定量检验的分析性能验证（参考）.ppt

第四步 计算合成不确定度 3.扩展不确定度 扩展不确定度需要给出一个区间，合理地赋予被测量值的数量分布大部分会落在此区间内 扩展不确定度计算 U=K *uc Urel=K*ucrel U为扩展不确定度，Urel为相对扩展不确定度 K为扩展因子。正态分布K=2时，包含概率P=95.43%, K=3时,包含概率P=99.73% 通常采用K=2 测量不确定度的报告 1.血清葡萄糖 GLU=5.13mmol/L,U=0.18mmol/L(K=2) 表示95%的包含概率 2. .血清葡萄糖 GLU=（5.13±0.18）mmol/L(K=2) 表示95%的包含概率 测量不确定度的报告 报告的有效数字，在应用uc和U时大都采用两位有效数字。在最终报告结果时一般做法是降测量不确定度修约到小数后一位（特殊要求例外） 小结 方法学的分析性能验证包涵许多的内容、技术要求较高，在实际工作中，应根据具体情况进行分析，在质量体系允许的范围内，选择合适的试验方法完成此项工作，保留原始数据，结合制定的判断标准，综合分析试验结果，以评价所选的检验程序能否满足临床实验的要求，从而保障检验结果的准确性。 Thanks for your attention 2016.9 温州 三、可报告范围验证 ? 线性范围（Linear Range)是指系统最终的输出值（浓度或活性）与被分析物的浓度成正比的范围。 ? 分析测量范围（Analytical Measurement Range）方法直接测量标本，而不需要任何的稀释、浓缩或者其它预处理等过程下，测量结果总误差符合要求的分析物浓度的范围。 ? 临床可报告范围（Clinically Reportable Range)是方法可采用对标本的稀释、浓缩或者其他预处理用于扩展直接分析测量下的分析物值的范围。 可报告范围（Reportable Range）：实验室可建立或验证仪器或检测系统测量相应的准确度实验结果值的范围。 ? 文件依据 CLSI 颁布的EP6-A文件《定量测量方法的线性评价》 ? 仪器 应有较好的测定精密度及不存在明显的携带污染等。对仪器应进行定期维护及校准，保证其处于 正常状态。 ? 试剂 应注意试剂有效期及批号，不可采用过期试剂或 不同批号的试剂。 ? 校准品 可采用与评价试剂配套的校准品。校准品的使用应严格按照产品说明，仪器校准步骤与间隔应按 照本室的标准操作程序进行。 ? 样品类型 为避免基质效应对结果的影响，选用的样品应与临床实验样品相似，但不可采用含有对测定方法具有明确干扰作用物质的样品，如溶血、脂血、黄疸或含有某些特定药物的样品。样品物浓度应包括试剂厂商提供的试剂所能达到的线性范围。 ? 样品制备 收集临床检测过程中的高值样品（H）和低值样品(L)，若收集不到低值样品，可用生理盐水或蒸馏水替代。将H和L样品按：1L、3L+1H、2L+2H、 1L+3H、1H关系各自配制(必要时可改变比例)混合，形成系列评价样品。 ? 样品测定 在进行线性范围确立时，应进行7-11个浓度水平的样品测定，每个样品重复测定2-4次。进行可报告范围验证时，应进行5个浓度水平的样品测定，每个样品重复测定2次。如果测定方法本身存在明显的携带污染，应根据实际情况采取恰当措施尽量避免对测定结果的影响。 ? 结果分析 1、以预期值为横坐标，以实测值为纵坐标进行线性回归，得到直线回归方程Y＝aX+ b ， a在0.97～1.03范围内，r2＞0.95 ； 2、偏倚在允许误差范围之内。 可报告范围的高限=可接受最大稀释倍数×线性范围（AMR）上限值； 可报告范围的低限：线性范围的检测低限或功能灵敏度为可报告范围的低限。 四、参考区间的验证 验证已知参考区间在本实验室应用的可接受性。 ? 实验方法 1、从健康人群中抽出20个参考个体（最好能够覆盖各个年龄段），依照实验室标准操作规程检测样本。 2、发现离群值应弃用，并新的参考个体代替，以确保测试结果不含离群值。 3、如果20例参考个体中不超过2例（10％的结果）的检测值在参考区间外，则已知的参考区间可以接受。若3例以上超出界限，再选择20个参考个体进行验证，若少于或等于2个检测值超过已知参考限，则已知参考区间可以接受。若又有3个以上超出参考限，则就应该重新检查所用的分析程序，考虑两个样本总体生物学特征上可能存在差异，并且考虑是否按照大规模研究指南建立自己的参考区间。 关键在