动物克隆技术题库.ppt

* 克隆的荧光小猪(左)和正常小猪(右) 克隆马及其“母亲兼姐姐” 卵供体绵羊 去核 去核卵母细胞 电击融合 乳腺上皮细胞核导入去核卵细胞 移植入一只绵羊输卵管中 再次植入合适绵羊体内 核供体克隆 核供体绵羊 乳腺组织 乳腺上皮细胞 进入G0期 取出发育良好胚胎 150天后出生小绵羊 克隆绵羊 Dolly 制作过程 基本条件： 克隆的条件 潜能：细胞具有的发育完整性。 具有包含物种完整基因组的细胞核的活细胞 能有效调控细胞核发育的细胞质物质 完成胚胎发育的必要的环境条件 一、动物细胞培养和克隆形成 （一）动物细胞、组织培养 1.动物 细胞 培养 从动物体取出一部分组织 机械消化或胰酶消化 分散成单个细胞 一定条件下培养 细胞生存、生长、分裂、 衰老、死亡；保持接触抑制 胰酶 处理 细胞 培养 一、动物细胞培养和克隆形成 （一）细胞系、细胞株 原代培养 传代培养 ………… 原代培养物 细胞系 原代培养物在首次 传代时就成为细胞系 可连 续培 养的 连续 细胞系 不能连续培养的 有限 细胞系 一、动物细胞培养和克隆形成 （一）细胞系、细胞株 细胞株： 通过一定的选择或纯化方法，从原代培养物或细胞系中获得的具有特殊性质的细胞，称为细胞株。 细胞株一般具有恒定的染色体组型、同工酶类型、 病毒敏感性和生化特性等。 连续细胞株 有限细胞株 细胞系：泛指可以传代的细胞； 细胞株: 具有特殊性质的细胞系 植物细胞培养基： 在人工合成的培养基中，包含植物生长和发育所需要的全部营养成分，包括矿质元素（分为大量元素、微量元素）、蔗糖、维生素、植物激素和有机添 加剂 动物细胞培养液： 动物细胞培养液通常含有葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清等。 与植物细胞培养基相比，动物细胞培养液的独特之处： （1） 液体培养基 （2） 其成分中有动物血清 （二）动物细胞全能性的表现程度 全能性大小比较： （全能性依次递减） 低等动物细胞高等动物细胞 （三）动物难以克隆的根本原因: 在分化过程中，体细胞内的基因选择性表达， 使得基因组中基因的活动很不完全，不能像 受精卵那样发挥细胞的全能性。 受精卵 早期胚胎细胞 多能干细胞 单能干细胞 高度分化的体细胞 （三）细胞核移植实验和动物的克隆繁殖 1.核移植： 利用一个细胞的细胞核（供体核）,来取代 另一细胞中的细胞核，形成一个重建的“合子” （重组细胞），使发育成一个新的个体。 胚胎克隆 —— 使用的供体核来自胚胎 体细胞克隆——使用的供体核来自体细胞 胚胎细胞核移植成功率远高于成体细胞。 （三）细胞核移植实验和动物的克隆繁殖 2.核移植程序： 卵细胞 Ａ母羊 Ｂ母羊 乳腺细胞 细胞质 细胞核 早期胚胎 移植入C母羊子宫； 妊娠，分娩 多莉羊 多莉羊的培育过程 重组细胞 （三）细胞核移植实验和动物的克隆繁殖 3.体细胞克隆羊的培育成功，证明了： 高度分化细胞经一定技术处理，也可回复到类似受精卵时期的功能。 在胚胎和个体发育中，细胞质具有调控细胞核（包括异源的细胞核）发育的作用。 * * *