第三章植物器官和组织培养预案.ppt

◆生长素对根离体培养三种反应： （1）生长素促进离体根生长(如玉米、小麦等)； （2）离体根生长依赖于生长素的作用(如黑麦)； （3）生长素抑制离体根的生长（樱桃、番茄）。 ◆激动素 增加根分生组织活性，抗老化。 ◆赤霉素 能明显影响侧根的发生与生长，加速根分生组织老化。 ◆激素的影响 植物茎的培养是指对带有定芽或不定芽的外植体进行离体培养，再生完整植株的过程。 茎的培养是植物离体快繁的主要途径。 三、植物茎培养 1、类型 茎段培养： 10-100?m的茎尖分生组织 带有腋(侧)芽或叶柄、长几厘米的茎节段进行离体培养 茎尖培养： 植物茎培养 2、意义 无性系快速繁殖； 培养无病毒苗，品种改良； 理论基础研究。 3、茎段培养 将经过表面消毒的茎段在无菌条件下，切成几厘米长带节的节段，接种在固体培养基上。经过培养后，在茎段可直接发生不定芽，或先诱导形成愈伤组织，再脱分化形成再生苗。 4、激素对茎段培养的影响 ⑴生长素 适量生长素有利于芽的生长 带芽的茎段一般不需要外源生长素 不带芽的茎段需要外源生长素 4、激素对茎段培养的影响 ⑵细胞分裂素 细胞分裂素对芽的生长是必需的 细胞分裂素和生长素的配比是关键 6-BA是促进茎增殖最有效的细胞分裂素。 ⑶赤霉素 外源GA对部分植物芽的伸长有效，浓度小于1㎎/L 举例：影响月季茎段增殖培养因素 1．腋芽在茎段上的位置。每段的一个腋芽培养在无激素的基本培养基上，23天后，接近枝条最顶端的和紧挨着枝条基部的芽发育最慢，而枝条中部的芽发育最快。 2．去茎顶端的作用。继代培养接种时切去嫩茎的顶芽后，再转接于新鲜培养基上培养，促进嫩茎增殖。 3．嫩茎长度对形成多芽苗的影响。茎段为1-10 mm长短时，对形成多芽苗最有效，而且每个茎段的侧枝数也较多，若切割过短(小于1mm)或过长(11-15mm)都对茎增殖不利。 第三节 植物繁殖器官培养 一、植物花器官培养(主要见胚胎培养和花药培养) 二、植物幼果培养(了解) 三、植物种子培养： 定义：是指对受精后发育不全的未成熟种子和发育完全的成熟种子进行离体培养的技术。 用途：打破种子休眠，缩短生活周期；挽救远缘杂种，提高杂种萌发率等。 对培养的要求：成熟种子萌发培养所用培养基成分简单，不需生长调节剂；未成熟种子萌发培养则需要添加一定的营养成分和生长调节剂。 第四节 植物组织培养 一、植物分生组织培养 定义：是指对植物分生组织进行离体培养的技术，包括植物根尖、茎尖等顶端分生组织和形成层组织的培养。 其中茎尖培养广泛应用于植物再生和脱病毒研究。 二、植物茎尖培养 茎尖培养（shoot tip culture）指对植物顶端的原分生组织和衍生分生组织的培养。 茎尖培养的成活率与茎尖大小呈正相关。 茎尖培养广泛应用于种苗快繁、脱毒苗生产及品种改良和基础理论研究。 快繁可取数毫米大小，脱毒培养取小于1mm茎尖。 植物茎尖培养 植物茎尖培养 茎尖离体培养可能出现的培养反应： 生长太慢 生长过旺，愈伤增多 生长正常 思考题 植物器官和组织培养的基本程序是什么？如何获得无菌培养材料？ 离体茎尖经培养后将会出现怎样的培养反应？ 谢 谢 ! 第三章 植物器官和组织培养 植物器官培养（Organ culture）是指对植物某一器官的全部或部分或器官原基进行离体培养的技术。 组织培养（Tissue culture）是指对植物愈伤组织等进行离体培养的技术。 植物器官和组织培养的基本程序 植物营养器官培养 植物繁殖器官培养 植物组织培养 第一节 植物器官和组织培养的基本程序 一、无菌外植体的获得 二、初代培养物的建立 三、形态发生和植株再生 四、培养产物的观察记载 五、诱导生根和再生植株移栽 一、无菌外植体的获得 1、外植体的选择与消毒 ⑴ 外植体的选择 ◆取材部位 ◆外植体的生理状态 ◆植物种类和基因型 清洗外植体 选用灭菌剂对外植体灭菌 无菌水冲洗3-5次 主要过程： ⑵外植体的消毒 二、初代培养物的建立 （一）无菌环境 （二）规范操作 （三）条件合适 三、形态发生和植株再生 具根茎的两极器官 单极器官 先茎后根 先根后茎 器官途径 体胚途径 愈伤组织 外植体 植株 植株 植株 植株 形态发生 ⑴不定芽途径 ◆生长在老根、茎或叶上的芽称为不定芽 ◆途径： 不定芽培养时，一般采用芽丛进行繁殖，如非洲菊、草莓等。 外植体 芽 如矮牵牛、福禄考、悬钩子等。 ⑵腋芽增殖（侧芽增殖）途径 茎尖 分 化 腋芽 侧芽 试管苗 继代 增殖 ⑶原球茎途径 茎尖 分 化 原球茎 继代 培养 丛生原球茎 试管苗 增 殖 Eg：兰花组培快繁 ⑷胚状体途径 指由培养细胞诱导分化出具胚芽、胚根、胚轴的胚状结构，进而长成完整植株。 四、培养产物的观察记载 （一）愈伤组织 诱