煤制乙二醇翻译..docVIP

乙二醇的应用，冷水和乙二醇对嗜冷菌中蛋白质的冲击与驯化 Michael S. Colucci , William E. Inniss 加拿大，安大略省，滑铁卢市，滑铁卢大学生物系， N2L 3G1。 摘要 嗜冷荧光假单胞菌分离，其利用乙二醇作为唯一碳源，在25℃和5℃下，在20和55天中分别有98％和96％去除效率。使用二维SDS(十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳)和计算扫描激光光密度的微生物对环境变化的响应的影响。在25℃至5℃的冷水冲击下，微生物引起的冷十休克蛋白。在5℃的条件下是不断增长的，合成了五冷驯化蛋白。乙二醇冲击下产生了14乙二醇休克蛋白。被发现有10乙二醇驯化的蛋白质。休克蛋白和驯化蛋白在冷休克与驯化和乙二醇休克与驯化之间的相似性可能暗示这些蛋白质在一个新的环境意义都震荡回升以及不断成长。 嗜冷微生物能够生长在相对宽的温度范围从0℃或更低，以大于20℃，并且通常为30℃。这一特性表明耐冷是在不同环境温度下生物体吸收性应用相当大的价值，如乙二醇，其中，例如，是相当大的环境关注用于飞机除冰时的生物修复。此外，耐冷已经表现出与生产冷休克蛋白（CSPS冷休克蛋白）[15，21]响应冷休克条件的能力。他们还生产冷驯化蛋白（CAPS），在其低温条件下这可能有助于稳定增长。 各种已进行了该报告的在高或低溶氧或者高盐度条件下的乙二醇的生物降解的研究[5，6，9，10，18]。然而，乙二醇生物降解在低温下由于单一品种很少受到关注。 在本研究中，乙二醇通过一个适冷假单胞菌利用荧光在5℃和25℃下进行测定。为了检测微生物在变化的环境条件的生理反应，从25℃至5℃的冷休克的效果还有乙二醇休克在二维聚丙烯酰胺凝胶电泳下进行了调查。该生产驯化蛋白在5℃或者1％的乙二醇的条件下不断增长也进行了检查。 材料和方法 增长与利用 该微生物在5℃的乙二醇溶液培养的环境中最初分离。微生物生长在一个基础盐培养基（1 LH2 O4.3克K 2 HPO43.4克KH2 PO4，2G（NH4）2 SO4，340mgMgCl2·6H2 O，1mgMnCl2·4H2 O，0.6毫克的FeSO4·7H2 O，26毫克氯化钙2·2H2 O，2毫克NaMoO4 ·2H 2 O，将pH调至7.0），补充有1％的乙烯乙二醇（1％EG-BSM）。生长测定分光光度法在650 纳米。所有生长研究在含有50毫升培养基的250毫升锥形瓶中以适当的温育温度在以150转/分的水浴摇床上进行培养。乙二醇的微生物利用分光光度法测量。[7] 冲击和驯化蛋白放射性标记 放射性标记，150微居里/毫升的L - [35 S]蛋氨酸加入到每个200微升样品，混合，并温育在适当的温度下进行1小时。然后将样品微量离心2分钟，收集上清液。冷休克和乙二醇冲击，细胞生长在25℃和1％葡萄糖的BSM中。冷休克是由转印单元25毫升至预冷的5℃烧瓶发起，然后在第1,4和10小时除去样品的放射性标记。对于乙二醇休克加入40ml细胞进行以10,000g离心10分钟。将沉淀物洗涤两次，然后在1％的EG-BSM（乙二醇溶液）重悬。样品在1,10和21小时在1,10和21小时放射性标记。所选择的时间是根据揭示了其中的蛋白质的最大数目被诱导的时间的时间进程研究。以确保其在乙二醇休克发生的诱导不是由于该过程的物理方面诱导的，类似的实验也，但进行了不同的是由葡萄糖代替了乙二醇。 冷驯化和乙二醇驯化。冷驯化和乙二醇驯化。对于冷驯化，1％葡萄糖BSM增长建立在5℃条件下。在对数中期的两个放射性标记的样本除去之前细胞至少通过12代的保持（OD65050.7）。对于乙二醇驯化，类似的过程，只是将细胞在25℃和1％的EG-BSM条件下生长。 细胞裂解和电泳条件 在细胞裂解过程和电泳条件基本上所概述Roberts和Inniss[21]。唯一的修改程序是在加入每凝胶200000的cpm。所有的SDS实验中，至少一式四份进行，并诱导被记为与各自对照相比的相对增加。 相对增加 冷休克蛋白 图1。从25℃到5℃的冷休克之后的冷休克蛋白的相对合成。在1小时中，4小时中，和10小时后，诱导的的的相对水平通过计算扫描激光光密度测定。 结果与讨论 该嗜冷荧光假单胞菌分离和研究，发现在5℃下利用乙二醇作为唯一碳源，在55天内正使用的乙二醇的96％以上。在25°C，在20天之内获得了超过98％的利用率。在25℃时显示出生长时间为11小时，与黄杆菌[4]的3.4 小时和同一个物种的假单胞菌[10]的16小时的生长时间相比较。 在自然环境中嗜冷微生物可能会