生技生物化学大实验期末考试复习题及答案(浙中大).doc

1、生物化学的实验技术有哪些? 3、什么是离心力? 什么是相对离心力? 各用什么表示? 4、制备性离心机可分为几类,叙述每类的特点？ 5、转头可分为几类,每类的特点是什么? 6、离心管可分为几类,每类的优缺点是什么? 7、何谓差速沉降离心法, 优缺点(特点是)是什么?适用于分离哪些物质的离心? 8、差速区带离心法, 优缺点(特点是)是什么?适用于分离哪些物质的离心? 9、等密度区带离心法, 优缺点(特点是)是什么?适用于分离哪些物质的离心? 10、离心操作的注意事项有那些? 11、层析的概念 12、层析的分类及其分离原理 13、凝胶层析 14、凝胶层析常用的凝胶及其商品名 15、保留值、分离度、柱效、理论塔板等效高度的概念 16、层析峰区域宽度的描述方式 17、如何提高柱效 18、影响电泳的主要因素有哪些？ 20、什么是聚丙烯酰胺凝胶电泳 ？ 21、聚丙烯酰胺凝胶聚合时自由基的引发有哪两种方法？ 22、不连续凝胶电泳的分离原理。 23、请说出常用蛋白质染色的几种方法 。 24、请说出常用脂蛋白染色方法。 25、SDS在SDS中的作用。 26、请叙述一下血浆低密度脂蛋白LDL的分离纯化鉴定过程，并列出在此过程中应用了哪些生化实验技术 27、蛋白质含量测定方法有哪些，简述其原理 28、双向免疫扩散的原理及应用 29、离心技术中用于调节溶液密度梯度的材料有哪些? 30、血浆中脂蛋白按密度可分为哪四种？ 31、总论部分： 1.实验报告包括 、 、 、 、 、 、 、 、 。 2. 实验记录应做到： 、 、 。 3. 论文需要翻译成英文的部分有： 、 、 、 。论文的正文一般由以下部分组成： 、 、 、 、 。 4. 蛋白质提纯的总目标是 、 、 。 1.如何增长自己的科研见识？ 2. 科研习惯应该如何养成？ 复习参考资料： 1、 ①离心技术 ②层析技术 ③电泳技术 ④免疫化学技术 ⑤分光光度技术 ⑥高效液相技术 3、 1 ）离心力(centrifugal force，Fc) 离心作用是根据在一定角度速度下作圆周运动的任何物体都受到一个向外的离心力进行的。离心力(Fc)的大小等于离心加速度ω2X与颗粒质量m的乘积。 2 ）相对离心力(relative centrifugal force，RCF)就是实际离心场转化为重力加速度的倍数。 4、 制备性离心机可分为三类： ⑴ 普通离心机：最大转速6000 rpm左右，最大相对离心力近6000×g，用于收集易沉降的大颗粒物质，如红血球、酵母细胞等。 ⑵ 高速冷冻离心机：最大转速为20000～25000rpm（r/min），最大相对离心力为89000×g，用于微生物菌体、细胞碎片、大细胞器、硫铵沉淀和免疫沉淀物等的分离纯化工作。 ⑶ 超速离心机：转速可达50000～80000 rpm，相对离心力最大可达510000×g，它能使亚细胞器得到分级分离，还可以分离病毒、核酸、蛋白质和多糖等。 5、转头： ⑴ 角式转头： ⑵ 荡平式转头： ⑷ 垂直转头： 6、离心管主要用塑料和不锈钢制成，塑料离心管常用材料有聚乙烯（PE），聚碳酸酯（PC），聚丙烯（PP）等，其中PP管性能较好。塑料离心管的优点是透明（或半透明），硬度小，可用穿刺法取出梯度。缺点是易变形，抗有机溶剂腐蚀性差，使用寿命短。 不锈钢管强度大，不变形，能抗热，抗冻，抗化学腐蚀。但用时也应避免接触强腐蚀性的化学药品，如强酸、强碱等。 7、差速离心法 利用不同的粒子在离心力场中沉降的差别，在同一离心条件下，沉降速度不同，通过不断增加相对离心力，使一个非均匀混合液内的大小、形状不同的粒子分部沉淀。 8、速率区带离心法 速率区带离心法是在离心前于离心管内先装入密度梯度介质(如蔗糖、甘油、KBr、CsCl等)，待分离的样品铺在梯度液的顶部、离心管底