降血压肽ace抑制活性及降压功能研究.docVIP

降血压肽ACE抑制活性及降压功能研究 【摘要】 探讨了ACE（血管紧张素转换酶）抑制活性的检测方法, 并以贻贝为原料制取降血压肽，研究了不同酶解条件对其ACE抑制活性的影响，然后利用SHR饲喂试验检测其降血压活性。结果表明，降血压肽有较好的ACE抑制活性：其ACE抑制率可达88.08%。同时动物试验表明其降压效果明显, 在SHR饲喂后2～6h之内均有显著降压效果，平均降低为16～28mmHg。 【关键词】 降血压肽 血管紧张素转换酶抑制活性 降血压 【Abstract】 The testing method of ACE inhibitory activities was studied, and the antihypertensive peptides were derived from mytilus coruscus, then the ACE inhibitory activities were studied on different conditions; the antihypertensive effects were tested by SHR-feeding method. The results were as follows: the antihypertensive peptide had strong ACE inhibitory activities, the ACE inhibitory ratio was 88.08%, and the antihypertensive effect was obvious in 2 to 6 hours, the average reduced breadth is 16～28mmHg. 【Key words】 antihypertensive peptide；angiotensin-converting enzyme（ACE）inhibitory activities； antihypertensive effects 降血压肽实质是一种血管紧张素转换酶抑制肽，它通过抑制血管紧张素转换酶（ACE），阻碍有升高血压作用的血管紧张素Ⅱ的生成，同时抑制具有降血压作用的血管舒缓激肽的分解，从而使血压下降，此即降血压肽的作用机理［1］。 近年来国际学术界对降血压肽的研究较多，已报道有以牛奶、乳酪、大豆、鱼肉、蔬菜、小麦蛋白等食物为原料，经蛋白酶酶解产生了具有较好ACE抑制活性的降血压肽［2～7］。Eiji等［8］水解了12种食物蛋白进一步研究发现，从鱼肉、虾、蟹等水产动物蛋白中制得的降血压肽其降压活性优于其他食物性蛋白。我国在降血压肽领域的研究起步相对较晚，现有报道以大豆、蛇毒、老酒、茶叶为原料，对降血压肽的制备工艺和活性基团等方面进行了一定研究［9～13］；对于最适合用于降血压肽制备的水产动物蛋白的开发研究，则鲜有报道。 贻贝，又名海红、淡菜，近年来人工养殖取得重大成功，在我国东南沿海产量丰富。但由于加工手段和技术的落后，在收获季节产出的大量贻贝因得不到及时处理而造成极大浪费［14］。本研究以贻贝为原料，经酶解、活性修饰等方法制取降血压肽，然后利用SHR饲喂试验检测其降血压活性，并分析了其相对分子质量分布和氨基酸组成，以期为贻贝酶解降血压肽的开发提供理论探索。 1 材料与方法 1.1 材料与设备 贻贝：市售。ACE标准样品：Sigma试剂。　　复合生物酶P1 （本项目组自行配制），其组分均购自上海生物化学试剂公司。降血压肽制备所需其他试剂，均为生化纯，上海生物化学试剂公司提供。降压功能试验用动物：SHR（自发性高血压大鼠），上海高血压研究所提供。仪器设备：HPLC（Waters 600高效液相色谱仪），大鼠血压仪（RBP-1B）及常用试验仪器若干。 1.2 实验步骤 1.2.1 ACE活性抑制检测方法研究 酶解降血压肽对ACE的抑制活性分析原理为：ACE与HHL（Hip-His-Leu）作用会生成Hippuric Acid，当HHL的量一定时，Hippuric Acid的生成量与ACE的活性呈线性关系，而由于酶解降血压肽的作用，会抑制ACE的活性，从而使反应生成的Hippuric Acid量减少，通过检测生成的Hippuric Acid的含量，对比ACE的活性，即可分析出酶解降血压肽的抑制活性。 1.2.2 降血压肽的制备 根据本项目组前期研究经验和国际新近研究成果，结合有关蛋白酶酶解的作用特点，选取复合蛋白酶P1，在不同酶解条件下对贻贝蛋白进行酶解，采取Uniform Design（均匀设计）方案［15］，研究不同酶量、酶解时间、酶解温度、pH等四