2015-2016高中生物专题5课题1DNA的粗提取与鉴定练习新人教版选修1讲解.doc

课题1　DNA的粗提取与鉴定 一、DNA的粗提取和鉴定 1．DNA的粗提取(1)基本思路：利用DNA与RNA、蛋白质和脂质等在物理和化学性质方面的差异提取DNA去除其他成分。(2)方法和原理：和蛋白质等其他成分在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同利用这一特点选择适当的盐浓度就能使DNA充分溶解而使杂质沉淀或者相反以达到分离目的。不溶于酒精但是某些蛋白质则可溶于其中。蛋白酶能水解DNA没有影响。大多数蛋白质不能忍受60～80_℃的高温而发生变性而DNA在80_℃以上才会变性。洗涤剂能瓦解细胞膜但对DNA无影响。的鉴定在沸水浴的条件下遇二苯胺会被染成蓝色。选取实验材料选用DNA含量较高的生物组织成功的可能性更大。破碎细胞获取含DNA的滤液动物细胞的破碎比较容易例如在鸡血细胞液中加入一定量的蒸馏水同时用玻璃棒搅拌过滤后收集滤液即可。如果是植物细胞需要先用洗涤溶解细胞膜。去除滤液中杂质(1)方案一：通过控制NaCl溶液的浓度去除杂质。(2)方案二：直接向滤液中加入嫩肉粉反应～15 min嫩肉粉中的木瓜蛋白酶能够分解蛋白质。(3)方案三：将滤液放在60～75_℃的恒温水浴箱中保温10～15 min注意严格控制温度范围使蛋白质沉淀析出而DNA分子还未变性可以将DNA与蛋白质分离。的进一步提纯利用DNA不溶于冷却的4.95%酒精这一原理可从滤液中析出较纯净的DNA此时DNA的状态为白色丝状物。的析出与鉴定(1)DNA的析出：DNA的析出用的是与滤液体积相等的、冷却的酒精溶液。(2)DNA鉴定：鉴定DNA时在试管中先加入物质的量浓度为2_mol/L的NaCl溶液5 mL。两支试管中其中一支加入DNA丝状物各加入二苯胺4_mL。在沸水浴的条件下遇二苯胺会被染成蓝色因此二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂。　(1)以血液为实验材料时每100 mL血液中需要加入3 g柠檬酸钠防止血液凝固。(2)加入洗涤剂后动作要轻缓、柔和否则容易产生大量的泡沫不利于后续步骤的操作。加入酒精和用玻璃棒搅拌时动作要轻缓以免加剧DNA分子的断裂导致DNA分子不能形成絮状沉淀。(3)鉴定DNA用的染色剂二苯胺试剂要现配现用否则会影响鉴定的效果。 一、选择题由于鸡血没有找到某同学尝试用猪的血液来代替但结果没有成功其最可能的原因是(B)操作方法不对　 B．猪血含DNA过少溶液浓度太高　 D．加二苯胺过少解析：猪的血液中主要是红细胞但猪的成熟红细胞中无细胞核所以猪血细胞中DNA含量低。在下列浓度的NaCl溶液中溶解度最低的是(C)－1　　 B．0.015 mol·L－1－1D．5 mol·L－1的粗提取与鉴定实验与下列哪项原理无关(B)在0.14 mol/L的NaCl溶液中溶解度最低易被龙胆紫溶液染成紫色溶液中加入二苯胺试剂加热后产生蓝色加入95%的冷酒精会从溶液中析出解析：DNA在0.14 mol/L的NaCl溶液中溶解度最低。DNA鉴定选用的试剂为二苯胺试剂加热后(沸水95%的冷却的酒精由于DNA不溶于酒精会从溶液中析出。在利用鸡血进行“DNA的粗提取与鉴定”的实验中相关叙述正确的是(B)用蒸馏水将NaCl溶液的物质的量浓度调至0.14 mol/L滤去析出物调节NaCl溶液浓度或加入木瓜蛋白酶都可以去除部分杂质将丝状物溶解在物质的量浓度为2 mol/L的NaCl溶液中加入二苯胺试剂即呈蓝色用菜花替代鸡血作为实验材料其实验操作步骤相同解析：用蒸馏水将NaCl溶液物质的量浓度调至使DNA析出；调节NaCl溶液的物质的量浓度为2 mol/L过滤可除去不溶的杂质木瓜蛋白酶能够分解蛋白质；在沸水浴的条件下遇二苯胺试剂会被染成蓝色；如果实验材料是植物细胞需要先用洗涤剂瓦解细胞膜。在DNA析出与鉴定实验中加入酒精的目的是(B)溶解DNA除去DNA中所含的杂质析出蛋白质稀释溶液降低浓度解析：DNA不溶于体积分数为95%的酒精溶液而蛋白质可溶从而把蛋白质和DNA分开。下列叙述中错误的是(A)改变NaCl溶液的浓度只能使DNA溶解而不能使其析出在沸水浴中遇二苯胺试剂会呈现蓝色加盐和加酒都能抑制微生物的生长密封瓶口前最好将瓶口通过火焰以防杂菌污染解析：当NaCl溶液的浓度低于0.14 mol/L时随浓度的升高的溶解度降低；当NaCl溶液的浓度高于L时随浓度的升高的溶解度升高；NaCl溶液的浓度为时的溶解度最低；因此改变NaCl溶液的浓度可以使其析出。下列关于“DNA粗提取与鉴定实验”的叙述正确的是(C)洗涤剂能瓦解细胞膜并增加DNA在NaCl溶液中的溶解度将DNA丝状物放入二苯胺试剂中沸水浴后冷却变蓝常温下菜花匀浆中有些酶类会影响DNA的提取用玻棒缓慢搅拌滤液会导致DNA获得量减少解析：洗涤剂可瓦解植物细胞膜有利于释放DNA但不能增加DNA在NaCl溶液中的溶解度项错误；含DNA的丝状物