解剖自主实验修改..docVIP

解剖生理学自主实验 《影响神经冲动传导速度的因素》实验方案 学院： 生命科学学院__________________________ 班级： 2012级免费师范(2)班_______________________ 组别： 2012级免费师范（2）班2组____________________ 组长： 解星晨__________________________ _ 成员： 甘国东、杨基伟、刘露 时间： 2014年11月11日 ____ ______________ 影响神经冲动传导速度的因素 一、目的要求 1、观察蟾蜍或牛蛙坐骨神经干复合动作电位的基本波形，并了解其产生的基本原理。 2、学习测定蟾蜍或牛蛙离体神经干神经冲动传导速度的方法和原理 3、观察自来水、温度（37℃）、3%KCl、5%NaCl、2%普鲁卡因对蟾蜍或牛蛙离体坐骨神经冲动传导速度的影响。 二、基本原理 神经干在受到有效刺激后可以产生复合动作电位，标志着神经发生了兴奋。如果在离体神经干的一端施加刺激，从另一端引导传来的兴奋，可以记录到双相动作电位。如果在引导的两个电极之间将神经干麻醉或损坏，阻断兴奋的传导，这时记录到的动作电位就是单相动作电位。单个神经细胞的动作电位是以“全或无”方式发生的，而神经干复合动作电位的幅值在一定的刺激强度下是随刺激强度的增加而增大的。 如果在原理刺激点的不同距离处分别引导离体神经干动作电位，两引导点之间的距离为m，在两引导点分别引导出的动作电位的时差为s，即可按照公式v=m/s来计算兴奋的传导速度。 神经兴奋的发生和传导有赖于细胞膜上Na＋内流。其客观指标是神经兴奋时产生的动作电位。普鲁卡因等局麻醉药可阻滞Na离子内流，从而抵制神经冲动的发生与传导速度的减慢。 神经纤维的静息电位接近K离子的平衡电位，故细胞外液K离子浓度升高可使细胞膜内外浓度差减小，K离子平衡电位减小，膜发生去极化。在此基础上，由于Na离子通道受到抑制，神经干传导速度降低；当细胞外夜Na离子内流减弱，也可以使神经干传导速度减慢。 三、材料、器材与药品 1、材料：蟾蜍或牛蛙坐骨神经 2、器材：剪刀、镊子、毁髓针、玻璃分针、粗棉线、恒温箱、PC机、BL-420F生物信号采集处理系统、神经屏蔽盒、毫米刻度尺。 3、药品：Ringer’s液、3%KCl、5%NaCl、2%普鲁卡因 四、实验步骤 1、蟾蜍或牛蛙坐骨神经干的的标本制备 取蟾蜍或牛蛙1只，双毁髓后在尚难部用粗剪将脊柱剪短，撕下皮肤和内脏。将带有部分脊柱、后肢的标本用任氏液洗净，置于蛙解剖盘上。在神经出脊柱处，用粗棉线结扎一侧坐骨神经，并于结扎点与脊柱之间将神经剪断。然后轻轻提起结扎线，沿坐骨神经的走向，用组织剪将包绕坐骨神经的肌肉一同剪至膝关节，并在此将坐骨神经和肌肉剪断。如果蟾蜍或牛蛙较小，应该继续沿膝关节向下用上述方法把胫、腓神经及其周围组织与其他组织分离，至裸关节处剪断。将带有部分肌肉的坐骨神经放在盛有少量任氏液的培养皿中，一手用镊子夹住包绕神经的肌肉，另一只手提起结扎线轻轻一拉，神经与肌肉就可分离开来。然后用眼科剪剪掉较长的时间分支，用粗棉线结扎神经的外周端。如此，一条坐骨神经标本就制作完毕。 2、实验装置的连接 将神经屏蔽盒与信号采集处理系统连接，屏蔽盒的地线良好接触。 仪器的操作和实验参数的设置 (1)仪器的设定。 “采集窗口”要把通道2和通道4均设置上。引导电极使用两对，同时引导两对引导电极下的动作电位图形，两对引导电极之间的间隔距离尽量大一些。近刺激端的一对（R3和R4）输入生理信号采集系统的通道2，原理刺激端的一对（R5和R6）输入生理信号采集系统的通道4。 (2)测定两对引导电极的动作电位时差。 用鼠标点击“开始”，然后再点击“刺激”，这时，显示窗口的通道2就显示第一对引导电极引导出的动作电位图形，而通道4则显示第二对引导电极引导出的动作电位图形。调整好实验显示窗口动作电位的图形。由于第二队对引导电极距离刺激点更远，所以通道4中动作电位图形出现的比较靠后。用数遍点击“快捷工具栏”中的“观察”，拖动鼠标分别测出通道2和通道4两个动作电位的起始点，即测出两个动作电位的时间差（ms）。 （3）测量两对引导电极神经干的长度。 使用毫米刻度尺准确量出量对引导电极的距离，即为神经干的长度。 （4）按照公式V=S/t，计算出蟾蜍神经干的兴奋传导速度（m/s）。 实验处理： 将坐骨