第十四章、显微摄影(2015.10.19)预案.ppt

第十四章 显 微 摄 影 技 术 (photomicrography) 组织胚胎学教研室 周莉 显微摄影技术 什么是显微摄影技术？ 是指利用显微照相装置把显微镜下观察到的图像拍摄下来制成照片，长期保存研究结果，以便进一步研究和交流。 2.为什么要学习显微摄影技术？ 一是要保存研究结果； 二是要真实地记录研究结果。 第一节 摄影基础 显微摄影是摄影学的一个分支，其基本原理相同，方法也有相似之处。故首先学习摄影的基础知识。 一、照相机镜头和成像原理 镜头是照相机的关键部件，最早的照相机没有镜头。1839年由巴黎的达盖尔(Daguerre)利用显影的概念发明了摄影术。 照相机镜头和成像原理 （一）镜头的焦距（focal length) 从镜头的中心点到形成清晰影像的胶片或数码CCD之间的距离。以F等于某数来表示，如F=50 意旨50毫米焦距的镜头。 （二）镜头的有效孔径 即镜头的最大光圈（光圈是安装在镜头上，用于控制光线的孔径光阑），是表示镜头最大进光量的参数，其大小与镜头的最大直径和焦距有关。 最大光孔直径（25mm） 1：2， F2 焦距（50mm） 最大光孔直径（35mm） 1：1.4， F1.4 焦距（50mm） (三）镜头的视角 一般来说，相机的胶片和CCD的大小是固定的，因此视角大小有镜头的焦距长度所决定，焦距越短，视角越大，焦距越长，视角越小。 焦距的长短决定视角的大小 （四）景深与焦深 概念：是指拍摄对象的最近清晰点至最远清晰点之间的范围。 前景深：被摄物前的一段清晰范围； 后景深：被摄物后的一段清晰范围； 景深：前景深加后景深。 景深受三个因素影响：光圈的大小，镜头焦距的长短，物距远近。 景深短 虚化背景（景深短） （五）镜头的种类 根据相机镜头的焦距长短及其与胶片画幅的对角线长度的关系，将镜头分为标准镜头、广角镜头、远摄镜头和中焦镜头等。 1.标准镜头 焦距约等于拍摄胶片画幅对角线的长度，换言之，覆盖135胶片（24mm×36mm)大小的影像所需的焦距镜头，称标准镜头，为50mm，视角43 °。镜头焦距越长，产生覆盖胶片的影像就越大。 焦距 2.广角镜头：焦距短于胶片对角线的镜头，其焦距短于标准镜头，视场角度大，135相机的广角镜头焦距一般为17mm-35mm，视角越大，景深也随之增大。 3.远摄镜头 又称长焦距镜头，焦距长于底片对角线的镜头，焦距长于200mm以上，视角在8度以下。 4.中焦距镜头 又称“肖像镜头” 焦距在80-135mm,小于85mm的镜头拍摄，肖像容易变形，而大于135mm的镜头拍摄肖像容易产生面部扁平，只有用中焦距镜头拍摄，才逼真和自然。 照相机镜头种类与焦距 焦距在摄影中的功能 1.对被摄物的调焦，决定于照片的清晰度； 2.焦距的长短决定视角的大小； 3.景物影像的大小； 4.景深的长短； 5.影像变形的程度。 二、感光胶片（Film) 是通过相机的光学镜头把拍摄的景物在感光乳胶上记录下来，感光乳剂随着光线的强弱发生不同变化而产生“潜影”，再通过冲洗，潜影就转变为可见的影像。感光乳剂的主要成分时卤化银和明胶。黑白胶片最后形成的影像由金属颗粒构成，彩色胶片形成的影像由染料构成。 1.感光度（sensitivity) 是胶片的感光速度，即胶片对光线照射时的反应能力。 感光度高，卤化银颗粒较大，吸收光线的能力强，反之，感光度低，卤化银颗粒较小，吸收光线的能力弱，所以，感光度的高低取决于胶片乳剂的制备和加工工艺。在光线较弱的环境下拍摄，常使用高感光度胶片。但是，感光度高的胶片产生的影像颗粒较大，质感欠细腻和反差小；而低感光度胶片产生的影像颗粒较细，反差较大，所形成的影像质感细腻。 感光度的表示法：美国的“ASA制”，德国的“DIN制”，中国的“GB制”，后两者表示的感光度数值相同，国际标准感光度（1980）用ISO表示：ISO100/21 °，200/24 °， 400/27 °。 三、反差 照片中不同部分的明暗差别程度称反差，明暗对比强烈，则反差大，反之，则反差小。 被摄物各部分的亮度差和色彩饱和度直接影响反差的大小。 曝光不足与曝光过度的比较 四、曝光控制 欲得到理想的照片曝光是关键，影响曝光因素有三个：光圈、快门和胶片感光度。前两者决定进入光线的多少，后者决定于胶片对光线的反应速度。 （一）光圈 （Aperture） 由若干金属薄片组成，安装在镜头内部，可均匀地自由开合，以调节镜头的相对口径，控制进光量。一般来说，相机采用光圈系数表示口径的大小。 光圈系数（f系数