第九章血红蛋白病和免疫性溶血性贫血检查预案.ppt

原理：将煌焦油蓝液与新鲜血液一起孵育,不稳定Hb易变性沉淀形成包涵体.而Ret保温10min就显现出来,HbH病红细胞包涵体一般在10min至2h之间形成,而其他不稳定Hb形成珠蛋白变性沉淀需温育更长时间（3h或更长）.观察温育2h包涵体的红细胞是否比温育10min的阳性细胞多,科了解是否有HbH等不稳定HbH的存在。 对诊断HbH病是一简便且特异性高的方法。 有时HbH量少，或其他因素使Hb电泳未见HbH区带，而HbH包涵体为（++）。 红细胞包涵体试验 血红蛋白F酸洗脱试验 原理：HbF具有抗碱和抗酸作用，其抗酸能力比HbA强，将血涂片于酸性缓冲液中孵育，含HbF的红细胞不被酸洗脱被伊红染成红色，而含HbA的红细胞被酸洗脱，不能被伊红着色。 参考区间: 正常血片韩HbF的红细胞0.02(2%);孕妇可轻度增加。 临床意义：地中海贫血着色增加，重型患者多数红细胞染成红色，轻型可见少数着色，遗传性胎儿血红蛋白持续综合征全部红细胞染成红色。 热变性试验 原理：根据不稳定Hb比正常Hb更容易遇热变性，观察Hb液在50时是否出现沉淀，对不稳定Hb进行筛查。 参考区间:正常热沉淀Hb1% 临床意义：Hb沉淀率增加，说明不稳定Hb存在。 在分子水平上进行血红蛋白病的诊断和研究 血红蛋白基因PCR技术检测 总 结 ※ 异常血红蛋白病和地中海贫血有共同的分子基础 ——突变、缺失 ※ 基因缺失是引起?地中海贫血的主要原因 ※ 基因突变是引起?地中海贫血的主要原因 复习思考题 1、何谓血红蛋白病？ 2、血红蛋白病的分类有哪些？ 3、如何诊断地中海贫血？ 4、如何诊断异常血红蛋白病？ 第五节 免疫性溶血性贫血的检查 检查抗体性质 明确诊断方向 判断效价水平 评估疾病程度 查找疾病原因 检查目的 一、概 述 免疫性溶血性贫血-是由于免疫功能紊乱产生某种抗体能与自己正常红细胞表面的抗原结合或激活补体，引起红细胞过早破坏而导致的一组获得性溶血性贫血，统称免疫性溶血性贫血。 定义： 免疫性溶血性贫血的分类 二、实验室检查 （一）直接抗人球蛋白试验（DATG） 【原理】自身免疫性溶血性贫血的自身抗体（IgG），是不完全抗体，结合在红细胞表面，使其致敏。直接抗人球蛋白试验（DAGT），是应用抗人球蛋白试剂（抗IgG和／或抗C3d）与红细胞表面的IgG分子结合，并出现凝集反应。红细胞表面如果不存在自身抗体，则凝集反应呈阴性。 直接抗人球蛋白试验： 已致敏RBC 抗人球蛋白 RBC凝集 检测RBC上含有不完全抗体：如检测新生儿脐血RBC上有无来自母体的抗体。 （二）间接抗人球蛋白试验（IAGT） 【原理】 间接试验是检查血清中游离的不完全抗体的试验。本试验是应用已知红细胞与抗人球蛋白血清，检测被检者血清中是否含有相应的不完全抗体，如果存在，则已知红细胞被致敏，再加入抗人球蛋白血清，可出现凝集。 间接抗人球蛋白试验： D-RBC 待检血清 致敏RBC 抗人球蛋白 RBC凝集 检测血清中是否含有不完全抗体：如检查孕妇血清中有无不完全抗体。 【 DAGT 与IAGT临床意义】 自身免疫性溶血性贫血 药物诱发性免疫性溶血性贫血 新生儿溶血病 ；结缔组织病 Rh和ABO血型不合的妊娠 DAGT和IAGT阳性 见于： DAGT与IAGT阳性见于： （三）冷凝集素试验（CAggT） 【原理】冷凝集素为IgM类完全抗体，在低温时可使自身红细胞、0型红细胞或与受检者血型相同的红细胞发生凝集，凝集反应的高峰在0℃～4℃，当温度回升到37℃时凝集消失。 (二)地中海贫血 ——珠蛋白链合成障碍性贫血 概述 又称地中海贫血（thalassemia）、海洋性贫血。是由于珠蛋白肽链合成减少或完全不能合成引起的遗传性疾病。按肽链合成减少的类型可分为α地贫、β地贫等。我国南方发病比北方高，本病有家族史。 β地中海贫血—由于?珠蛋白基因的缺失或缺陷使 ?链的合成受到抑制而引起的溶血性贫血。 特点：ＨbＡ↓ 都表现为低色素性贫血 α地中海贫血—由于?珠蛋白基因的缺失或缺陷使 ?链的合成受到抑制而引起的溶血性贫血。 地中海贫血 地 中 海 贫 血 α-珠蛋白合成障碍性贫血 α地中海贫血-- 是由于α珠蛋白基因的缺失或缺陷使珠蛋白链合成受到抑制则和β链和γ形成四聚体（β4 或γ4）。其临床分型为： 1·静止型 2·标准型 3·HbH病 4·Hb Bart’s胎儿水肿综合症 1·静止型：是缺失一个珠蛋白基因造成（／α－）即α+地贫 。无症状，血象无特殊异常，唯一的异常是在出生八个月时发