佐剂疫苗比较试验方案长效试验和田间试验..docVIP

佐剂田间和长效对比试验方案 1. 试验材料 1.1 佐剂 1.1.1 TVB8佐剂：批由TVB8公司技术有限公司提供。 1.1.2 ISA206佐剂：批号Qp32751, 法国SEPPIC公司生产。 1.2 乳化设备 德国IKA C-MAG HS 7型磁力搅拌器。 1.3 试验动物 健康易感架子猪，50头，体重40kg左右，液相阻断ELISA抗体效价≤1:8，均购自非疫区。 1.4 抗原 经检验合格的口蹄疫灭活抗原（O/GX/09-7株，灭活前每毫升病毒含量应至少为107.0TCID50或每0.2ml病毒含量应至少为107.5LD50，灭活后保存时间不超过2个月）。 1.5 FMDV强毒 O/GX/09-7株强毒。 2．试验方法 2.1 疫苗制备 将哈顿公司佐剂TVB8和ISA206佐剂分别与合格的同批次口蹄疫灭活抗原按推荐的比例乳化，制备成品疫苗。 2.2安全试验和效力试验 2.2.1 安全试验 将50头架子猪随机分为三组，TVB8组和206组分别为20头，空白对照组为10头。 分别在免疫前和免疫后12h、48h测量猪的体温（表1、2、3）,免疫前和试验结束时分别对试验猪进行称重(表4、5、6)。进行统计学分析。 表1 TVB8组免疫前后猪的体温变化 TVB8组 体温(℃) 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 0h 12h 48h 表2 206组免疫前后猪的体温变化 206组 体温(℃) 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 0h 12h 48h 表3 对照组免疫前后猪的体温变化 空白组 体温(℃) 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 0h 12h 48h 表4 TVB8组免疫前后猪的体重变化 TVB8组 体重(Kg) 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 0d 180d 表5 206组免疫前后猪的体重变化 TVB8 组 体重（Kg） 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 0d 180d 表6 对照组免疫前后猪的体重变化 空白组 体重（Kg） 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 0d 180d 2.2.1效力试验分组 将试验猪随机分组，20头/组。一组免疫TVB8佐剂疫苗样品，2ml/头；另一组免疫ISA206佐剂疫苗样品，2ml/头；将剩余10头猪作为空白对照，不接种任何样品。 表7 TVB8组免疫猪后不同天数抗体效价 TVB8 组抗体效价 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 0d 14d 21d 28d 60d 120d 180d 表8 206组免疫猪后不同天数抗体效价 206 组抗体效价 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 0d 14d 21d 28d 60d 120d 180d 表9 空白对照组免疫猪后不同天数抗体效价 空白对照抗体效价 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 0d 14d 21d 28d 60d 120d 180d 2.3 攻毒试验 2.3.1 攻毒保护试验 免疫接种180日后，TVB8组和206组、连同对照猪各随机选5头，每头猪耳根后肌肉注射O/GX/09-7株强毒,每头猪2ml（含103ID50），连续观察10日。对