养殖101班,刘东,521091112..docVIP

三种弧菌多联卵黄抗体疫苗制备及免疫效果研究 学 院： 海洋学院 专业班级： 水产养殖101班 学生姓名： 刘 东 学 号： 521091112 指导教师： 张晓君（教授） 2012年5月 连云港 毕业设计（论文）中文摘要 三种弧菌多联卵黄抗体疫苗制备及免疫效果研究 摘 要：伴随着集约化、大密度、工厂化水体养殖的迅速发展，海水养殖行业遭受很多细菌性、病毒性疾病，寄生虫等的困扰，因此严重影响了我国海水养殖业的迅速发展。其中细菌性病原是危害养殖鱼类的一类主要菌群，每年给我国渔民带来巨大的经济损失。很多年来一直使用广谱抗生素，如今在很多虾蟹育苗场仍然使用水产上禁用的渔药，如孔雀石绿等，造成了很多病原菌的抗药性不断增加，且这些药物残留对水环境的污染日益加重，另外，药物残留不仅会在水产动物体内残留，而且还会通过富集作用残留在人体内，最终严重影响人类的健康。 卵黄免疫球蛋白(Egg yolk immunoglobulin，IgY)可治疗由病毒、细菌等引起的人类、动物疾病，具有很高的安全无性、不产生抗药性、服用简便等优点，提供营养。在预防水产动物病害的爆发，水生动物疾病的治疗，具有广阔的应用前景。 本论文针对海水鱼类频发的细菌性疾病，尤其是高死亡率的弧菌病进行了多联卵黄抗体的制备。以纯培养的哈维氏弧菌（Vibrio?harveyi）、鳗弧菌（V.anguillurm）、副溶血弧菌（V.heamolyticus）为抗原，通过三种弧菌免疫蛋鸡，收集卵黄。通过试管沉淀法测定卵黄抗体的效价，结果表明在蛋鸡免疫4周后，卵黄中抗体的数量不断增加，能够不断持续到第8周，抗体效价最高可达220。 将研制的卵黄抗体添加到半滑舌鳎配合饲料中投喂，投喂3,8,12,24h后取鱼的血液、脾脏、肾脏、肝脏、肠粘膜，用酶联免疫吸附试验（ELISA） 检测卵黄抗体的代谢吸收情况，结果表明，IgY经口服后很快到达直肠，继而血淋巴中也出现抗体，并可持续12 h，肝胰、肾脏、脾脏也可出现抗体，但浓度稍低。取溞状幼体、糠虾幼体、仔虾分别投卵黄，对照组喂虾片，分别接种2ml、10ml的鳗弧菌、副溶血弧菌、哈维氏弧菌。结果表明，注射菌液在投喂卵黄的情况下，与投喂虾片相比较能够显著降低死亡率。三联卵黄抗体对鳗弧菌的保护作用，蚤状幼体的死亡率降低41.4%，糠虾幼体降低42.6%，仔虾降低37.3% 。三联卵黄抗体对哈维氏弧菌的保护作用，蚤状幼体的死亡率降低27.3%，糠虾幼体降低31.3%，仔虾降低29.4% 关键词：弧菌；卵黄抗体；效价测定；免疫效果 毕业设计（论文）外文摘要 Three kinds of vibrio multigang yolk antibody vaccine preparation and immune effect research Abstract:Along with the rapid development of the intensive , high -density and factory-water farming , aquaculture industry has suffered much bacterial , viral disease, parasites and other problems, which therefore has a serious impact on the rapid development of Chinas marine aquaculture industry. Bacterial STDs harm which was originally a principal flora of farmed fish , have resulted in the huge economic losses of aquaculture industry in annual year. It has been using of broad-spectrum antibiotics for many years, and now banned fishery drugs are still used on many crabs aquaculture hatcheries, such as malachite green ,which it results in the improving of the resistance to