07 第五章 环境污染物的一般毒性及其评价方法.ppt

四. 半数致死量测定程序 1 实验动物 性成熟、健康，雌雄各半 2 化学结构、理化性质和毒性参考资料 3 预试验 求出全活、全死剂量 4 正式实验 在求出全活、全死剂量之间设5~6个实验组 组距 1.2~1.5倍 小鼠、大鼠 10只/组、家兔4?6只/组 如化合物毒性有性别差异，则应分别计算雌、雄性动物各自的LD50(LC50)。 观察持续时间和饲养条件 观察期一般为14天内的总死亡数。 速死性毒物求其LD50(LC50)，应计算24小时的死亡率。 LD50值的表示应注明染毒途径和观察时间，以便于在进行毒性比较时有可比性。 在观察期间，应保障实验动物有完全的膳食、充足的饮水及适宜的温湿度环境，以防止动物出现非中毒性死亡。 四. 半数致死量测定程序 中毒症状观察 应详细地观察记录动物的中毒症状、发生和发展过程及规律，死亡前症状特点、死亡时间等。 很多毒物初期往往初期先出现兴奋或抑制现象。应注意体重变化。 粘膜刺激症状，如出汗、流涎， 甚至有血性分泌物，瞳孔改变等。 四. 半数致死量测定程序 病理学检查和其它指标观察 在观察期间中毒死亡动物应及时解剖，检查器官有无充血、出血、水肿或其它改变，并对有变化的脏器作病理组织学检查。 对存活动物在观察期结束时，应做全部动物解剖，逐一进行病理学检查。 四. 半数致死量测定程序 计算LD50和LD50 95%可信限 1.霍恩式法 2.简化寇式法 3.直接回归法 四. 半数致死量测定程序 五. 急性毒性分级 单位：mg/kg WHO化学品毒性分级 剧毒 1 高毒 1~ 中等毒 50~ 低毒 500~ 实际无毒 5000~ 极毒 1 剧毒 1~50 中等毒 51~500 低毒 501~5000 实际无毒 5001~ 15000 无毒 15000 中国卫生部 根据大鼠一次经口LD50的急性毒性分级 急性毒性阈剂量(浓度) 一次染毒引起某种毒性反应的最小剂量，属于非致死性指标。 未知毒性污染物： 可选择综合性、非特异性指标。如体重，活动能力，应激状态、条件反射等。 已知毒性比较了解的可选择最敏感的指标 刺激性气体或蒸汽：可选择眼睛和嗅觉刺激阈浓度。 观察指标的选择 急性毒性试验的局限性 1.消耗的动物量大 2.获得的信息有限 3.测得的LD50仅仅是一个近似值 4.在安全性评价中仅评价动物死亡和简单的症状观察是不够的，更需要的是生理学、血液学及其它化验检查所提供的深入细致的毒性信息。 急性毒性阈剂量实验方法 游泳实验 反映体力和活动能力 刺激阈实验 反映对上呼吸道、眼睛和口腔等粘膜的刺激作用 猫置于染毒柜内，加入受试物，观察症状30min 症状：流泪、流缔、喷嚏、呛咳、流涎等 50%实验动物出现症状的最小浓度—刺激阈浓度 水槽 水温20℃ 动物放入水中，记录从放入到沉没5秒所需要的时间 记录游泳速度和游泳姿势 一. 慢性毒性和亚慢性毒性 在日常生活环境中，人类接触环境污染物的浓度远低于急性致死浓度，但接触的时间则较长。 为了评价在较长的一段时间内反复接触低浓度环境污染物的毒性作用，获得接近于人类实际接触条件下的毒性资料，需进行亚慢性或慢性毒性试验。 5.2 环境污染物的亚慢性、慢性毒性及其评价 亚慢性毒性(subchronic toxicity) 在一段时间内（1~3个月）连续摄入、较大剂量环境污染物引起的毒性效应。 慢性毒性(chronic toxicity) 长期连续、低剂量摄入环境污染物（6个月~终生）引起的毒性效应。 5.2 环境污染物的亚慢性、慢性毒性及其评价 二. 亚慢性毒性及评价方法 1.在急性毒性试验的基础上，在较短时间内了解受试物对机体长期作用时的主要毒性性质和特点、靶器官和最大耐受剂量 2.探讨敏感指标及其剂量-反应（效应）关系 3.为慢性毒性试验设计提供依据。 亚慢性毒性评价目的 实验动物和分组 大鼠或小鼠 健康，幼龄 每组10~20只 雌雄各半 染毒途径 染毒剂量和实验期限 1. 1/20~1/5 LD50范围内设三个剂量组，设对照组 2.无蓄积作用，排泄快的毒物还可适当加大剂量 3.低剂量组动物不会产生可观察到的毒性反应 4.高剂量组动物出现明显的中毒反应，但不引起动物死 亡（或10%） 5.1~3个月 与人类实际接触的方式和途径相同 亚慢性毒性试验 二. 亚慢性毒性及评价方法 亚慢性毒性实验观察指标