动物细胞融合和单克隆抗体题库.ppt

2.2 动物细胞工程 安徽省淮南市第十六中学 潘荣 选修3 现代生物科技专题 专题2 细胞工程 安徽省远程教育优秀作品 教学目标 重点难点 问题探讨 教学过程 知识结构 教学反馈 课后习题 教学参考 2.2.2 动物细胞融合与单克隆抗体 教学目标 了解动物细胞融合的原理、过程和意义。 理解单克隆抗体制备的过程和应用 重点难点 1.教学重点： 单克隆抗体的制备和应用 2.教学难点： 单克隆抗体的制备过程 问题探讨 “番茄—马铃薯”（理想图） 通过长期的实验，科学家们采用体细胞杂交技术获得了“番茄—马铃薯”植株。 如果将奶牛的细胞与植物细胞杂交，得到绿色的小奶牛，那岂不是只要晒晒太阳就可以挤出牛奶吗？ 动物细胞也能融合吗？ 教学过程 一.动物细胞融合 1.动物融合的过程 请同学们阅读课本P52动物融合 动物细胞融合过程示意图 不同DNA的两个细胞 灭活的病毒 有丝分裂 两个完整的杂交细胞 灭活病毒诱导细胞融合的原理： 病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够与细胞膜上的糖蛋白发生作用，使细胞互相凝聚，细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合。 灭活是指用物理或化学手段使病毒或细菌失去感染能力，但并不破坏这些病原体的抗原结构。 思考题 1.植物体细胞杂交时首先应用什么方法去掉细胞壁？ 酶解法，如纤维素酶或果胶酶 2.动物细胞融合时需要进行去壁处理吗？为什么？ 无需，因为动物细胞无细胞壁 3.植物体细胞杂交诱导原生质体融合常用的方法有哪些？ 离心、电激等物理方法；PEG等化学方法 4.动物细胞融合能利用上述两类方法吗？还有其他方法吗？ 能 还可以利用灭活的病毒进行诱导 5.植物体细胞杂交应先进行原生质体的融合再进行组织培养形 成完整的杂种个体，动物细胞融合后能形成杂种动物个体吗？ 不能 7.你推测一下动物细胞融合有哪些方面的应用吗？ 思考题 利用动物细胞融合技术诱导形成杂交瘤细胞 8.在生产实际中杂交瘤细胞有怎样的应用？ 生产单克隆抗体 6.你能归纳出什么叫做动物细胞融合吗？ 主要用于制备 单克隆抗体 获得杂种植株 主要用途 物理、化学方法 （同左） 灭活的病毒 物理（离心、振动、电刺激） 化学（聚乙二醇） 诱导方法 使细胞分散后诱 导细胞融合 去除细胞壁后诱 导原生质体融合 细胞融合的方法 细胞膜的流动性 细胞膜的流动性、 植物细胞全能性 细胞融合的原理 动物细胞融合 植物体细胞杂交 比较项目 植物体细胞杂交与动物细胞融合的比较 2.动物细胞融合的概念 动物细胞融合也称细胞杂交，是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程，融合后形成的具有原来两个或多个细胞遗传信息的单核细胞称为杂交细胞。 提 问 ？ 1.抗体是由何种细胞产生的？ 效应B细胞（浆细胞）。 2.一个Ｂ淋巴细胞(浆细胞)能分泌多种抗体吗？ 每一个Ｂ淋巴细胞只分泌一种特异性抗体。 3.一种抗原侵入机体之后，引起机体免疫反应产生的抗体只有一种吗？ 动物在免疫反应过程中，体内产生的特异性抗体种类可多达百万种以上。 4. 简述获得抗体的传统途径？ 抗原 动物体 抗体 抗原不纯 抗体不纯 二、单克隆抗体 刺激 浆细胞 6.如何获得化学性质单一、特异性强的抗体？ 体外培养单个Ｂ淋巴细胞，提取分泌的抗体 7.体外培养淋巴细胞能无限增殖吗?怎样解决这个问题？ 5.这种方法获得的抗体有什么缺陷？ 产量低，纯度低，特异性差 1.设计方案： 一个B淋巴细胞－－只分泌一种特异性抗体 小鼠骨髓瘤细胞－－能够无限增殖 杂种细胞 二、单克隆抗体 2.制备过程： 免疫小鼠 培养骨髓瘤细胞 融合 骨髓瘤细胞 B淋巴细胞 注射特定抗原蛋白 选择培养基上培养 专一抗体检验阳性 专一抗体检验阳性 注射到小鼠体内 体外培养 单克隆抗体 克隆杂交细胞 分开不同杂交细胞，克隆专一抗体，检验阳性细胞 单克隆抗体制备过程示意图 多种杂交细胞 3.单克隆抗体的应用： ①在基础理论研究中具有重要意义 ②在疾病诊断、治疗和预防方面，具有 ③生物导弹 二、单克隆抗体 特异性强、灵敏度高 等优越性。 用抗人绒毛膜促性腺激素单克隆抗体做成的“早早孕诊断试剂盒”，灵敏度很高，在妊娠第8天就可以做出诊断，比原来的诊断方法提前了10天左右，可以避免孕妇在不知道妊娠的情况下因服用药物而对胎儿造成不利影响。该方法检测的准确率在90％以上。 知识结构 两个过程 动物细胞培养过程 单克隆抗体制备过程 三个“一” 一个诱导细胞融合的新