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慢病毒载体介导绿色荧光蛋白基因在小鼠t淋巴细胞中的表达.docVIP

慢病毒载体介导绿色荧光蛋白基因在小鼠t淋巴细胞中的表达.doc

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慢病毒载体介导绿色荧光蛋白基因在小鼠淋巴细胞中的表达摘要本研究构建含绿色荧光蛋白基因的慢病毒载体三质粒系统并观察其在小鼠淋巴细胞中的表达情况应用亚克隆技术将多聚嘌呤通道元件泛醌启动子和绿色荧光蛋白基因连接至载体构建成载体之后应用磷酸钙沉淀法将慢病毒载体三质粒系统包括包装质粒转移质粒和包膜蛋白质粒共转染细胞小时后在荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白表达情况小时收集病毒上清并感染小鼠淋巴细胞在荧光显微镜下和应用流式细胞仪观察感染情况结果表明慢病毒载体的三质粒系统转染细胞小时后在荧光显微镜下观察到绿色荧光蛋

慢病毒载体介导绿色荧光蛋白基因在小鼠T淋巴细胞中的表达 【摘要】 本研究构建含绿色荧光蛋白基因的慢病毒载体三质粒系统,并观察其在小鼠T淋巴细胞中的表达情况。应用亚克隆技术将多聚嘌呤通道(PPT)元件、泛醌启动子(PUB)和绿色荧光蛋白基因(GFP)连接至pLO134载体,构建成pTK153载体。之后应用磷酸钙沉淀法将慢病毒载体三质粒系统(包括包装质粒△NRF、转移质粒pTK153和包膜蛋白质粒VSVG)共转染293T细胞,12小时后在荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白表达情况,72小时收集病毒上清并感染小

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