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培养基配方
一、R2A/R3A培养基
配方g/L): R2A R3A酵母粉? ?? ?? ?? ???0.5 g 1.0 g胰蛋白胨? ?? ?? ?? ?0.5 g 1.0 g酪蛋白氨基酸(casamino acid)? ?? ?? ?? ? ? 0.5 g 1.0 g葡萄糖? ?? ?? ?? ???0.5 g 1.0 g可溶性淀粉? ?? ?? ?? ?? ? 0.5 g 1.0 g磷酸氢二钾? ?? ?? ? 0.3 g 0.6 g七水硫酸镁? ?? ?? ?? ???0.05 g 0.1g丙酮酸钠? ?? ?? ?? ?0.3 g 0.5g琼脂? ?? ?? ?? ?? ? 15.0 g 15.0 g
用磷酸氢二钾或磷酸二氢钾调pH到7.2后,加蒸馏水,搅拌溶解,121℃灭菌15。
特点
R2A培养基用于水的菌落计数,它可以修复被氯气损伤的细菌,支持耐受氯气的微生物的生长。培养要求,低温(20-30℃)长时间培养(5-7天)这样得到的菌落数比常规菌落总数检测的菌落数更符合实际
R3A培养基主要用于菌株的生化特征描述和鉴定。
参考文献:Reasoner DJ, Geldreich EE. A new medium for the enumeration and subculture of bacteria from potable water. Appl Environ Microbiol. 1985,49(1):1-7.
二、VL55培养基Sait M et al,2002)(土壤筛菌)
配方(g/L) 1× 2×
2-(N-吗啉基)乙磺酸 1.95 g 3.9 g
MgSO4 0.024 g(0.2mM) 0.048 g(0.4mM)
CaCl2 0.033294 g(0.3mM) 0.066588 g(0.6mM)
(NH4)2HPO4 0.02 g(0.2mM) 0.0 g(0.4mM)
亚硒酸盐/钨酸盐溶液 1mL 2mL
微量溶液SL10 1mL 2mL
Sait M等取2×的培养基121℃灭菌15min后,冷却至56℃,加入10mL5%(w/v)的木聚糖溶液,2mL的维生素溶液1,6mL的维生素溶液2。
当量3%洗过的琼脂121℃灭菌15min后,冷却至56℃,与前面培养基混匀后倒平板(Widdel F et al.,1992)。
备注:
亚硒酸盐/钨酸盐溶液g/L):NaOH 0.5 g,Na2SeO3·5H20 3mg,Na2WO4·2H20 4mg,dd H20 1L,溶解混匀,过滤除菌,4℃备用。(Tschech and Pfennig, 1984)
微量溶液SLg/L):25%HCl 10mL,FeCl2·4H2O 1.5g,CoCl2·6H2O 0.19g,MnCl4·4H2O 0.1g,ZnCl2 0.07g,H3BO3 0.062g,Na2MoO4·2H2O 0.036g,NiCl2·6H2O 0.024g,CuCl2·2H2O 0.017g,dd H20 1L,溶解混匀,过滤除菌,4℃备用。(Widdel F et al.,1981)
微量溶液SL10g/L):25%HCl 10mL,FeCl2·4H2O 1.5g,CoCl2·6H2O 0.19g,MnCl4·4H2O 0.1g,ZnCl2 0.07g,H3BO3 0.006g,Na2MoO4·2H2O 0.036g,NiCl2·6H2O 0.024g,Cu
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