高考生物大一轮复习规范训练：单元检测卷（十）Word版含解析.docVIP

单元检测卷(十)(单独成册) (时间：45分钟　满分：100分) 1．(12分)(2015·高考福建卷)GDNF是一种神经营养因子，对损伤的神经细胞具有营养和保护作用。研究人员构建了含GDNF基因的表达载体(如图1所示)，并导入到大鼠神经干细胞中，用于干细胞基因治疗的研究。请回答： (1)在分离和培养大鼠神经干细胞的过程中，使用胰蛋白酶的目的是__________。 (2)构建含GDNF基因的表达载体时，需选择图1中的__________限制酶进行酶切。 (3)经酶切后的载体和GDNF基因进行连接，连接产物经筛选得到的载体主要有3种：单个载体自连、GDNF基因与载体正向连接、GDNF基因与载体反向连接(如图1所示)。为鉴定这3种连接方式，选择Hpa Ⅰ酶和BamH Ⅰ酶对筛选得到的载体进行双酶切，并对酶切后的DNA片段进行电泳分析，结果如图2所示。图中第__________泳道显示所鉴定的载体是正向连接的。 (4)将正向连接的表达载体导入神经干细胞后，为了检测GDNF基因是否成功表达，可用相应的__________与提取的蛋白质杂交。当培养的神经干细胞达到一定密度时，需进行____________________________培养以得到更多数量的细胞，用于神经干细胞移植治疗实验。 解析：(1)在动物细胞培养中，胰蛋白酶的作用是使细胞分散开。(2)由图可知，在GDNF基因两侧各有一个Xho Ⅰ酶切位点，在载体上有一个Xho Ⅰ酶切位点，使用该酶既可以将GDNF基因切割下来，又可以将其插入到载体中。(3)用HpaⅠ酶和BamHⅠ酶对3种载体进行双酶切，然后对得到的DNA分子片段进行电泳分析。对于载体自连的DNA分子来说，只有HpaⅠ酶切位点，切割后只有一种片段，长度为6 000 bp；对于正向连接的载体来说，切割后产生两种片段6 000 bp和700(600＋100)bp；对于反向连接的载体来说，切割后产生两种片段6 500 bp和200(100＋100)bp。所以第②泳道显示所鉴定的载体是正向连接的。(4)鉴定目的基因是否成功表达，可用抗原—抗体杂交法。用相应的抗体与提取的蛋白质杂交，若有杂交带，说明目的基因成功表达。当培养的细胞达到一定数量时，需进行传代培养以获得更多数量的细胞。 答案：(1)使细胞分散开　(2)XhoⅠ　(3)②　(4)抗体　传代 2．(14分)(2015·高考四川卷)将苏云金杆菌Bt蛋白的基因导入棉花细胞中，可获得抗棉铃虫的转基因棉，其过程如下图所示(注：农杆菌中Ti质粒上只有T-DNA片段能转移到植物细胞中)。 (1)过程①需用同种__________酶对含Bt基因的DNA和Ti质粒进行酶切。为将过程②获得的含重组质粒的农杆菌筛选出来，应使用__________培养基。 (2)过程③中将棉花细胞与农杆菌混合后共同培养，旨在让__________进入棉花细胞；除尽农杆菌后，还须转接到含卡那霉素的培养基上继续培养，目的是__________。 (3)若过程④仅获得大量的根，则应在培养基中增加__________以获得芽；部分接种在无激素培养基上的芽也能长根，原因是__________。 (4)检验转基因棉的抗虫性状，常用方法是__________。种植转基因抗虫棉能减少__________的使用，以减轻环境污染。 解析：(1)切割目的基因和载体应使用同种限制性核酸内切酶，筛选细菌应使用选择培养基。(2)农杆菌转化法的原理是农杆菌感染植物时，Ti质粒上的T-DNA片段能够转移并整合到植物细胞的染色体DNA上。因为T-DNA上具有卡那霉素抗性基因，所以可用含卡那霉素的培养基筛选出获得T-DNA片段的植物细胞。(3)植物组织培养过程中，可加入激素调节植物细胞的脱分化和再分化。生长素用量比细胞分裂素用量，比值高时，有利于根的分化、抑制芽的形成；比值低时，有利于芽的分化、抑制根的形成。幼嫩的芽顶端可以产生生长素并向基部运输，促进根的分化，故芽在无激素的培养基中也可以生根。(4)在个体水平上检测抗虫棉时可在抗虫棉上投放害虫来判断其是否具有抗虫的性状；抗虫棉因具有抗虫性状，故可减少农药的使用，以减轻环境污染。 答案：(1)限制性核酸内切　选择　(2)T-DNA　筛选获得T-DNA片段的植物细胞　(3)细胞分裂素浓度　芽顶端合成的生长素向基部运输，促进根的分化　(4)投放棉铃虫　农药 3．(16分)(2015·高考山东卷)治疗性克隆对解决供体器官缺乏和器官移植后免疫排斥反应具有重要意义。流程如下： (1)过程①采用的是细胞工程中的________技术，过程②采用的是胚胎工程中的________技术。 (2)体细胞进行体外培养时，所需气体主要有O2和CO2，其中CO2的作用是维持培养液(基)的________。