凝血酶时间测定sop..docVIP

文件编号 制定日期 文件版次 正文页数 附件份数 第一版 5 凝血酶时间（TT）测定作业指导书 修 订 记 录 修订日期 版次 页次 修订内容 第一版 全部 发行章 批准 审核 编制 制定部门 检验科 文件持有部门：检验科临检室 血浆凝血酶时间（TT）测定 （分析仪器法） 1. 实验原理: 确定量的血浆样本经过一定时间的加温后,加入一定浓度的凝血酶试剂,采用波长为660nm的光照射样本,凝血过程中血浆的混浊度可以通过测量散射光光强度的改变来测定,从散射光光强度的测定,可以作出凝血曲线,。凝血酶可使血浆标本中的纤维蛋白原转化为纤维蛋白，形成凝块。形成凝块的时间即检测时间。 2. 标本采集 2.1 早晨空腹采血(空腹12小时左右),静脉采血. 2.2 3.8％(w/v)枸椽钠0.2ml+静脉血1.8ml,混匀. 3. 标本存放 1小时内(3000r/min×15min)分离血浆,室温放置不超过2小时,2～8℃保存不超过4小时，长时间保存需在冰冻条件下，（-70℃不超过6个月）”变为“Ready”,表示仪器预热完成,进入系统准备工作状态,可进行测定. 8.3 输入工作清单: 从主菜单选Work List→出现第一架样本工作清单输入画面,选ID NO Entry输入第一个样本号→按相应实验项目名称键Fbg,并同时输入此标本的其他测试项目,若选“凝血四项（PT、APTT、Fbg、TT）”，可按Profile #1组合选项选择，选中项目相应位置标记为“○”，选完项目后按ENTER确认，要删除某项目时只需按该项目（按键如PT○变为PT-）即可，→用↑↓键，同样输入其他标本编号项目。（快速输入可用Repeat键，输入重复标本数，复制同样项目的输入. 8.4 放置样本 按8.3所设好的工作清单顺序将离心分离好的样本放置于样本架上,并按顺序把样本架排列于Sampler进样器右边位置(最多同时放5架共50个样本) 8.5 按Start键开始测定. 盖好遮光盖,确认仪器为准备状态(显示屏正上方显示“Ready”)按Start键,进样开始,→测定进行,仪器显示为“Analying”(被选择项目背景变为“◎”，此时可重复8.3,8.4,继续输入其他架样本工作清单,按Rigester,继续确认测试任务,添加样本架继续测试,→测定完成,测定项目背景变为“●”，打印机打印出测定结果，所有测定清单完成，系统恢复“Ready”状态. 8.6 每日维护:完成每日的测定后,关机前维护. 8.6.1 冲冼针Rinse Probe 8.6.2 清空废液瓶,和已使用过的反应杯. 8.6.3 将试剂架连用试剂放入冰箱. 8.7 关机:先关主机,再关打印机. 9．检验结果的判断与分析: 9.1 仪器测定TT线性范围在5-600s,测定完成仪器将显示每个参数的结果，若不能对参数进行正确计算,将出现下列信息: ﹡﹡﹡,﹡出现错误,不能得到分析数据 ˉˉˉ,ˉ不能计算参数 ＋＋＋，＋数值超出线性范围. 9.2 仪器设定Fbg参考范围在13-21s,如果得到一个不正常数值,在数据的左侧将出现下列标记: ﹡ 出现错误信息 数据低于可报告的低限 数据高于可报告的高限 10. 质量控制:每批样本同时测定两个浓度水平(高值和正常值)的质控品,以2S为警告限,3S为失控限,绘制质控图,判断是否在控.质控规则详见室内质控作业指导书. 11. 临床意义:TT是用于判定血栓前状态或血栓性疾病的筛查项目. 11.1 参考范围: 13-21s，（患者结果超过正常对照3秒以上有临床意义） 11.2 纤维蛋白原溶解治疗的监测 11.3 纤维蛋白形成障碍或怀疑重度纤维蛋白原缺乏的筛查 11.4 肝素诱导凝血酶时间延长和纤维蛋白形成障碍的鉴别诊断 12．变异的潜在来源 12.1 抗凝剂：草酸盐、EDTA、肝素不能用于TT测定项目，抗凝比例不当也将影响结果的准确性。 12.2 样本采集处理不当，如血与抗凝剂未充分混匀，出现小凝块；混匀时过分用力，使红细胞破坏出现溶血，均会造成结果变异。 12.3 纤溶药物的影响：如双香豆素、链激酶、尿酶等 12.4 妊娠与急性炎症的影响 13. 操作注意事项:干粉试剂及质控血浆溶解 13.1 确认溶剂类型，一般溶解液包括：蒸馏水、生理盐水、缓冲液、厂家特定溶解液，必须按说明书要求使用。 13.2 溶解时，轻轻转动容器，保证干粉完全溶解，避免剧烈振荡。 13.3 复溶后，室温放置5-10分钟方可使用。 14. 仪器维护与保养 14.1 日常维护（见8.6） 14.2 每周维护 14.2.1 液路冲洗：仪器在“Ready”状态