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细胞生物学..docx

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细胞生物学.

细胞生物学第一章细胞学及细胞学发展简史细胞生物学是研究细胞基本生命活动规律的科学,它从不同层次上研究细胞结构与功能,细胞增殖、分化、衰老与凋亡,细胞信号转导,细胞基因表达与调控,细胞起源与进化等。是生命科学四大基础学科之一。细胞生物学(Cell Biology)应用现代物理学与化学的技术成就和分子生物学的概念与方法,将细胞作为生命活动的基本单位,探索生命活动规律的学科,其核心问题是将遗传与发育在细胞水平上结合起来。细胞学(Cytology):研究细胞结构和功能及其生活史的学科。细胞发展简史 一、细胞的发现(细胞学启蒙阶段,1665~1835) 二、细胞学说的创立和细胞学的形成(细胞学奠基阶段,1835~1875) 三、细胞学的经典时期(1875~1900)四、实验细胞学时期(1900~1953) 五、细胞生物学阶段(1953~Now)第二章支原体与病毒的基本知识 病毒(virus)——核酸分子(DNA或RNA)与蛋白质构成的核酸-蛋白质复合体; 根据病毒的核酸类型可以将其分为两大类: DNA病毒与RNA病毒 病毒的多样性类病毒(viroid)——仅由感染性的RNA构成;朊病毒(prion) ——仅由感染性的蛋白质亚基构成;支原体基本知识支原体——最小最简单的细胞(原核细胞)原核生物与真核生物的比较原核细胞与真核细胞基本特征的比较特 征原核细胞真核细胞细胞膜核膜染色体核仁线粒体内质网高尔基体溶酶体核糖体光合作用结构核外DNA细胞壁细胞骨架细胞增殖方式有(多功能性)无由一个环状DNA分子构成单个染色体,DNA不与或很少与蛋白质结合无无无无无70S(50S与30S亚单位)蓝藻含有叶绿素a的膜层结构,细菌具有菌色素细菌具有裸露的质粒DNA主要成分是氨基糖与壁酸无无丝分裂(直接分裂) 有有2个染色体以上,染色体由线状DNA与蛋白质组成有有有有有80S(60S与40S亚单位)植物叶绿体具有叶绿素a与b线粒体DNA,叶绿体DNA动物细胞无细胞壁,植物细胞壁的主要成分为纤维素与果胶有以有丝分裂(间接分裂)为主2、原核细胞与真核细胞的遗传结构装置、基因表达及其调控比较特征原核细胞真核细胞DNA量(信息量)DNA分子数DNA分子结构基因组数基因数大量“多余”的“重复”的DNA序列基因中插入内含子DNA与组蛋白结合DNA与组蛋白以核小体及各级高级结构构成染色质与染色体DNA复制的明显周期性基因表达的调控转录与翻译的时空关系转录后与翻译后大分子的加工与修饰细胞复制与分裂(DNA传递与分配)少1环状1n几千——不与或与少量类组蛋白结合——主要以操纵子方式转录与翻译同时同地进行—,无丝分裂多2个以上线状2n,多n大于几万,十万十十与5种组蛋白结合十十复杂性,多层次性核内转录,细胞质内翻译严格的阶段性与区域性十,有丝分裂,减数分裂古核细胞特点(1)细胞壁成分与细菌有别,并非由含壁酸的肽聚糖构成,因此抑制肽聚糖前体合成的环丝氨酸,抑制肽聚糖合成的青霉素与万古霉素等对古细菌与真核细胞无作用。(2)DNA与基因结构:古细菌DNA中有重复序列的存在。多数古核细胞的基因组中存在内含子。(3)有类核小体结构:古细菌具有组蛋白,而且能与DNA构建成类似核小体结构。(4)核糖体与细菌有别:多数古细菌类的核糖体较真细菌有增大趋势,含有60种以上蛋白,介于真核细胞(70~84)与真细菌(55)之间。作用于真细菌核糖体蛋白质合成的抗生素同样对古细菌无效。(5)5S rRNA:根据对5S rRNA的分子进化分析,认为古细菌与真核生物同属一类,而真细菌却与之差距甚远。5S rRNA二级结构的研究也说明很多古细菌与真核生物相似。 除上述各点外,根据RNA聚合酶分析,氨基酰tRNA合成酶的作用,起始氨基酰tRNA 与肽链延长因子等分析,也提供了类似的依据,说明古细菌与真核生物在进化上的关系较真细菌类更为密切。第三章电镜的组成激光扫描共焦显微镜Laser Scanning Confocal Microscopy原理:物镜和聚光镜共焦点应用:排除焦平面以外光的干扰,增强图像反差和提高分辨率(比普通荧光显微镜提高了1.4—1.7倍),可重构样品的三维结构。相差显微镜:将光程差或相位差转换成振幅差,可用于观察活细胞。微分干涉显微镜:偏振光经合成后,使样品中厚度上的微小区别转化成明暗区别,增加了样品反差且具有立体感。适于研究活细胞中较大的细胞器。录像增差显微镜技术:计算机辅助的DIC显微镜。可在高分辨率下研究活细胞中的颗粒及细胞器的运动。特异蛋白抗原的定位与定性免疫荧光技术:快速、灵敏、有特异性,但不足之处是其分辨率有限(图)蛋白电泳(SDS)与免疫印迹反应(Western-Blot)免疫电镜技术:免疫铁蛋白技术免疫酶标技术免疫胶体金技术 (Immune?colloidal?gold?tec

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