三合一清洗验证讲解.doc

2006年新车间杆菌肽 洗涤过滤干燥机 清洗验证方案 文件编号：三合一清洗AmB-PV-F 1 目的 通过清洗验证，验证杆菌肽洗涤过滤干燥机清洗操作的适用性及有效性，确认按照清洗操作规程操作，设备上的杆菌肽的残留达到了规定的清洁限度要求，不会对下批或更换品种后的生产造成交叉污染。 2 系统简介 2.1 设备简图 2.2 概述：60~120分钟。 开洗涤过滤干燥机搅拌，确认搅拌转速为最小值，将搅拌桨慢下至最低位置。打开平衡阀、真空阀，保持一定的真空度。打开夹套热水阀门，调节水温在所需范围内，待洗涤过滤干燥机温度（下部温度计）升到40℃以上时，开始进行真空干燥。控制洗涤过滤干燥机温度，干燥36~37小时。 本系统为温州亚光机械制造有限公司生产的集过滤、洗涤、干燥为一体的三合一设备。该设备为不锈钢制立式容器，由罐体装置、搅拌装置、轴端密封装置、升降机构、液压装置、罐底座（可拆卸）、加热装置、传动装置、过滤装置、卸料装置、取样装置、洗涤灭菌装置、行程指示装置、触摸屏与手动操作控制装置等部件组成。可在同一容器内完成滤、洗涤、干燥全过程连续操作。设备在真空状态下操作，实现固液分离；其内侧装有两个360°旋转的喷淋球，使清洗液均匀分布于容器内，通过升降桨叶搅拌将滤饼和清洗液混合，使浆状结晶及滤饼得到充分洗涤；滤饼被搅拌桨叶逐层刮松，均匀对滤饼加热，同时用热水对湿物料加热，加速蒸发干燥。排气口安装有过滤精度为0.2μm的呼吸器，进罐溶媒经过0.2μm的过滤器。管路全部使用卫生级不锈钢管道连接，设计和安装时避免了死角、盲端。 杆菌肽在生产过程中容易附着在洗涤过滤干燥机的内壁、搅拌桨等部位上。在批号结束时，需要将这些残留在设备上的杆菌肽清洗干净才能进行下一批的生产，以避免对下一批产品产生污染。 两性霉素B不易溶于水，所以采用人工擦拭与三乙胺的乙醇溶液浸泡的方法，用注射用水进行最后的冲洗。 洗涤过滤干燥机每批清洗一次。 3 范围 本验证是对杆菌肽洗涤过滤干燥机的清洗方法的验证。 4 可接受的标准 4.1注射用水 序号 检测项目名称 标 准 1 性状 无色澄明液体、无臭、无味 2 电导率 ≤1.1μs/cm 3 TOC ≤500ppb 4 细菌内毒素 ＜0.25EU/ml 5 微生物限度 ＜10CFU/100ml 4.2清洗水样 序 号 检测项目名称 标 准 1 杆菌肽允许残留浓度 ≤10ppm 2 乙醇允许残留浓度 ≤10ppm 3 三乙胺允许残留浓度 ≤10ppm 4.3表面擦拭样 ＜0.1%0cm×10cm，每擦拭一个区域，换一根棉签。 6.3.2.4擦拭完毕后将棉签放入盛有5mlDMSO的试管中，加塞，标识次序。放置10min钟使两性霉素B溶出，挤干棉签，用5mlDMSO润洗三次，测定DMSO溶液中两性霉素B的含量。 6.3.2.5 制备对照样品：按照6.3.2.2相关内容，湿润棉签，将棉签直接放入试管并加塞。 6.3.2.6 在试管上标明名称、位置、编号及取样日期。 6.3.3 取样方法验证 6.3.3.1 准备一块500×500mm的不锈钢板，平整即可。 6.3.3.2 用钢锥划出400×400mm的区域，每搁100mm划线，形成16个100×100mm的方块。 6.3.3.3 精密称取0.0080g两性霉素B，DMSO溶解后用乙醇定容至50ml。 6.3.3.4 用微量移液器准确移取0.625ml上述溶液，分五次移至100×100mm的方块中，使其均匀分布。 6.3.3.5 根据实际转移的溶液体积计算单位面积的两性霉素B的含量（约1μg/cm2）。 6.3.3.6 自然干燥或用电吹风温和地吹干表面。 6.3.3.7 按照6.3.2.2擦拭表面，每擦一个方块（100cm2）换一根擦拭棒，共擦6个方块。 6.3.3.8擦拭完成后，将棉签放入盛有5mlDMSO的试管中，加塞。放置10min钟使两性霉素B溶出，挤干棉签，用5mlDMSO润洗三次，测定DMSO溶液中两性霉素B的含量。 6.3.3.9 计算回收率和回收率的RSD。 6.3.3.10 可接受的标准 取样回收率大于70%，体现重现性多次取样回收率的RSD小于20%。 6.4 检查方法 6.4.1 污物目测 人工擦拭后，检查洗涤过滤干燥机罐壁、罐底、搅拌桨、波纹管及出料口处，无明显的目测污物。 6.4.2 HPLC法 表面擦拭样用HPLC法测定。 6.4.2气相色谱法 清洗水样用气相色谱法测定。 6.5 检查频率 全面检查设备的清洗效果3次，连续检查3批。 7 验证记录 8 数据分析 对检验数据进行统计分析，记