动物细胞融合题库.ppt

注意： 杂交瘤细胞有何特点？ * 2.2.2 动物细胞融合与单克隆抗体 回忆植物体细胞杂交过程： 植物细胞A 植物细胞B 原生质体A 原生质体B 原生质 体融合 杂种细胞 植物组织培养 杂种植株 去壁 纤维素酶、果胶酶 化学法 物理法 人工诱导 1.概念：动物细胞融合也称细胞杂交，是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。 一、动物细胞融合 融合后形成的具有原来两个或多个细胞遗传信息的单核细胞，称为杂交细胞。 2、动物细胞融合基本原理： 细胞膜的流动性 3、诱导方式 电激、振动、离心 聚乙二醇（PEG） 灭活的病毒 物理法： 化学法： 生物法： 4、过程 动物细胞A 动物细胞B 诱导融合 2个完整的杂交细胞AB 有丝分裂 （膜融合、 质融合、 核融合） 单核细胞 5、意义 打破生殖隔离，使远缘杂交成为可能； 重要用途：制备单克隆抗体。 形成杂种细胞 获得杂种植株 结果 物理、化学方法 （同左） 灭活的病毒 物理（离心、振荡、电刺激） 化学（聚乙二醇） 诱导方法 细胞膜的流动性 细胞膜的流动性、 植物细胞全能性 原 理 动物细胞融合 植物体细胞杂交 比较项目 融合前处理 用纤维素酶、 果胶酶去壁 用胰蛋白酶 使细胞分散 6、植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较 1.抗体是由何种细胞产生的？主要分布在什么地方？ B淋巴细胞受抗原刺激后（浆细胞），可以产生抗体。主要分布在血清中。 2. 简述获得抗体的传统途径？这种方法获得的抗体有什么缺陷？ 二、单克隆抗体 产量低，纯度低，特异性差 3.如何获得化学性质单一、特异性强的抗体？ 每一个B淋巴细胞只能产生一种抗体。体外培养单个Ｂ淋巴细胞，提取分泌的抗体。 4.体外培养B淋巴细胞能无限增殖吗?怎样解决这个问题？ 一个B淋巴细胞－－只分泌一种特异性抗体 小鼠骨髓瘤细胞－－能够无限增殖 杂种细胞 B淋巴细胞 注射特定抗原蛋白 骨髓瘤细胞 培养骨髓瘤细胞 融合 （只考虑两两融合）培养液中细胞有几种类型？融合细胞几种类型？ 骨髓瘤细胞---骨髓瘤细胞 B淋巴细胞--- B淋巴细胞 B淋巴细胞---骨髓瘤细胞 多种杂交细胞 在具有筛选作用的培养基上培养 专一抗体检验阳性 克隆上述杂交细胞 分开不同杂交细胞，克隆专一抗体， 检验阳性细胞 单克隆抗体 注射到小鼠体内 体外培养 第1次筛选目的：得到杂交瘤细胞（多种）。 第2次筛选目的：在杂交瘤细胞中筛选出能产生所需抗体的杂交瘤细胞。 特异性强，灵敏度高 5、过程 该细胞继承双亲细胞的遗传特性，既能产生专一抗体又能无限增殖。 特异性强，灵敏度高 单克隆抗体有何特点？ 6.单克隆抗体的应用 ①作为诊断试剂（最广泛的用途）：准确识别各种抗原物质，并与一定抗原特异性结合。 优点：准确、高效、简易、快速 ②用于 运载药物：制成“生物导弹” 治疗疾病：主要用于癌症治疗 注意：利用单克隆抗体制成的“生物导弹”,其选择性是由抗体决定的,与药物无关,药物的作用是杀死癌细胞。 两个过程 动物细胞融合过程 单克隆抗体制备过程 三个“一” 一个诱导细胞融合的新方法 一个新细胞 一个优势 课堂小结 －－灭活的病毒 －－杂交瘤细胞 －－单克隆抗体：特异性 强、灵敏度高 *