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第一节DNA是主要的遗传物质题库.ppt

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思维碰撞 噬菌体 肺炎双球菌的转化实验表明: 复习: 是遗传物质 DNA 不是遗传物质 而蛋白质等其他物质 这个实验结论足以让所有科学家信服吗? 由于艾弗里的实验中提取的DNA,纯度最高时也还有0.02%的蛋白质,因此,仍有人表示怀疑。 那么要怎样设计才能让人无可挑剔呢? 设法将DNA和蛋白质分开,然后单独、直接地观察它们的作用。 实验中最关键的设计思路 有没有比细菌更为简单的实验材料? 1952年,赫尔希和蔡斯以T2噬菌体为实验材料,利用放射性同位素标记的新技术,完成了另一个更具有说服力的实验. 大肠杆菌 一、噬菌体侵染细菌的实验 (1)实验材料: 60%是蛋白质 40%是DNA T2噬菌体和大肠杆菌 T2 噬菌体的特点 ① 是一种专门寄生在大肠杆菌体内的病毒 ② 头部和尾部的外壳是由蛋白质构成,头部内含有DNA ③在自身遗传物质的指导下进行繁殖,原料来自大肠杆菌 ④?子代噬菌体从宿主细胞裂解释放。 噬菌体 大肠杆菌 (2)噬菌体的增殖过程(侵染细菌的过程) 小结:噬菌体侵染细菌(增殖)的过程: 侵染别的细菌 注入 合成 吸附 组装 释放 吸附 注入 合成 组装 释放 (3)实验步骤: 1.标记细菌    2.标记噬菌体 3.噬菌体侵染细菌 4.搅拌离心  5.观察放射性的分布 蛋白质的组成元素: DNA的组成元素: C. H. O. N. C. H. O. N. P S 因为T2噬菌体中的P几乎都存在于DNA中,而S仅存在于蛋白质中,所以用32P标记DNA,用35S标记蛋白质。 思考②:标记噬菌体的DNA和蛋白质时,能标记C、H、O、N吗 ?为什么? 不能,因为C、H、O、N这些元素是DNA和蛋白质共有的。 标记方法:放射性同位素标记法 (标记35S) (标记32P) 标记方法:放射性同位素标记法 1.标记大肠杆菌 大肠杆菌 + 含35s的培养基 含 35s的大肠杆菌 大肠杆菌 + 含32p的培养基 含32p的大肠杆菌 2.标记T2噬菌体 T2噬菌体+含35s的大肠杆菌 含35sT2的噬菌体 T2噬菌体+含32p的大肠杆菌 含32pT2的噬菌体 如何标记噬菌体? 32P 35S 噬菌体 用含35S的培 养基培养细菌 含35S的 细 菌 含35S的细菌 噬菌体 + 用含32P的培 养基培养细菌 含32P的细菌 含32P的细菌 噬菌体 + 噬菌体 思考①:能不能用含35S和32P的培养基分别培养T2噬菌体,使T2噬菌体的蛋白质和DNA分别标记上35S和32P呢?为什么? 不能,T2因为噬菌体只能寄生。 不能同时标记在同一噬菌体上,因为放射性检测时只能检测到存在部位,不能确定是何种元素的放射性。 思考②:能不能将35S(标记蛋白质)和32P(标记DNA)同时标记在同一噬菌体上,为什么? 32P 35S 第1组 第2组 离心 离心 1、 第一组实验中为什么上清液的放射性很高,沉淀物的放射性很低? 噬菌体的蛋白质外壳没有进入大肠杆菌,离心后存在上清液中。 (1)用35S标记的噬菌体侵染大肠杆菌,上清液中有放射性很高的原因是什么? 疑难突破: 由于搅拌不充分,还有少量含35S的噬菌体吸附在细菌表面,随细菌离心到沉淀物中。 (2)用35S标记的噬菌体侵染大肠杆菌,沉淀物中有放射性的原因是什么? 疑难突破: 离心 离心 2、 第二组实验中为什么上清液的放射性低,沉淀物的放射性高? (3)用32P标记的噬菌体侵染大肠杆菌, 沉淀物中含放射性很高的原因是什么? 由于噬菌体的DNA进入大肠杆菌,离心后大肠杆菌存在沉淀物中。 ①保温时间过短,有一部分噬菌体还没有侵染到大肠杆菌细胞内; ②保温时间过长,噬菌体在大肠杆菌内增殖后使大肠杆菌裂解释放出来; (4)用32P标记的噬菌体侵染大肠杆菌, 上清液中含放射性的原因是什么? 两种情况经离心后32 P标记的噬菌体都分布 于上清液,也会使上清液中出现放射性。 蛋白质含35S 的噬菌体 +细菌 (未标记) 上清液 沉淀物 ①用35S标记的噬菌体去侵染未标记的大肠杆菌 ——检测到35S ——未检测到35S 子代噬菌体中 ——未检测到35S 说明①蛋白质外壳并没有进入到细菌内。 说明②蛋白质在亲子代之间具没有连续性。 (含蛋白质外壳) (被感染的细菌) 3.T2噬菌体侵染大肠杆菌 搅拌 离心 短时间保温 ②用32P标记的噬菌体去侵染未标记的大肠杆菌 DNA含32P 的噬菌体 +细菌 (未标记) —未检测到32P ——检测到32P 上清液(含蛋白质外壳) 沉淀物(被感染的细菌) 子代噬菌体中 ——检测到32P 说明②噬菌体的亲子代之间具有连续性的物质是DNA。

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