园艺植物组织培养要点.ppt

第三章 园艺植物组织培养 内 容（4学时） 第一节 概说 第二节 园艺植物组织培养的应用 第三节 园艺植物原生质体培养和体细胞杂交 第四节 原生质体融合与园艺植物改良 培养室 观赏百合组织培养 第一节 概说 一、园艺植物组织培养的意义 园艺植物组织培养是园艺学不可或缺的一个重要组成部分，为园艺植物的各个基础学科的研究和发展提供了强有力的手段，在园艺学的基础理论研究方面占有重要的地位，在园艺产业中具有广泛的应用前景。园艺植物组织培养技术及理论研究的发展对提高园艺植物生产水平和技术水平，加速园艺科学现代化的进程具有重要作用。 植物组织培养作为一门生物技术近30年发展迅速，广泛应用于农业、园艺、林业、医药。农业生产中进行优良植物种类的快速繁殖，脱除病毒和辅助育种等，并产生巨大的经济效益。现代农业必须用生物技术“提升”，“植物组织培养”就是用生物技术提升农业的重要科学手段。 园艺植物离体无性繁殖 简称离体繁殖（in vitro propagation)、微型繁殖（micropropagation)，是指利用离体培养技术将来自优良植株的茎尖、腋芽、叶片、鳞片等器官、组织和细胞进行离体培养，并在短期内获得大量遗传性一致的个体的方法（技术）。 用这种方法得到的植株群体来自一个单株（或一个单芽），它们遗传组成相同，这些株群可称单株无性系。 园艺植物离体无性繁殖的意义（优越性） 菊花的组培快繁 （一）外植体材料选择与灭菌 选取长势健壮的植株作为外植体母株，以培养出大量的无病植株。 在外植体的选择上，可以选取生长健壮嫩茎和叶片作为材料。流水洗去表面灰尘，在超净工作台用75 %酒精处理20～30 s，再用无菌水冲洗3～5 次，转入0.1 %升汞溶液浸泡7～10 min，再用无菌水冲洗4～6 次，用滤纸吸干水分。 （二）诱导、继代培养 在无菌条件下，用剪刀将外植体茎段切成0. 5～1 cm 长小段，水平放置接种；叶片切成5mm×5mm小块，下表皮朝下水平放置接入初代培养基中，接种完成后即转入培养室进行初代培养，培养温度22～28 ℃，光强1000～4000 Lx。 1.间接再生途径 茎段和叶片接种到培养基上，均可以从一周内，明显可以看到茎段和叶片开始膨大。20d后产生愈伤组织，30d愈伤组织分化出芽。 2.直接再生途径 茎段和叶片接种到培养基上，均可以从一周内，明显可以看到茎段和叶片开始膨大。但是20d后不产生愈伤组织，直接分化出芽。 （三）生根、移栽 当培养基中的植株出芽后，再将其转入到生根培养基中，诱导其生根。或通过无根嫩茎扦插生根。 1.试管生根 切取3cm左右无根嫩茎，转插到1/2MS+NAA0.1培养基中，经两周即可生根，然后移栽驯化。移栽初期保持高湿度条件，营养钵基质浇透水，取出生根的试管苗，洗掉附加在根部的培养基，用竹签在基质上打一小孔，将幼苗插入基质中。然后家设小拱棚以保湿，随着幼苗的生长，逐渐降低空气湿度和基质含水量，转为正常的管理阶段。 2.扦插生根 利用菊花无根嫩茎易于生根的特点，也可免去试管生根这道程序。剪取2～3cm无根苗，插植到珍珠岩或蛭石的基质中，基质事先用生根激素溶液浸透，10d后生根率可达95%～100%。 园艺植物离体无性繁殖的方式 器官发生型(organogenesis type) 胚状体发生型(embryogenesis type) 不定芽型（adventitious bud type) 器官型(organ type) 原球茎型(protocorm type) 球茎芽型 块茎型 鳞茎型 孢子型 根茎型 微枝扦插型 器官发生型(organogenesis type)： 诱导器官外植体产生愈伤组织，经分化培养形成芽、根再生成植株的方式。 技术关键：外植体诱导产生的愈伤组织要早期挑选，使其来源尽量一致。 特点：繁殖速度快；培养经愈伤组织阶段再生成植株，遗传性不稳定，易产生变异。 芦荟组织培养快速繁殖 材料和培养基 10～15cm高的芦荟幼苗 愈伤组织诱导培养基 MS＋(1-6mg/L)BA+(0.1-0.5mg/L)NAA 分化培养基 MS＋(2-4mg/L)BA+(0.1-0.5mg/L)NAA 生根培养基 MS＋(0.1-0.5mg/L)IBA+(2-5mg/L)多效唑 繁殖方法 愈伤组织培养 外植体：茎尖 外植体消毒：酒精＋升汞 培养基：愈伤组织诱导培养基 培养条件：温度 25±2℃ 光照 1000~2000lx 10~12h/d 培养时间 15～25d （形成愈伤） 繁殖方法 继代培养 种子 愈伤切块 培养基及条件 同愈伤组织培养 培养时间 10～