菠菜籽中脂肪酸成分的气相色谱-质谱分析.ppt

菠菜籽中脂肪酸成分的气相色谱-质谱分析 化学与生命科学学院 摘要 本试验以菠菜籽为原料，采用索氏提取法对菠菜籽中的脂肪酸成分进行了提取。用KOH/CH3OH酯交换法进行甲酯化脂肪酸，利用气相色谱-质谱法对样品中的组成和含量进行了检测。实验结果表明：菠菜籽中含有6种脂肪酸，其中亚油酸含量为85.30％，11-二十碳烯酸甲酯含量为1.08%，反式-9,12-十八碳二烯酸为1.28%，十五烷酸甲酯的含量约为10.99%，十八烷酸甲酯为0.72%，1-环己烷基乙醇含量为1.08%。其中饱和脂肪酸的相对含量为12.34％，不饱和脂肪酸的相对含量大约为 87.66％。 关键词：菠菜籽；脂肪酸；分离鉴定；气相色谱-质谱联用仪；索氏提取法 整体结构 1前言 2 试验材料与方法 3分离鉴定 4 结果与讨论 5 致 谢 1 前言 脂肪酸结构 脂肪酸是羧基（-COOH)与脂肪烃基(开链烃)连接而成的一元羧酸。它可以被看作烃的羧酸衍生物(甲酸除外)，通式是R-COON,R代表烃基。脂肪酸按其烃基结构的不同可分为两大类:一类是饱和脂肪酸，因其室温下呈固态，又称固体脂肪酸，如硬脂酸、棕榈酸等;另一类是不饱和脂肪酸，因其室温下呈液态，又称液体脂肪酸[2,3]，如油酸、亚油酸、亚麻酸等。 脂肪酸的分类 脂肪酸分为饱和脂肪酸和不饱和脂肪酸，其中饱和脂肪酸分为短链饱和脂肪酸和中链饱和脂肪酸；不饱和脂肪酸可分为单不饱和脂肪酸（MU-FA）和多不饱和脂肪酸(PUFA)。 脂肪酸的作用 [1]多不饱和脂肪酸与心血管系统疾病 [2]多不饱和脂肪酸与生长发育 [3]多不饱和脂肪酸与抗癌 [4]多不饱和脂肪酸与免疫调节 [5]多不饱和脂肪酸与肥胖 [6]多不饱和脂肪酸与抗氧化 气相色谱-质谱原理 使混合物中各组分在两相间进行分配，其中一相是固定不动的，称为固定相。令一相是携带混合物流过此固定相的流体，称为流动相。当流动相中所含混合物经过固定相时，就会与固定相发生作用。各组分在性质和结构上有存在差异，与固定相发生作用的大小、强弱也有差异。因此在同一推动力作用下，不同组分在固定相中的滞留时间有长有短，从而按照先后不同的次序从固定相中流出。这种借在两相间分配原理而使混合物中各组分分离的技术，称为色谱法。 2 试验材料与方法 原料与试剂 菠菜种子:鞍山农贸市场 试剂：无水乙醇、石油醚、甲醇、氢氧化钾、浓硫酸、正己烷、三氯甲烷、碘化钾、冰乙酸。 仪器设备 电热恒温鼓风干燥箱（南京实验仪器厂）、华西高速中药粉碎机（浙江省永康溪岸五金药具厂）、旋转蒸发仪（上海亚荣生化仪器厂）、索式提取器（沈阳市卫工玻璃计器厂）、离心机(上海安亭科学仪器厂)、气相色谱-质谱联用仪(美国惠普公司)。 菠菜籽粉碎处理 试验流程图 索氏提取器提取 KOH-CH3OH甲酯化 气相色谱-质谱分析 数据处理与记录 脂肪酸的甲酯化（FAME）的制备 准确称取油脂0.3～0.4g，加入1mol/L的氢氧化钾-甲醇溶液3mL，60℃水浴30min(至油滴完全消失)，冷却后加入40mL浓硫酸-甲醇(1:7，V/V)溶液，放入恒温振荡摇床中38℃、130r/min酯化12h，用正已烷萃取2次，合并萃取液，用饱和Nacl溶液洗涤多次，无水Na2SO4干燥，离心分层，取上清液FAME备用。 脂肪酸甲酯化气相色谱条件： 色谱柱：HP-525m×0.20mm×0.33?m,弹性石英毛细管柱；进样口温度230℃；程序升温100℃→280℃（保持10min）升温速率为10℃/min.；分流比100：1。进样量0.4?L，载气流量1mL/min。 脂肪酸甲酯化质谱条件： 离子源为电子轰击源；离子源温度为230℃；电离电压为70eV；电子倍增器电压为2012V；发射电流为34.6?A；接口温度为230℃；质量范围为m/z 20-500。 鉴定与分析 按上述步骤得出菠菜籽脂肪油的GC-MS总离子流色谱图（图1）所示 4.00 6.00 8.00 10.00 12.00 14.00 16.00 18.00 20.00 22.00 24.00 26.00 5000000 1e+07 1.5e+07 2e+07 2.5e+07 3e+07 3.5e+07 4e+07 4.5e+07 5e+07 5.5e+07 6e+07