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专题1基因工程
专题1 基因工程
考纲要求:
基因工程的诞生 了解 基因工程的原理及技术 了解 基因工程的应用 了解 基因诊断和基因治疗 了解 蛋白质工程 了解 一、本专题知识网络
二、高考趋势分析
纵观近几年高考命题,本专题是高考的重点内容之一。
遗传学基础理论、中心法则等内容常常与基因工程综合考查,是高考的热点,基因工程中的三个基本工具和基本操作程序,是选择题、填空题中常出现的重点内容。
基因工程的应用实例常常与基因工程的步骤和基本工具联合起来考查。
蛋白质工程是第二代基因工程,尚处于理论水平,渗透着生物学的原理和思维方式,随着其发展也必将成为高考的又一热点。
课题1 DNA 重组技术的基本工具
一、课标导航:
基因工程的概念、限制性核酸内切酶、DNA连接酶、基因进入受体细胞的载体。
二、知识体系
1.知识梳理
2.方法、技巧、规律总结
限制酶切割的是磷酸二酯键,而DNA连接酶连接得正是两断开此键的DNA片段。“分子运输车”是目的基因进入受体细胞的载体,它具有的若干特点是基因工程鉴定、选择、表达的关键,可以说没有它,目的基因即使进入受体细胞,也难以稳定保存,更谈不上复制和表达。
3.思维误区提示
DNA连接酶与DNA聚合酶根本不是同类酶,基功能特点大不相同,注意掌握他们的三个区别。
三、典型例题
例1:下图示限制酶切割某DNA分子的过程,从图中可知,该限制酶能识别的碱基序列及切点是( )
A.CTTAAG,切点在C和T之间
B.CTTAAG,切点在C和A之间
C.CAATTC,切点在G和A之间
D.CAATTC,切点在C和T之间
答案:C
解释:由题意知,该限制酶认别的核苷酸序列是GAATTC,专一切口是G和A。切出的两个完全相同的黏性末端是AATT和AATT,两个黏性末端的关系是碱基互补配对。解决类型题的规律是,DNA限制酶具有专一性,专业识别特定的核苷酸序列和酶切位点,切出的DNA片段具有两个完全相同的黏性末端,而且两个黏性末端互补配对。
例2:质粒之所以能做基因工程的运载体,是由于它( )
A.含蛋白质,从而能完成生命活动
B.能够自我复制,而保持连续性
C.是RNA,能够指导蛋白质的合成
D.具有环状结构,能够携带目的基因
答案:B
解释:质粒存在于细菌和酵母菌等生物中,是一种很小的环状DNA,上有标记基因,便于在受体细胞中检测。质粒在受体细胞中,能随受体细胞DNA复制而复制,进行目的基因的扩增和表达。
解决该类型题的规律,作为运载体应该具备四个条件:一是对受体细胞生命活动不起决定性作用;二是能够随受体细胞的无性繁殖进行DNA扩增;三是多个限制酶切点,便于目的基因的连接;四是有标记基因,利于目的基因检测。
例别双链DNA的某种特定核苷酸序列,并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开;DNA分子经限制酶切割会形成黏性未端和平末端两种形式。
例4关于限制酶的说法中,正确的是( )
A.限制酶是一种酶,只识别GAATTC碱基序列
B.EcoRI切割的是G—A之间的氢键
C.限制酶一般不切割自身的DNA分子,只切割外源DNA
D.限制酶只存在于原核生物中
答案:C
例5 DNA连接酶催化的反应是(3: 下列关于限制酶的说法正确的是( )
A. 限制酶广泛存在于各种生物中,但微生物中很少
B. 一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列
C. 不同的限制酶切割DNA后都会形成黏性末端
D. 限制酶的作用部位是特定核苷酸形成的氢键
答案:B
解释:此题主要考查限制酶的有关知识。限制酶能识 )
A.DNA复制时母链与子链之间形成氢键
B.黏性末端碱基之间形成氢键
C.两个DNA片段黏性末端之间的缝隙的连接
D.A、B、C都不正确
答案:C
解释:本题考查的是DNA连接酶的功能。对于它的功能有很形象的说法:将梯子两边的扶手的断口处连接起来。实际上就是在相邻的脱氨核苷酸之间形成磷酸二酯键,把两个DNA片段末端之间的缝隙“缝合”起来,而不是在碱基之间形成氢键。
例6 作为基因的运输工具——载体,必须具备的条件及理由是( )
A. 能够在宿主细胞中稳定地保存下来并大量复制,以便提供大量的目的的基因
B. 具有多个限制酶切点,以便于目的基因的表达
C. 具有某些标记基因,以便于目的基因的表达提供条件
D. 能够在宿主细胞中复制并稳定保存,以便于进行筛选
答案:A
例7: 以下是两种限制酶切割形成的DNA片段,分析回答问题。
①GC… ②AATTC… ③…GC ④…CTTAA
CG… C…
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