细菌的生化反应[精选].ppt

枸橼酸盐利用试验原理 细菌生化反应 概念：用生化的方法来检测细菌对各种基质的代谢作用及代谢产物，借以鉴别细菌种类，这种生化试验称为细菌的生化反应试验。 意义：是鉴别细菌的重要依据。 细菌的生化反应 生化反应 碳水化合物 代谢试验 各种酶类试验 抑菌试验 糖发酵试验 甲基红试验 V-P试验 蛋白质和氨基酸代谢试验 硫化氢试验 吲哚试验 碳源和氮源 利用试验 枸橼酸盐利用试验 IMViC试验 甲基红试验 大肠杆菌分解葡萄糖产生丙酮酸后进行混合酸发酵，产生乳酸、甲酸、乙酸、琥珀酸等多种有机酸，使培养液pH小于4.5，甲基红指示剂呈红色，为甲基红试验阳性。 产气杆菌分解葡萄糖产生丙酮酸，经脱羧后生成中性乙酰甲基甲醇，培养液的pH大于5.4，甲基红指示剂呈橘黄色，为甲基红试验阴性。 [原理] 葡萄糖 丙酮酸 大量混合酸 pH降至4.4以下 甲基红试剂 培养基变红 甲基红试验 乙酰甲基甲醇（中性） pH＞5.4 甲基红试剂 培养基橘黄色 [方法] 滴加甲基红指示剂数滴，立即观察结果 [结果] 红色为阳性，+ 不出现红色为阴性，- V－P试验 产气杆菌利用葡萄糖时产生中性物质之一就是乙酰甲基甲醇，它在碱性溶液中被空气中的分子氧氧化生成二乙酰，二乙酰与培养基中的含胍基的化合物反应，生成红色化合物，是VP试验阳性；而大肠杆菌不能产生乙酰甲基甲醇，为阴性。 [原理] 葡萄糖 丙酮酸 乙酰甲基甲醇 二乙酰 V-P试剂 培养基变红 V－P试验 与蛋白胨培养基精氨酸中的胍基 反应生成红色化合物 [方法] 取出试管培养物，加入等量的李氏试剂，摇匀后不加塞，静置30分钟观察结果。 [结果] 红色为阳性，+ 无红色为阴性，- 枸橼酸盐利用试验 某些细菌能力利用培养基中的枸橼酸盐作为唯一的碳源，也能利用其中的铵盐作为唯一氮源，细菌生长过程中分解枸橼酸盐产生碳酸盐和分解铵盐生成的氨，使培养基变碱性，使指示剂呈碱性反应，指示剂由绿色变为深蓝色是枸橼酸盐利用试验阳性（产气杆菌），反之培养基不变色是为阴性（大肠杆菌）。 [原理] 枸橼酸盐 铵盐 碳酸盐 氨 培养基pH下降 溴麝香草酚蓝 呈碱性变色 培养基变蓝 培养基 [结果] 深蓝色为阳性+ 绿色为阴性- * *