(黄芩总黄酮的提纯和大孔吸附树脂分离纯化.docVIP

综合实验报告 课 题 黄芩总黄酮的提取和 大孔吸附树脂分离纯化 姓名 xxx 指导老师 xxx 专业 制药工程 班级 xxxx班 学 号 xxxxxxxxx 日期 2014.12.07 一、目的要求 1、了解大孔吸附树脂的性能和分离纯化原理； 2、学习用大孔吸附树脂分离纯化中药有效成分的工艺过程及工艺参数优化方法。 实验原理 黄芩是中国药典收录的传统中药，现代药理研究证明黄芩具有的抗氧化、抗炎、抗病毒、抗肿瘤及改善心血管功能等作用，与其含有的黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素等黄酮类成分密切相关。 大孔吸附树脂是一种不含交换基团的具有大孔立体网状结构的高分子吸附剂，具有较大的比表面积，主要按极性强弱分为极性、弱极性和非极性三种类型，可以有效吸附具有不同化学性质的各种类型化合物，具有理化性质稳定，吸附容量大，吸附速度快，选择性好，再生处理简单，机械强度高等优点。 大孔吸附树脂近年来在药学领域中应用日益广泛，成为分离中药有效成分的一种有效方法。中药提取分离是中成药生产过程中最关键的环节，也是目前制约提高中药质量的关键问题，水提醇沉除杂等老的中药提取工艺及设备基本沿用至今，没有明显的改革和突破，致使我国的中药制药技术滞后于国际制药工业水平。与传统的除杂方法方法和工艺相比，采用大孔吸附树脂技术有以下3个主要优点： （1）经大孔吸附树脂纯化后，有效成分高度浓缩，杂质大大减少，能缩小剂量，提高中药内在质量和制剂水平。 （2）能有效除去水提液中大量的糖类、无机盐、黏液质等吸湿成分，减少产品的吸湿性，增强产品的稳定性，有利于多种中药剂型的生产。 （3）设备简单，免去了静置沉淀、浓缩等耗时的工序，缩短生产周期，降低成本。 本实验采用水煎煮法提取黄芩总黄酮，用AB-8大孔吸附树脂（弱极性）进行分离纯化，对分离纯化工艺进行研究，制备黄芩总黄酮。 三、实验器材 1、 仪器与设备 回流冷凝装置（包括500mL圆底烧瓶，冷凝管，加热设备、铁架台），控温水浴埚，756紫外可见分光光度计，玻璃层析柱（有活塞有砂芯），20mm×500mm，20mL 具塞刻度试管及试管架，1000mL烧杯，250mL烧杯，250mL量筒。 2、 试剂和药品 黄芩药材（粉碎粒度为10目）500g，黄芩苷对照品，95%乙醇，AB-8大孔吸附树脂。 四、实验步骤 1、黄芩总黄酮的提取：称取10g 黄芩饮片，加10倍量水，预先浸泡30分钟（呈）呈 实验共称取了g黄芩饮片nm处测定吸光度记录如下表溶解并至mL，再取0.04mL用70%的乙醇定容至20mL，以70%乙醇作为对照品测定吸光度，nm处测定吸光度记录如下表 表1 黄酮含量测定的相关数据7.00 0.294 样品测定132 精密称nm处测定吸光度记录如下表 表2 标准曲线的相关数据L 质量浓度/μg/mL 波长λ/nm 吸光度A 0.1 3.4 278.00 0.169 0.2 6.8 277.80 0.337 0.3 10.2 277.80 0.488 0.4 13.6 277.80 0.699 0.5 17.0 277.60 0.856 2、数据处理 通过以上表格数据绘制质量浓度与吸光度的线性回归方程如下： 得到线性回归方程为y=0.0511x－0.0110， 代入y=0.294，得到x=5.97，即黄芩总黄酮粗品质量浓度为11.94g/mL。 代入y=0.132，得到x=2.80 则在精制后的黄芩总黄酮的含量=2.80×20×250/0.04=350000μg=0.35g。 实验结果分析 由以上数据处理可知，黄芩总黄酮的粗品质量浓度为11.94μg/mL，精制后得到的黄芩总黄酮的质量为0.35g，产率远远低于未经浸泡开始煎煮了，未能将溶剂充分渗透进细胞，了提取率；：： 5