大肠菌群 （CFU/100mL） 菌落总数 （ A-1 不得检出 ＜100 A-2 不得检出 ＜100 A-3 不得检出 ＜100 A-4 不得检出 ＜100 A-5 不得检出 ＜100 A-6 不得检出 ＜100 A-7 不得检出 ＜100 D-1 不得检出 ＜100 D-2 不得检出 ＜100 D-3 不得检出 ＜100 纯水1 不得检出 ＜100 注：各点保证每两周采样一次进行检测。 创建日期： 化验室主管 品管经理 xxxxxx有限公司 No.LM201 实验室实验操作说明 第三页 生产用水微生物检测 附录1： 用5份10mL水样检测时的最可能数（MPN） 5个10mL管中阳性管数 最可能数 0 ＜2.2 1 2.2 2 5.1 3 9.2 4 16.0 5 ＞16 附录2： 总大肠菌群MPN检索表 （总接种量55.5mL，其中5份10mL水样，5份1mL水样，5份0.1mL水样） 接种量 总大肠菌群/ （MPN/100mL） 接种量 总大肠菌群/ （MPN/100mL） 10 1 0.1 10 1 0.1 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 1 2 3 4 5 ＜2 2 4 5 7 9 1 1 1 1 1 1 0 0 0 0 0 0 0 1 2 3 4 5 2 4 6 8 10 12 0 0 0 0 0 0 1 1 1 1 1 1 0 1 2 3 4 5 2 4 6 7 9 11 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 0 1 2 3 4 5 4 6 8 10 12 14 0 0 0 0 0 0 2 2 2 2 2 2 0 1 2 3 4 5 4 6 7 9 11 13 1 1 1 1 1 1 2 2 2 2 2 2 0 1 2 3 4 5 6 8 10 12 15 17 0 0 0 0 0 0 3 3 3 3 3 3 0 1 2 3 4 5 6 7 9 11 13 15 1 1 1 1 1 1 3 3 3 3 3 3 0 1 2 3 4 5 8 10 12 15 17 19 0 0 0 0 0 0 4 4 4 4 4 4 0 1 2 3 4 5 8 9 11 13 15 17 1 1 1 1 1 1 4 4 4 4 4 4 0 1 2 3 4 5 11 13 15 17 19 22 0 0 0 0 0 0 5 5 5 5 5 5 0 1 2 3 4 5 9 11 13 15 17 19 1 1