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模型及实验仪器耗材
ELISA法检测大鼠血清中FSH、LH、E2、T水平
1.1实验药品试剂
生理盐水批号山东康宁药业有限公司;
无水乙醇,批号:32061,天津恒兴化学试剂制造有限公司;
水合氯醛,批号上海国药集团化学试剂有限公司;
LHELISA试剂盒,武汉俊泰生物技术有限公司,批号:E2ELISA试剂盒,武汉俊泰生物技术有限公司,批号:
TELISA试剂盒,武汉俊泰生物技术有限公司,批号:1.2实验仪器
EP管,型号:1.5ml,美国Axygen公司;
玻璃匀浆器,型号:1ml,武汉科瑞生物技术有限公司;
移液器,型号:0.1-2.5μL,0.5-l0μL,20-200μL,100-1000μL,美国Thermo公司;
电子天平,型号:PL203,上海梅特勒——托利多仪器有限公司;
高压蒸汽灭菌锅,型号:YXQ-LS-75G,常州诺基仪器有限公司
全自动干燥箱,型号:DHG-9640C,杭州蓝天公司
超低温冰箱,型号:T11-86-340-LA,北京天地精仪科技有限公司;
低温高速离心机,型号:CR21GⅡ,日本日立公司;
多功能酶标仪,型号:spectraMAXM5,上海美谷分子仪器有限公司;
1.实验药品试剂
生理盐水批号山东康宁药业有限公司;
无水乙醇,批号:32061,天津恒兴化学试剂制造有限公司;
水合氯醛,批号上海国药集团化学试剂有限公司;
DEPC,武汉科瑞生物技术有限公司;
TRIzol,批号:15596-026,美国Lifetechnologies公司;
氯仿,批号:100068608,上海国药集团化学试剂有限公司;
异丙醇,批号:32064,天津恒兴化学试剂制造有限公司;
逆转录试剂盒批号:RR047A,宝生物工程(大连)有限公司(大连TaKaRa公司);
SYBRPremixExTaq[TM]批号:RR420A,宝生物工程(大连)有限公司(大连TaKaRa公司);
W
生理盐水批号山东康宁药业有限公司;
无水乙醇,批号:32061,天津恒兴化学试剂制造有限公司;
水合氯醛,批号上海国药集团化学试剂有限公司;
脱脂奶粉武汉科瑞生物技术有限公司;
Tween-20武汉科瑞生物技术有限公司;
考马斯亮蓝快速染色液武汉科瑞生物技术有限公司;
丽春红染液武汉科瑞生物技术有限公司
氯化钠,批号:1266-2006,天津恒兴化学试剂制造有限公司
Glycine,武汉科瑞生物技术有限公司;
TrisBase,武汉科瑞生物技术有限公司;
SDS,武汉科瑞生物技术有限公司;
二甲苯,批号上海国药集团化学试剂有限公司;
HCl,批号:81013,中国平煤神马集团开封东大化工有限公司;
SDS凝胶配制试剂盒批号:P0012A,上海碧云天生物技术有限公司;
TEMED批号:ST728,上海碧云天生物技术有限公司;
Western一抗二抗去除液(强碱性)批号:P0025,上海碧云天生物技术有限公司;
WesternBlot超敏发光液,批号:P1010,北京普利莱基因技术有限公司;
RIPA裂解液,批号:P0013,上海碧云天生物技术有限公司;
PMSF,批号:329-98-6,北京中生瑞泰科技有限公司;
BCA试剂盒,批号:P0010S,上海碧云天生物技术有限公司;
Prestainedproteinloadingbuffer,批号:26617,美国Thermo公司;
PrestainedproteinMWmarker,批号:26616,美国Thermo公司;
5×Loadingbuffer,武汉科瑞生物技术有限公司;
硝酸纤维素膜,批号:T328591,美国Lifetechnologies公司;
一抗:GAPDH抗体;抗体美国millipore公司
二抗:羊抗兔二抗,羊抗鼠二抗,鼠抗羊二抗武汉科瑞生物技术有限公司;
β-actin引物、引物英潍捷基(上海)贸易有限公司合成并经质量检测。引物序列见表。
目的基因 引物序列 产物长度 β-actin Forward:5′-CATCCGTAAAGACCTCTATGCCAAC-3′ 171bp Reverse:5′-ATGGAGCCACCGATCCACA-3′ Forward:5′-CAGACTCATGATGACAGAGG-3′ 381bp Reverse:5′-GAGATGTACAGGATCTTCCC-3′
1.3实验仪器
EP管,型号:1.5ml,美国Axygen公司;
玻璃匀浆器,型号:1ml,武汉科瑞生物技术有限公司;
移液器,型号:0.1
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