第六章_一般毒性作用2015预案.ppt

6.试验动物的饲养环境 恒定的温度：22±3℃ 湿度：30~70% 光照度：昼夜各半 饲料合格、饮水合格、垫料合格 目的是找出0％及100％估计致死量。更确切地说是找到一个0死亡的最大剂量和100％死亡的最小剂量的估值以决定实验中采用的最大剂量(Dm)和最小剂量(Dn)，这在测定中非常重要，是实验成败的关键。 ①设定以此预期值作为待测化学物的中间剂量组，并在该剂量的上下各设计l~2个剂量组作为预试验剂量； ②根据确定的剂量组进行染毒； ③根据预试验的死亡资料确定组距。 可根据以下公式计算出剂量分组： i=(lgLD90-lgLD10)／(n-1) 或： i=(lgLD100-lgLD0)／(n-1) 公式中i为组距(相邻的两个剂量组对数剂量之差)；n为设计的剂量组数。 一般来说、根据试验设计所选用的LD50计算方法来确定组数。例如寇氏法、几率单位法一般设6～10个剂量组；霍恩法固定设4个剂量组。求得i值后，以最低剂量组(LD0或LD10)的对数剂量加上一个i值，即是第二个剂量组的对数剂量，依此类推直至最高剂量组，查各自的反对数即得出各组剂量的真实值。 高剂量组应能引起明显的毒性或少量动物的死亡（少于10%）。 低剂量组应无中毒反应，相当于未观察到有害作用剂量（NOAEL）。 高低剂量组间设置1个中剂量组，比较理想的中剂量组约相当于观察到有害作用的最低剂量（LOAEL）。 （1）一般性指标 包括每日采食量、体重变化（定期称量）、外观特征（被毛光泽、精神状态、呼吸动作、分泌物、排泄物、饮食、活动、行为等）、异常表现和中毒症状等。 （二）目的： 1. 了解受试物是否具有蓄积作用及蓄积性大小如何; 2. 评定该化合物是否可引起潜在的慢性毒性危害; 3. 为制订该物质在食品中的卫生限量标准时,安全系数的选择提供依据。 4. 确定该受试物是否可以用于食品供人类长期食用。 物质蓄积：是指机体少量反复多次接触毒物后，该毒物在机体内逐渐积累。可以用一定的分析方法检测出体内该物质或其代谢产物在体内的增加过程，这种累计随着时间延长而含量增加，当达到中毒阈值时而产生毒性作用。 功能蓄积：是指机体少量反复多次接触化学毒物或其他形式的危害物，每次引起的轻微功能损害逐渐积累，当积累到一定程度时出现毒性效应，而这时用检测手段却查不出体内毒物的的存在或增加。 蓄积毒性作用产生的因素 （1）与接触剂量大小和时间间隔有关 （2）与毒物本身的性质有关 脂溶性物质 水溶性物质 贮存库：如血浆蛋白、脂肪组织、肝脏、肾脏、骨骼等是某些毒物的常见贮存库。 （3）与动物种属的代谢特点有关 （2）实验室检查： 上一内容 回主目录 ?返回 下一内容 ?返回 上一内容 下一内容 回主目录 l）血液学检查 2）血液生化检查 通常为血清天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）、碱性磷酸酶（ALP）、尿素氮（BUN）、总蛋白（TP）、清蛋白（ALB）、血糖（GLU）、总胆红素（T-BIL）、肌酐（Crea）、总胆固醇（T-CHO）等。 尿液检查包括外观、pH值、蛋白、糖、潜血和沉淀物镜检等，可提供与毒物有关的靶器官毒性和中间代谢产物的信息。 上一内容 回主目录 ?返回 下一内容 ?返回 上一内容 下一内容 回主目录 （3）系统尸解和组织病理学检查 l）脏器重量和脏器系数：一般称取心、肝、脾、肺、肾、肾上腺、卵巢或睾丸、脑等脏器湿重，并计算其脏器系数。 2）病理学检查：目的是确定化学毒物对机体毒作用的靶部位、损害的性质和程度。 病理学检查包括：大体检查、常规组织病理学检查、酶组织化学检查、免疫组织化学检查、细胞超微结构检查等， 上一内容 回主目录 ?返回 下一内容 ?返回 上一内容 下一内容 回主目录 （4）分子生物学和免疫学指标 分子生物学和分子免疫学手段可应用于测定许多具有毒理学意义的指标。 活性氧增加、细胞凋亡、免疫功能异常 选择相关指标进行测定，有利于探讨有害作用的机理和对安全性的评价。 上一内容 回主目录 ?返回 下一内容 ?返回 上一内容 下一内容 回主目录 （5）分析剂量-效应关系 生物体产生的某种效应只有与其接触的化学物剂量之间呈现相关关系，才能确定此种效应是该接触物引起的。否则，可能另有原因。 对于进一步的毒理学试验观察指标的选择和毒理机制的研究具有一定的指导意义。 上一内容 回主目录 ?返回 下一内容 ?返回 上一内容 下一内容 回主目录 （6）其他指标的检查 心电图、血压、眼底检测； 对神经系统有影响，可进行神经行为、神经反射等检查； 对电解质、微量元素代谢有毒作用，则检测血钙、血磷等含量； 还可增加眼科、骨髓象检查等。 上一内容 回主目录 ?返回