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实验指导doc
实验一 戊巴比妥钠半数有效量(ED50)和半数致死量(LD50)的测定
【实验目的】
1.用小白鼠求戊巴比妥钠的ED50
2.实验示例戊巴比妥钠的LD50以供参考。
3.求其治疗指数。
【实验原理】
1.戊巴比妥钠为镇静睡眠药,随着剂量的加大,相继出现镇静、催眠、抗惊厥、麻醉、死亡。
2.药物效应与药物剂量的关系称量效关系,从不同角度观察,有量反应与质反应之分。量反应:特定反应程度与剂量的关系,如血压的升高、血糖的降低等。质反应:特定出现与否与剂量的关系,如死亡与否、阳性或阴性等。
3.质反应实验中,以对数剂量为横坐标,反应百分率为纵坐标绘图,形成一条对称的“S”形曲线。半数有效量(ED50):50%的实验对象有效时对应的剂量。半数致死量(LD50):50%的实验对象死亡时对应的剂量。
4.测定ED50的方法很多,但仍以改良的寇氏法计算简便,结果较准确,比较常用。
一、戊巴比妥钠半数有效量(ED50)的测定
【材料与方法】
一、实验动物:小白鼠,雌雄各半,18~22g。
二、器材与药品:鼠笼×2个、天平×1个、注射器1ml(或0.25ml)×1支、注射针头51/2×1个、0.5%苦味酸(一支棉签)、戊巴比妥钠溶液(浓度为0.49%,0.39%,0.31%,0.25%,0.20%)。
三、方法与步骤:
1.取小鼠10只,分为5组,每组2只,称重。每组分别给与腹腔注射不同剂量戊巴比妥钠49、39、31、25、20 mg/kg,以翻正反射消失作为入睡指标,给药15分钟后,记录各组出现催眠反应的鼠数。
2.汇总整个实验室各浓度组催眠反应的鼠数后记入下表,采用公式ED50=1og-1[Xm-i(Σp-0.5)] (其中Xm=最大剂量对数值,P=动物催眠率(用小数表示),Σp=各组死亡率的总和,i=相邻两组剂量比值的对数(高剂量做分子))计算或机率单位—对数剂量作图法求得出现催眠反应的ED50记入下表。
不同剂量戊巴比妥钠对小鼠的影响
组别 剂量D(mg/kg) 1ogD 实验
鼠数 催眠
鼠数 催眠反应
百分率% P ED50(mg/kg) 1 49 1.6900 2 39 1.5911 3 31 1.4911 4 25 1.3979 5 20 1.3010
二、戊巴比妥钠半数致死量(LD50)的测定(实验示例,供同学参考)
【材料与方法】
一、实验动物:小白鼠,雌雄各半,18~22g。
二、器材与药品:鼠笼×2个、天平×1个、注射器1ml(或0.25ml)×1支、注射针头51/2×1个、0.5%苦味酸(一支棉签)、戊巴比妥钠溶液(浓度为1.875%,1.50%,1.20%,0.96%,0.72%)。
三、方法与步骤:
1.取小鼠50只,分为5组,每组10只,称重。每组分别给与腹腔注射不同剂量戊巴比妥钠187.5、150、120、96、720 mg/kg,给药后24小时,记录各组死亡鼠数。
2.各浓度组死亡鼠数后记入下表,采用公式ED50=1og-1[Xm-i(Σp-0.5)]计算或机率单位—对数剂量作图法求得戊巴比妥钠LD50记入下表。
结果:
LD50=㏒-1[Xm-i(ΣP-0.5)]计算或机率单位—对数剂量作图法求得LD50=120mg/kg。
不同剂量戊巴比妥钠对小鼠的影响
组别 剂量D
(mg/kg) 1ogD 实验鼠数 死亡鼠数 死亡反应百分率(%) P LD50(mg/kg) 1 187.5 2.273 10 10 100 1.0 120 2 150.0 2.176 10 7 70 0.7 3 120.0 2.079 10 6 60 0.6 4 96.0 1.982 10 2 20 0.2 5 72.0 1.857 10 0 0 0 附计算过程:
按公式LD50=1og-1[Xm-i(Σp-0.5)]计算,求LD50。
其中Xm=最大剂量对数值
P=动物死亡率(用小数表示)
Σp=各组死亡率的总和
i=相邻两组剂量比值的对数(高剂量做分子)
将实验结果代入上述公式
Xm=1og187.5=2.273
Σp=1.0+0.7+0.6+0.2+0=2.5
i=1og =1og1.25=0.0969
LD50=1og-1[Xm-i(Σp-0.5)]
=1og-1[2.273-0.0969(2.5-0.5)]
=1og-1[2.273-0.1938]= 1og-12.0792
=120.0(mg/kg)
三、戊巴比妥钠治疗指数的测定
由以上实验所测得戊巴比妥钠的LD50和ED50,求得治疗指数。
治疗指数=
【注意事项】
1.
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