第十一章动物实验技术预案.ppt

第十一章 动物实验技术 常用药物的最大给药量 人与实验动物之间药物剂量的换算 人与实验动物对同一药物的耐受性，动物比人大，即单位体重的用药量比人要大。 一般可按下列比例换算，每单位体重人的药量为1，则小鼠、大鼠为25-50，兔、豚鼠为15-20，狗、猫为5-10。 在新药药效研究中多以下列公式转换人及不同动物之间的药量： 人及不同实验动物之间药物量对应值 例如： 某药物在60kg体重的病人的剂量为21.0?g.kg-1 . d-1， 一只5kg的猴为53.6 ?g.kg-1 . d-1， 一只10kg重的犬为40.4 ?g.kg-1 . d-1 ， 一只20g的小鼠则为260.6 ?g.kg-1 . d-1 。 实验动物的血样采取 一、小、大鼠 剪尾采血 此法每鼠可采10次以上。 小鼠每次0.1ml。 大鼠每次0.4ml。 眼眶后静脉丛采血 小鼠每次0.2-0.3ml。 大鼠每次0.5ml。 股动脉采血 小鼠每次0.5ml。 大鼠每次2.0ml。 二、豚鼠 耳缘切口采血： 0.5ml。 心脏采血： 足背正中静脉采血： 三、家兔 耳缘静脉采血：5-10ml。 耳中动脉采血：15ml。 心脏采血：20-25ml。 四、犬 前肢皮下头静脉和后肢外侧小隐静脉采血：10-20ml。 颈静脉采血： 心脏采血： 常用实验动物的最大安全采血量与最小致死采血量 常用麻醉剂的用法及剂量 第五节 动物实验基本设计 一、设计原则 1.对照（antitheses）性原则： 是要求在实验中设立可与实验组比较，用于消除各种无关因素影响的对照组。 空白对照：不施加任何处理因素 实验条件对照： 不用处理因素，但施加某种与处理因素相同的实验条件。 标准对照 ： 用现有标准方法对照，如已知有效药物、公认标准疗法。 2．随机（random）化原则 动物实验一般采用完全随机分配或分层随机分配。 小动物实验一般先配对或配伍，然后“对”内或“伍”内进行随机分配 大动物多半先分层，然后在层内随机分配。 3．重复（repetition）的原则 指同一处理要设置多个样本例数降低试验误差。 应该在保证实验结果具有一定可靠性的条件下，确定最低的样本例数 一般估测的样本数 小动物(大鼠、小鼠、蛙、鱼)：每组10-30例,计量资料每组不少于10例, 计数资料每组不少于30例； 中等动物(豚鼠、家兔) 每组8-20例,计量资料每组不少于8例, 计数资料每组不少于20例； 大动物(犬、猫、猪、羊等) 每组6-20例,计量资料每组不少于6例, 计数资料每组不少于20例. 按统计学方法测算的样本数 n=2б2(tα+tβ)2/δ2 n为样本含量，б为标准差； tα取有显著性的t分布值，t0.05=1.96； tβ为无显著性的t分布值，1-β为实验检验能力，动物实验一般取1-β=0.80，t0.20=0.842； δ为处理组与对照组均值间的差异，可从预实验或文献资料库中获得。 举例： 给某种动物饲喂一种药物，预实验中每月体重增长比对照增加30±15g（均值±标准差）。设显著水平为95%，检验能力为80%，则正式实验所需样本含量n为： n=2?152?（1.96+0.842）2/302=3.93 即每组只需4只动物。 二、基本设计方法 单组比较设计 指在同一个体上观察实验处理前后某种观测指标的变化。 优点：能排除个体间生物差异。 缺点：不适用于在同一个体上多次进行实验和观察的情况。 配对比较设计 指实验前将动物按性别、体重或其它有关因素加以配对，以基本相同的两个动物为一对，配成若干对，然后将一对动物随机分配到两组中。 优点：减少两组实验误差及动物间的个体差异。 缺点：应考虑种属、品系、性别、年龄与体重、同父母、同胎次出生等因素对实验结果的影响。 举例：为研究VitE缺乏饲料对大鼠肝脏中VitA含量(u/mg)的影响，选取同性别(雌、雄各半)、同月龄(断乳1个月)、同体重(50g+2g)等正常大鼠配成10对，对每对中每只大鼠按随机数字表(或抽签)随机分配到给以正常饲料组和VitE缺乏饲料组，分饲条件相同的不同笼中，经1个月饲食后杀掉，按每对分别取肝脏，测得VitA含量(u/mg)如表。 完全随机化设计 将动物随机分配到处理组及对照组做实验观察。 优点：统计分析也比较简单，抗数据缺失能力较强。 缺点：对非实验因素缺乏有效控制 ，适用于实验